自身免疫病及免疫检验

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1、人民卫生出版社人民卫生出版社免疫学检验免疫学检验人民卫生出版社人民卫生出版社第二十五章第二十五章 自身免疫病及免疫检验自身免疫病及免疫检验人民卫生出版社人民卫生出版社目录目录 概述概述 1自身免疫病的发病机制自身免疫病的发病机制2自身免疫病检验自身免疫病检验3自身抗体检测实验选择的原则自身抗体检测实验选择的原则4人民卫生出版社人民卫生出版社 1.自身耐受自身耐受(self-tolerance) 正常情况下，免疫系统对宿主自身的组织和细正常情况下，免疫系统对宿主自身的组织和细胞不产生免疫应答。胞不产生免疫应答。 2.自身免疫自身免疫 (autoimmunity) 当某种原因使自身耐受当某种原因使

2、自身耐受性破坏时，免疫系统性破坏时，免疫系统就会对自身组织成分、细胞成分及其产物发生免就会对自身组织成分、细胞成分及其产物发生免疫应答。疫应答。第一节第一节 概述概述一、基本知识一、基本知识人民卫生出版社人民卫生出版社3.3.自身免疫病自身免疫病( (autoimmune disease，AID) ) 自身免疫应答过强或持续时间过久，表现为质自身免疫应答过强或持续时间过久，表现为质和量的异常，所产生的自身抗体和（或）自身致敏和量的异常，所产生的自身抗体和（或）自身致敏淋巴细胞对表达自身靶抗原的细胞和组织发动攻击，淋巴细胞对表达自身靶抗原的细胞和组织发动攻击，导致损伤或功能障碍，并出现相应临床症

3、状。导致损伤或功能障碍，并出现相应临床症状。人民卫生出版社人民卫生出版社二、自身免疫病的分类二、自身免疫病的分类1.1.按病程分为急性和慢性两种按病程分为急性和慢性两种2.2.按病因清楚与否分为原发性与继发性两种按病因清楚与否分为原发性与继发性两种3.3.按受累的解剖系统分为结缔组织病、神经肌肉按受累的解剖系统分为结缔组织病、神经肌肉疾病、消化系统病和内分泌疾病等疾病、消化系统病和内分泌疾病等4.4.按自身抗原的分布范围分为器官特异性和非器按自身抗原的分布范围分为器官特异性和非器官特异性两类官特异性两类人民卫生出版社人民卫生出版社分类分类疾病疾病结缔组织结缔组织系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风

4、湿性关节炎、混合系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风湿性关节炎、混合性结缔组织病性结缔组织病内分泌系统内分泌系统桥本甲状腺炎、桥本甲状腺炎、Graves病、病、Addison病、胰岛素依赖性病、胰岛素依赖性糖尿病糖尿病消化系统消化系统萎缩性胃炎、溃疡性胃炎、原发性胆汁性肝硬化萎缩性胃炎、溃疡性胃炎、原发性胆汁性肝硬化血液系统血液系统恶性贫血、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少恶性贫血、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜性紫癜心血管系统心血管系统风湿性心肌炎风湿性心肌炎泌尿系统泌尿系统肾小球肾炎肾小球肾炎呼吸系统呼吸系统特发性肺纤维化特发性肺纤维化神经系统神经系统重症肌无力、多发性神经

5、炎重症肌无力、多发性神经炎皮肤皮肤荨麻疹荨麻疹按发病部位的解剖系统分类按发病部位的解剖系统分类人民卫生出版社人民卫生出版社器官特异性自身免疫病器官特异性自身免疫病器官非特异性自身免疫病器官非特异性自身免疫病患者的病变常局限于患者的病变常局限于某一特定的器官，由某一特定的器官，由对器官的特异性抗原对器官的特异性抗原的免疫应答引起的免疫应答引起全身性或系统性自身全身性或系统性自身免疫性疾病；患者的免疫性疾病；患者的病变可见于多种器官病变可见于多种器官及结缔组织（结缔组及结缔组织（结缔组织病或胶原病）织病或胶原病）按自身抗原的分布范围分类按自身抗原的分布范围分类人民卫生出版社人民卫生出版社器官特异性

6、器官特异性病病 名名自自 身身 抗抗 原原桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎甲状腺球蛋白和甲状腺微粒体甲状腺球蛋白和甲状腺微粒体甲状腺功能亢进甲状腺功能亢进( (Graves病病) )TSH受体受体Addison病病肾上腺皮质细胞肾上腺皮质细胞自身免疫性萎缩性胃炎自身免疫性萎缩性胃炎胃壁细胞、内因子胃壁细胞、内因子溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎结肠黏膜细胞结肠黏膜细胞重症肌无力重症肌无力乙酰胆碱受体乙酰胆碱受体交感性眼炎交感性眼炎眼晶状体蛋白眼晶状体蛋白胰岛素依赖型糖尿病胰岛素依赖型糖尿病胰岛胰岛细胞细胞胰岛素抵抗型糖尿病胰岛素抵抗型糖尿病胰岛素受体胰岛素受体原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化小胆管上皮细胞

7、小胆管上皮细胞人民卫生出版社人民卫生出版社器官非特异性器官非特异性病病 名名自自 身身 抗抗 原原SLESLE细胞核成分、细胞浆成分细胞核成分、细胞浆成分RARA变性变性IgG、类风湿相关的核抗原、类风湿相关的核抗原SSSS涎腺上皮细胞涎腺上皮细胞混合性结缔组织病混合性结缔组织病细胞核细胞核( (RNP) )自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血红细胞红细胞特发性血小板减少性紫癜特发性血小板减少性紫癜血小板血小板特发性白细胞减少症特发性白细胞减少症白细胞白细胞硬皮病硬皮病细胞核蛋白、细胞核染色体着丝点细胞核蛋白、细胞核染色体着丝点多发性肌炎多发性肌炎细胞核蛋白细胞核蛋白人民卫生出版社人民卫生

8、出版社三、自身免疫病的共同特点三、自身免疫病的共同特点1.1. 血清中有自身抗体或自身反应性致敏血清中有自身抗体或自身反应性致敏T T淋巴细胞。淋巴细胞。自身抗体和（或）自身反应性自身抗体和（或）自身反应性T T细胞作用于靶抗原所细胞作用于靶抗原所在的组织细胞，导致组织损伤和功能障碍。在的组织细胞，导致组织损伤和功能障碍。2.2.可复制出与可复制出与AIDAID相似的动物模型，并可通过血清或相似的动物模型，并可通过血清或致敏的淋巴细胞使疾病被动转移。致敏的淋巴细胞使疾病被动转移。3 3有一定的遗传倾向。病情转归与自身免疫反应的有一定的遗传倾向。病情转归与自身免疫反应的强度密切相关。强度密切相关

9、。4 4部分自身免疫病好发于女性，且发病率随年龄增部分自身免疫病好发于女性，且发病率随年龄增长而上升。长而上升。5 5免疫抑制剂治疗有效但不能根治。免疫抑制剂治疗有效但不能根治。人民卫生出版社人民卫生出版社一、自身抗原形成一、自身抗原形成第二节第二节 自身免疫病的发病机制自身免疫病的发病机制1.隐蔽抗原的释放隐蔽抗原的释放 2.自身抗原改变自身抗原改变交感性眼炎交感性眼炎人民卫生出版社人民卫生出版社3.分子模拟分子模拟4表位扩展表位扩展人民卫生出版社人民卫生出版社2.B2.B细胞的多克隆激活细胞的多克隆激活二、免疫细胞和免疫调节二、免疫细胞和免疫调节功能功能的异常的异常3.3.调节性调节性T

10、T细胞的功能异常细胞的功能异常1.T1.T、B B细胞的异常活化细胞的异常活化4.4. MHC-IIMHC-II类分子异常表达类分子异常表达人民卫生出版社人民卫生出版社三、遗传因素三、遗传因素自身免疫病自身免疫病HLA HLA 基因基因相关系数相关系数强直性脊柱炎强直性脊柱炎 B27B27 87874 4全身性红斑狼疮全身性红斑狼疮 DR2/DR3DR2/DR35 58 81 1型糖尿病型糖尿病 DR3/DR4DR3/DR41010类风湿性关节炎类风湿性关节炎DR4DR44 42 2GravesGraves病病DR3DR33 3桥本氏甲状腺炎桥本氏甲状腺炎 DR5DR53 3多发性硬化多发性硬

11、化DR2DR24 41 1重症肌无力重症肌无力 DR3DR32 25 5HLA HLA 基因与自身免疫病相关性举例基因与自身免疫病相关性举例人民卫生出版社人民卫生出版社四、生理因素四、生理因素五、环境因素五、环境因素 1. 1.自身免疫病的发病率随年龄增长呈上升趋势；自身免疫病的发病率随年龄增长呈上升趋势； 2.2.自身免疫病的发病也具有明显的性别差异，女自身免疫病的发病也具有明显的性别差异，女性发病率较高性发病率较高 自身免疫病的发生与日晒、潮湿、寒冷等环境因自身免疫病的发生与日晒、潮湿、寒冷等环境因素可能有关。素可能有关。人民卫生出版社人民卫生出版社1.1.自身抗体介导细胞破坏自身抗体介导

12、细胞破坏 六、自身免疫病的病理损伤机制六、自身免疫病的病理损伤机制病理机制病理机制：IIII型超敏反应型超敏反应常见疾病常见疾病：新生儿溶贫、重症肌无力、：新生儿溶贫、重症肌无力、GravesGraves病病人民卫生出版社人民卫生出版社自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血人民卫生出版社人民卫生出版社重症肌无力重症肌无力 人民卫生出版社人民卫生出版社GravesGraves病病人民卫生出版社人民卫生出版社3.3.自身反应性自身反应性T T细胞引发炎症性损伤细胞引发炎症性损伤 2.2.循环免疫复合物介导组织损伤循环免疫复合物介导组织损伤 病理机制病理机制：IIIIII型超敏反应型超敏反应病理机

13、制病理机制：IVIV型超敏反应型超敏反应人民卫生出版社人民卫生出版社抗核抗体（抗核抗体（antinuclear antibody，ANA) ) 是以真核细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的是以真核细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称；在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质，总称；在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质，激发机体产生许多抗不同核成分的抗体。激发机体产生许多抗不同核成分的抗体。第三节自身免疫病检验第三节自身免疫病检验一、自身抗体的检测一、自身抗体的检测（一）抗核抗体检测（一）抗核抗体检测人民卫生出版社人民卫生出版社lANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；lANA无器官

14、特异性和种属特异性；lANA主要存在于血清中；l将检出ANA作为AID存在的依据。人民卫生出版社人民卫生出版社 抗抗DNA抗体：抗体：抗抗dsDNA/ /抗抗nDNA、抗、抗ssDNA/ /抗抗dDNA等等 抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体( (AHA) )：抗抗H1、抗、抗H2A、抗、抗H2B、 抗抗H3、抗、抗H4抗体等抗体等 抗非组蛋白抗体：抗非组蛋白抗体：抗抗nRNP/ /抗抗U1RNP、抗、抗Scl-70、 抗抗SSA、抗、抗Sm、抗、抗SSB、抗、抗Jo-1、抗、抗Rib抗体、抗体、 AnuA、抗、抗DNP、抗、抗DM53抗体抗体 抗抗RANA抗体、抗着丝点、抗抗体、抗着丝点、抗Ku抗体等

15、抗体等 抗核仁抗体：抗核仁抗体：抗抗PM-Scl抗体、抗抗体、抗Th/To抗体、抗体、 抗抗U3-RNP、抗、抗4-6-S-RNA抗体等抗体等1.1.ANA的类型和临床意义的类型和临床意义 ANA谱谱人民卫生出版社人民卫生出版社 抗天然抗天然DNA ( (native DNA,nDNA) ) 抗体抗体，又称抗双，又称抗双链链DNA (double stranded DNA,dsDNA) 抗体。抗体。抗变性抗变性DNA (denatured DNA,dDNA) 抗体抗体，又称抗单，又称抗单链链DNA (single stranded DNA,ssDNA)抗体。抗体。对对SLE有高特异性有高特异性

16、; ;SLE诊断标准之一诊断标准之一缓解期降低缓解期降低70%90%SLE活动期增高活动期增高药物疗效药物疗效抗抗dsDNA抗体抗体 抗抗DNA抗体抗体人民卫生出版社人民卫生出版社 抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由由H1、H2A、H2B、H3和和H4五个亚单位，各自都五个亚单位，各自都 有特异性抗体；有特异性抗体；AHA检检出出百百分分率率抗抗dsDNAdsDNA507090100药物诱导药物诱导性狼疮只性狼疮只能检出此能检出此SLEAHAAHA抗抗组蛋白组蛋白抗体抗体人民卫生出版社人民卫生出版社 可提取性核抗原可提取性核抗原 (extra

17、ctable nuclear antigen，ENA) 是盐水可提取性核抗原的总称，是非组蛋白的核蛋是盐水可提取性核抗原的总称，是非组蛋白的核蛋白，属酸性核蛋白抗原，由许多小分子量的白，属酸性核蛋白抗原，由许多小分子量的RNARNA和多和多 肽组成。肽组成。抗抗ENA抗体抗体人民卫生出版社人民卫生出版社 对类风湿有特异诊断价值的ENA： 抗nRNP(nuclear RNP,nRNP)抗体； 抗Sm抗体； 抗SSA抗体； 抗SSB抗体； 抗Scl-70抗体； 抗Jo-1抗体； 抗核糖体抗体 。人民卫生出版社人民卫生出版社核蛋白核蛋白(DNP) 由由DNA和蛋白质组成。和蛋白质组成。DNP抗原有不

18、抗原有不溶性及可溶性两种，分别产生相应的抗体。溶性及可溶性两种，分别产生相应的抗体。 检出检出百分百分率率抗抗DNP20406080 SLE非活动期非活动期 SLE活动期活动期抗不溶性抗不溶性DNP抗体抗体抗抗DNP抗抗DNP100RA滑滑膜液中膜液中抗抗DNP抗可溶性抗可溶性DNP抗体抗体（1 1）抗）抗DNP抗体抗体人民卫生出版社人民卫生出版社 抗核小体抗体抗核小体抗体（anti-nucleosome antibody，AnuA)l核小体是细胞核染色质的基本组成单位核小体是细胞核染色质的基本组成单位;l细胞凋亡致核小体大量蓄积，并诱导细胞凋亡致核小体大量蓄积，并诱导B细胞产生细胞产生Anu

19、AlAnuA是是SLE特异的标志性抗体。特异的标志性抗体。抗抗dsDNA抗体抗体 抗核小体抗体抗核小体抗体 抗抗dsDNA和抗和抗Sm阴性的阴性的SLE阳性阳性率为率为60%80%，特异性，特异性97%。 （2 2）抗）抗核小体核小体抗体抗体人民卫生出版社人民卫生出版社 常见常见AID的的ANA阳性检出率阳性检出率疾病疾病ANA（% %）疾病疾病ANA（% %）SLE9595SS70708080MCTD9595PM/DM3030PSS85859595RA20203030人民卫生出版社人民卫生出版社2.2.ANA的检测方法的检测方法 l稀释患者血清可做定量检测，稀释患者血清可做定量检测，1:80

20、稀释仍呈阳性对诊断稀释仍呈阳性对诊断SLE有较大参考价值。有较大参考价值。 （1 1）间接荧光免疫法）间接荧光免疫法人民卫生出版社人民卫生出版社抗核抗体核型与相关疾病抗核抗体核型与相关疾病核型核型荧光图形荧光图形抗体抗体相关疾病相关疾病周边型周边型核周环状荧光核周环状荧光抗抗dsDNAdsDNASLESLE、慢活肝炎、慢活肝炎均质型均质型核呈均质荧光核呈均质荧光抗抗DNADNA、AHAAHA、 AnuAAnuASLESLE、RARA、PSSPSS、慢性、慢性肝病肝病斑点型斑点型核内颗粒状荧光核内颗粒状荧光抗抗ENAENAMCTDMCTD、SLESLE、PSSPSS、SSSS、PMPM核仁型核仁

21、型核仁有荧光核仁有荧光抗核仁抗体抗核仁抗体PSSPSS、雷诺现象、雷诺现象、SLESLE着丝点型着丝点型核浆细小相同颗粒核浆细小相同颗粒荧光荧光抗着丝点抗着丝点PSSPSS、CRESTCREST综合征综合征人民卫生出版社人民卫生出版社均质型均质型抗核抗体核型抗核抗体核型着丝点型着丝点型核仁型核仁型斑点型斑点型人民卫生出版社人民卫生出版社 用间接ELISA检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。（2）ELISA法法人民卫生出版社人民卫生出版社SDS-PAGE加待检血清加待检血清形成分子大小不同区带形成分子大小不同区带 分离分离电转移电转移PVDF膜或膜或NC膜膜抗抗ENA与相应抗原特异

22、结合与相应抗原特异结合抗人抗人IgGHRPENA抗抗ENA抗人抗人IgGHRP（3） 免疫印迹法免疫印迹法显色并判读结果显色并判读结果人民卫生出版社人民卫生出版社l 类风湿因子类风湿因子(rheumatoid factor，RF): 抗变性抗变性IgG的自身抗体，可为的自身抗体，可为19S的的IgM，也可为，也可为7S的的IgG和和IgA。 可与人变性可与人变性IgG结合，但不与正常结合，但不与正常IgG发生凝集。发生凝集。 RF可在可在RA患者检出，约患者检出，约70%70%90%90%的血清、约的血清、约60%60%的滑膜液可检出的滑膜液可检出IgG类的类的RF；（二）类风湿因子测定（二）

23、类风湿因子测定人民卫生出版社人民卫生出版社l IgG类抗体与相应抗原结合后发生变性；类抗体与相应抗原结合后发生变性；l炎症过程亦可发生炎症过程亦可发生IgG变性变性，构成自身抗原，刺，构成自身抗原，刺激机体产生各种抗激机体产生各种抗IgG抗体；抗体；l滑膜液中的滑膜液中的IgG类类RF与变性与变性IgG结合可形成中等结合可形成中等大小的免疫复合物，相比血清中的大小的免疫复合物，相比血清中的IgM类类RF更易更易致病。致病。人民卫生出版社人民卫生出版社RF检测方法检测方法 最常采用的检测方法。最常采用的检测方法。 以吸附在聚苯乙烯胶乳颗粒上的以吸附在聚苯乙烯胶乳颗粒上的IgG作诊作诊断试剂，与待

24、检血清中的断试剂，与待检血清中的RF结合后，出现胶结合后，出现胶乳凝集颗粒。此法的灵敏度和特异性不高，且乳凝集颗粒。此法的灵敏度和特异性不高，且只能检出血清中的只能检出血清中的IgM类的类的RF。1.间接胶乳凝集试验间接胶乳凝集试验人民卫生出版社人民卫生出版社 稀释待检血清至一定浓度后，加入定量的稀释待检血清至一定浓度后，加入定量的变性变性IgG诊断试剂，即用透射比浊或速率散射比诊断试剂，即用透射比浊或速率散射比浊仪，检测血清中的浊仪，检测血清中的RF。此法快速、敏感性。此法快速、敏感性高、精密度高、稳定性好、可定量分析，但仍高、精密度高、稳定性好、可定量分析，但仍只能检测只能检测IgM类类R

25、F。 2.免疫比浊法免疫比浊法人民卫生出版社人民卫生出版社 IgM、IgG和和IgA类类RF可可用用ELISA检测，临检测，临床上多采用双抗原夹心法或间接床上多采用双抗原夹心法或间接ELISA进行测进行测定。定。 3. ELISA法法人民卫生出版社人民卫生出版社（三）其他自身抗体测定（三）其他自身抗体测定其他自身抗体的检测方法与临床意义其他自身抗体的检测方法与临床意义自身抗体的类型自身抗体的类型检测方法检测方法临床意义临床意义抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体( (A-TG) )荧光免疫法、荧光免疫法、ELISA、RIA桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎抗甲状腺过氧化物酶抗体抗甲状腺过氧化物酶抗体EL

26、ISAGraves 病病, ,桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎抗乙酰胆碱受体抗体抗乙酰胆碱受体抗体( (AchR-Ab) )ELISA、RIA重症肌无力重症肌无力抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体( (SMA)荧光免疫法、荧光免疫法、ELISA、RIA自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎, ,慢性活动性肝炎慢性活动性肝炎, ,原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体抗线粒体抗体( (AMA)荧光免疫法、荧光免疫法、ELISA、RIARA，SS，SLE，原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化, ,慢性活动性肝炎慢性活动性肝炎, ,持续性肝阻塞持续性肝阻塞抗胃壁细胞抗体抗胃壁细胞抗体荧光免疫法荧光免疫法恶性贫血恶性贫

27、血抗胰岛素抗体（抗胰岛素抗体（IAA）ELISA胰岛素依赖性糖尿病胰岛素依赖性糖尿病抗精子抗体（抗精子抗体（AsAb）ELISA、荧光免疫法、荧光免疫法不育症不育症, ,不孕症不孕症抗红细胞抗体抗红细胞抗体直接凝集试验、直接凝集试验、Coombs试验试验新生儿溶血新生儿溶血, ,自身免疫性溶血性贫血自身免疫性溶血性贫血抗血小板抗体抗血小板抗体ELISA法、法、ABC-ELISA法法原发性血小板减少性紫癜、输血史原发性血小板减少性紫癜、输血史抗心磷脂抗体（抗心磷脂抗体（ACA）RIA、ELISASLE，血栓血栓, ,自发性流产自发性流产, ,血小板减少血小板减少抗肾小球基底膜抗体抗肾小球基底膜抗

28、体( (GBM-Ab) )荧光免疫法荧光免疫法Goodpasture综合征综合征, ,狼疮肾炎狼疮肾炎人民卫生出版社人民卫生出版社二、细胞检查二、细胞检查（一）淋巴细胞检测（一）淋巴细胞检测1 1特异性致敏淋巴细胞特异性致敏淋巴细胞2 2淋巴细胞数量和比例淋巴细胞数量和比例如淋巴细胞转化试验或吞噬细胞移动抑制试验如淋巴细胞转化试验或吞噬细胞移动抑制试验检测淋巴细胞的总数、检测淋巴细胞的总数、T T、B B细胞分类与计数、细胞分类与计数、CD4/CD8CD4/CD8亚群比例等进行亚群比例等进行人民卫生出版社人民卫生出版社（二）狼疮（二）狼疮（lupus erythmatosuslupus ery

29、thmatosus，LELE）细胞试验细胞试验 LE LE细胞为胞浆内含有大块状聚合细胞为胞浆内含有大块状聚合DNADNA的中性粒细的中性粒细胞。胞。 有有75758080的的SLESLE病人病人LELE呈阳性，呈阳性，RARA、结节性、结节性动脉炎、多发性硬化症、硬皮病、部分肝炎、皮肌动脉炎、多发性硬化症、硬皮病、部分肝炎、皮肌炎和变态反应病等偶尔亦可呈阳性反应。炎和变态反应病等偶尔亦可呈阳性反应。 人民卫生出版社人民卫生出版社三、免疫复合物和补体检测三、免疫复合物和补体检测四、细胞因子检测四、细胞因子检测 1.CK 1.CK在自身免疫病的免疫病理损伤中有重要作用。在自身免疫病的免疫病理损伤

30、中有重要作用。 2. 2.检测检测CKCK，对研究疾病的发生机制、了解病情、指，对研究疾病的发生机制、了解病情、指导治疗均有意义。导治疗均有意义。 对诊断部分自身免疫病和判断疾病的活动情对诊断部分自身免疫病和判断疾病的活动情况有一定的意义。况有一定的意义。人民卫生出版社人民卫生出版社1.1.筛选试验与确诊性试验的合理组合。筛选试验与确诊性试验的合理组合。2.2.结合临床症状选择性检测相关的自身抗体。结合临床症状选择性检测相关的自身抗体。3.3.切忌盲目的全面检测自身抗体。切忌盲目的全面检测自身抗体。4.4.通常以抗核抗体作为筛选试验，通常以抗核抗体作为筛选试验，ANA在许多在许多AID中中 可

31、呈阳性。可呈阳性。5.5.ANA阳性时，再进行针对特异性靶抗原成分的自身阳性时，再进行针对特异性靶抗原成分的自身 抗体的检测，达到明确诊断的目的。抗体的检测，达到明确诊断的目的。 第四节第四节 自身抗体的检测实验选择的原则自身抗体的检测实验选择的原则 一、自身抗体检测的一般原则一、自身抗体检测的一般原则人民卫生出版社人民卫生出版社二、实验室方法的选择及结果的确认二、实验室方法的选择及结果的确认IIF法法筛选试验筛选试验 ANA抗抗dsDNAIB法法ELISA法法IFA法法特异性实验特异性实验抗原基质片抗原基质片( (如如Hep-2Hep-2、小、小鼠肝印片鼠肝印片/ /切片切片) )，加入自，

32、加入自身抗体后与抗原相结合，身抗体后与抗原相结合，再与荧光标记的抗抗体结再与荧光标记的抗抗体结合，根据细胞的荧光着色合，根据细胞的荧光着色进行定性、定位分析。进行定性、定位分析。 以特异性纯化抗原包被以特异性纯化抗原包被载体，检测特异性自身载体，检测特异性自身抗体；但特异性抗原不抗体；但特异性抗原不易纯化或不明确，用易纯化或不明确，用ELISA和和IBT等检测自等检测自身抗体存在一定误差。身抗体存在一定误差。 人民卫生出版社人民卫生出版社小小 结结 自身免疫病自身免疫病是由于某种原因使自身免疫应答过是由于某种原因使自身免疫应答过强或持续时间过久，表现为质和量的异常，所产强或持续时间过久，表现为质和量的异常，所产生的自身抗体和（或）自身致敏淋巴细胞对表达生的自身抗体和（或）自身致敏淋巴细胞对表达自身靶抗原的细胞和组织发动攻击，导致损伤或自身靶抗原的细胞和组织发动攻击，导致损伤或功能障碍，并出现相应临床症状。功能障碍，并出现相应临床症状。人民卫生出版社人民卫生出版社