免疫荧光试验课件及教案
免疫荧光试验课件及教案,免疫,荧光,试验,课件,教案
授课题目荧光免疫试验教材临床免疫学检验技术实验指导授课方式实验课学时4学时授课时间2016.45教学手段多媒体教学教学目的掌握:荧光免疫试验的原理、方法和结果判定。熟悉:方法学评价教学重点荧光免疫试验的原理、方法和结果判定。教学难点荧光免疫试验的原理。教 学 过 程及时间分配教 学 内 容教学方法15min讲 授(30min)学生操作 (100min)写实验报告 (50min)回顾课堂荧光免疫试验原理和方法了解荧光显微镜实验 小鼠体内淋巴细胞转化实验 直接免疫荧光法检测B细胞SmIgM原理:人外周血B细胞膜SmIgM与羊抗人荧光抗体结合,在荧光显微镜下,观察B细胞呈明亮黄绿色荧光,T细胞无荧光现象。材料:载玻片、推片、甲醇、FITC标记羊抗人抗体、湿盒、温箱、生理盐水、荧光显微镜。方法:1 取人末梢血:消毒,用采血针釆血后止血。2 取一滴血,推片,干燥后,滴入甲醛固定3min3 用记号笔划圈,加荧光标记羊抗人抗体(1:10) 0.2mL,放入湿盒60min。4 生理盐水冲洗(多次),干燥,镜检(看片时滴加无荧光镜油)。结果:B淋巴细胞膜,胞浆呈明亮黄绿色,T和NK无荧光 B淋巴细胞 实验小结完成实验报告导入新课讲授法启发式CAI本课题方面的新进展新型荧光素;荧光酶免疫测定的应用例 题荧光免疫学试验的方法学评价作 业 题荧光免疫试验的原理、方法和结果判定。专业外语词 汇fluoroimmunoassayfluorescein isothiocyanate 主要参考资 料临床免疫学检验技术实验指导课堂演示实 验无课 堂 总 结1.直接荧光免疫试验的的原理2.荧光免疫学试验的方法学评价课 后 记(课后总结)培养学生严谨的实验操作意识,注意教学方法,引起学生学习兴趣。备 注临床免疫检验实验临床免疫检验实验荧光免疫试验荧光免疫试验Fluoroimmunoassay荧光免疫试验(荧光免疫试验(fluoroimmunoassay):fluoroimmunoassay):以荧光物质标记抗体和抗原,通过与以荧光物质标记抗体和抗原,通过与相应抗原或抗体发生特异性结合反应,以相应抗原或抗体发生特异性结合反应,以此对待测物进行此对待测物进行定位、定性和定量定位、定性和定量分析的分析的检测技术,具有高度检测技术,具有高度特异性、敏感性和直特异性、敏感性和直观性观性,是,是最早最早出现的免疫标记技术。出现的免疫标记技术。分类:分类:直接、间接、双标记法直接、间接、双标记法荧光显微镜荧光显微镜 利用一定波长的激发利用一定波长的激发光对待测标本进行激发,光对待测标本进行激发,产生一定波长的荧光,产生一定波长的荧光,对组织细胞结构或其组对组织细胞结构或其组分进行定性、定位和半分进行定性、定位和半定量分析检测。定量分析检测。直接免疫荧光法原理:直接免疫荧光法原理:+底物底物二抗二抗/Ab2/Ab2兔源一抗兔源一抗/Ab1/Ab1AgAgAgAgB B细胞细胞FB B细胞细胞B B细胞细胞FF激发产生荧光激发产生荧光 方法:方法:1 1 取人末梢血:消毒,用采血针釆血后止血。取人末梢血:消毒,用采血针釆血后止血。2 2 取一滴血,推片,干燥后,滴入甲醛固定取一滴血,推片,干燥后,滴入甲醛固定3min3min3 3 用记号笔划圈,加用记号笔划圈,加荧光标记羊抗人抗体荧光标记羊抗人抗体(1:101:10)0.2mL0.2mL,放入湿盒,放入湿盒60min60min。4 4 生理盐水冲洗(多次),干燥,镜检(看片时生理盐水冲洗(多次),干燥,镜检(看片时 滴加无荧光镜油)。滴加无荧光镜油)。实验结果:实验结果:B B淋巴细胞膜,胞浆呈明亮黄绿色,淋巴细胞膜,胞浆呈明亮黄绿色,T T和和NKNK无荧光无荧光
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