药物分析.ppt

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1、基 本 要 求 一 、 掌 握 吡 啶 类 、 吩 噻 嗪 类 、 苯 并 二 氮 杂 卓类 药 物 的 鉴 别 和 含 量 测 定 的 基 本 原 理 与 方 法 。 二 、 熟 悉 本 类 药 物 中 典 型 药 物 国 外 药 典 收 载的 鉴 别 和 含 量 测 定 方 法 。 返 回 第 一 节 吡 啶 类 药 物一 、 典 型 药 物 的 结 构 与 主 要 化 学 性 质 （ 一 ） 典 型 药 物 的 结 构 N 吡 啶 （ pyridine） NCO NHNH2异 烟 肼 （ isoniazid） N CO N(C2H5)2尼 可 刹 米 （ nikethamide） N N

2、O2CO2CH3CH 3HCH 3OH3CO硝 苯 地 平 （ nifedipine) （ 二 ） 主 要 化 学 性 质 1、 弱 碱 性 吡 啶 环 上 的 氮 为 碱 性 氮 原 子 ， 吡 啶 环 的 pKb 值 为 8.8（ 水 中 ） 。 尼 可 刹 米 除 了 吡 啶 环 上 氮 外 ， 位 上 被 酰 氨 基 取 代 。 酰 氨 基 化 学 性 质 不 甚 活 泼 ， 但 遇 碱 水 解 后 释 放 出 具 有 碱 性 的 二 乙 胺 ， 故 可 以 进 行 鉴 别 。 2、 还 原 性 异 烟 肼 的 吡 啶 环 位 上 被 具 有 还 原 性 酰 肼 取 代 ， 可 被 氧

3、 化 剂 氧 化 ， 可 与 含 羰 基 的 化 合 物 发 生 缩 合 反 应 。 3、 吡 啶 环 的 特 性 异 烟 肼 和 尼 可 刹 米 的 吡 啶 环 、 位 未 取 代 ， 而 或 位 被 羧 基 衍 生 物 所 取 代 ， 其 吡 啶 环 可 发 生 开 环 反 应。（戊烯二醛反应） 二 、 鉴 别 试 验（ 一 ） 吡 啶 环 的 开 环 反 应 本 反 应 适 用 于 吡 啶 环 的 、 位 无 取 代 基 的异 烟 肼 和 尼 可 刹 米 。1. 戊 烯 二 醛 反 应 （ kning 反 应 ）尼 可 刹 米 + 溴 化 氰 H2O 戊 烯 二 醛 衍 生 物苯 胺 黄

4、 色 HBr+NH2CN+CHOHOCH CON(C2H5)2H2O2 NCN Br CON(C2H5)2BrCNN CON(C2H5)2 CON(C2H5)2OCH CHOH + 2 NH2N CON(C 2H5)2CH CH NH（ 黄 色 黄 棕 色 ） （ 二 ） 酰 肼 基 团 的 反 应 1 还 原 反 应异 烟 肼 +AgNO3 异 烟 酸 银 + N2 + Ag( 白 色 ） 银 镜异 烟 肼 +亚 硒 酸 硒（ 红 色 ） 2 缩 合 反 应 异 烟 肼 的 酰 肼 基 与 芳 醛 缩 合 形 成 腙 ， 其 有 固 定 的 熔 点 ， 可用 以 鉴 别 。 ChP和 BP均

5、 采 用 本 法 鉴 别 . NCONHNH2+ CHOOH OCH 3 H2O NCONH N CH OCH3OH黄 色 结 晶 mp为 228 231 （ 三 ） 分 解 产 物 的 反 应 使 湿 润 的 红 色 石 蕊 试 纸 变 蓝尼 可 刹 米 +NaOH 二 乙 胺 （ 一 ） 异 烟 肼 中 游 离 肼 的 检 查 1. TLC法 Ch.P中 异 烟 肼 及 其 注 射 ,采 用 TLC法 中 杂 质 对 照 法 。 对 照 品 ： 硫 酸 肼 0.20mg/ml（ 相 当 于 游 离 肼 50 g） 薄 层 板 ： 硅 胶 （ 用 羧 甲 基 纤 维 素 钠 溶 液 制 备

6、） 展 开 剂 ： 异 丙 醇 -丙 酮 （ 3 ： 2） 显 色 剂 ： 乙 醇 制 对 -二 甲 氨 基 苯 甲 醛 试 液 检 测 结 果 ： 供 试 品 主 斑 点 前 方 ， 不 得 显 黄 色 斑 点 三 、 有 关 物 质 检 查 (二 ) 尼 可 刹 米 中 有 关 杂 质 检 查 因 有 关 杂 质 的 化 学 结 构 不 明 ， 故 Ch.p采 用 TLC法 中 的 高 低 浓 度 对 比 法 进 行 检 查 。 (三 ) 硝 苯 地 平 中 有 关 物 质 检 查 硝 苯 地 平 遇 光 分 子 内 部 发 生 光 化 学 歧 化 作 用 ， 降 解 为 4-（ 2-硝基

7、 苯 基 ） -2, 6-二 甲 基 吡 啶 -3, 5-二 羧 酸 二 甲 酯 （ A） 和 4-（ 2-亚硝 基 苯 基 ） -2, 6-二 甲 基 吡 啶 -3, 5-二 羧 酸 二 甲 酯 （ B） 。 其 化 学结 构 如 下 : NO2 CO2CH3H 3CO CH3CH3OO CH3 CH3H3CO CO2CH3N NNO( A ) ( B ) 第 二 节 吩 噻 嗪 类 药 物一 、 基 本 结 构 与 化 学 性 质（ 一 ） 结 构 特 点 与 典 型 药 物NSR R 1 2345678 9 10 NSCH2CH2CH2N(CH3)2Cl HCl盐 酸 氯 丙 嗪 NSC

8、H2CHN(CH3)2CH3 HCl盐 酸 异 丙 嗪 NS ClCH2CH2CH2 N N CH2CH2OH奋 乃 静 NSCH2CH2CH2 CF3N N (CH2)2OCO(CH2)8CH3癸 氟 奋 乃 静 HClNSCH2CH2CH2 CF3N N CH2CH2OH 2盐 酸 氟 奋 乃 静 NSCH2CH2CH2 N N CH3CF3 HCl2盐 酸 三 氟 拉 嗪 （ 二 ） 主 要 化 学 性 质 1.紫 外 和 红 外 吸 收 光 谱 特 征 硫 氮 杂 蒽 母 核 为 共 轭 三 环 系 统 三 个 最 大 吸 收 峰 别 在 ： 205nm、 254nm、 300nm 由

9、 于 2位 、 10位 上 的 取 代 基 不 同 ， 可 引 起 最 大 吸 收 峰 的 位 移 。 硫 氮 杂 蒽 母 核 的 硫 为 二 价 ， 易 氧 化 为 砜 和 亚 砜 ， 其 紫 外 吸 收 光 谱 有 明 显 不 同 ， 它 们 具 有 四 个 峰 值 。 另 外 ， 取 代 基 R和 R 的 不 同 ， 则 可 产 生 不 同 的 红 外 光 谱 2.易 氧 化 呈 色 u二 价 硫 易 氧 化 ， 遇 不 同 氧 化 剂 如 硫 酸 、 硝 酸 、 三 氯化 铁 试 液 及 过 氧 化 氢 等 ， 随 着 取 代 基 的 不 同 ， 而 呈不 同 的 颜 色 。 3.与

10、金 属 离 子 络 合 呈 色 u本 类 药 物 中 未 被 氧 化 的 硫 ， 可 与 钯 离 子 形 成 配 位 化合 物 ， 其 氧 化 产 物 则 无 此 反 应 。 此 性 质 可 用 于 鉴 别和 含 量 测 定 ， 并 具 有 专 属 性 ， 可 消 除 氧 化 产 物 的 干扰 。 （ 一 ） 紫 外 特 征 吸 收 和 红 外 吸 收 光 谱 本 类 药 物 可 用 UV和 IR鉴 别 ， Ch.P中 UV鉴 别 实 例 如 下 ： 药 物 名 称 溶 剂 浓 度 （ g/ml） max（ nm） A E1%1cm盐 酸 氯 丙 嗪 盐 酸 （ 9 1000） 5 254 0

11、.46 915 306 盐 酸 异 丙 嗪 盐 酸 （ 0.01mol/L） 6 249 883937奋 乃 静 无 水 乙 醇 7 258 0.65 癸 氟 奋 乃 静 乙 醇 10 260 盐 酸 氟 奋 乃 静 盐 酸 （ 9 1000） 10 255 553593 盐 酸 三 氟 拉 嗪 盐 酸 （ 1 20） 10 256 630盐 酸 硫 利 达 嗪 乙 醇 8 264与 315 二 、 鉴 别 试 验 （ 二 ） 显 色 反 应 1. 与 氧 化 剂 的 显 色 反 应 药 物 名 称 硫 酸 硝 酸 过 氧 化 氢 盐 酸 氯 丙 嗪 显 红 色 , 渐 变 淡 黄 色 盐 酸

12、 异 丙 嗪 显 樱 桃 红 色 ,放 置 生 成 红 色 沉 淀 ,加 热 即 溶 解 , 后 颜 色 渐 变 深 溶 液 由 红 色 转 变 为 橙 黄 色 奋 乃 静 显 深 红 色 ;放 置 后 红 色 渐 褪 去 盐 酸 氟 奋 乃 静 显 淡 红 色 , 温 热 后 变 成 红 褐 色 盐 酸 三 氟 拉 嗪 生 成 微 带 红 色 的 白 色 沉 淀 ; 放 置 后 , 红 色 变 深 , 加 热 后 变 黄 色 盐 酸 硫 利 达 嗪 显 蓝 色 2. 与 钯 离 子 络 合 显 色 反 应 利 用 分 子 结 构 中 未 被 氧 化 的 硫 与 金 属 钯 离 子 络 合 形

13、 成 有 色 络 合 物 ， 如 与 癸 氟 奋 乃 静 形 成 红 色 络 合 物 。 S N N N O CH28O CH3CF3 + PdCl2 CF3 CH3O CH28ON NNS CH 3O CH28ON N SNCF3 Pd2+ + 2Cl- 2 （ 三 ） 分 解 产 物 的 反 应 癸 氟 奋 乃 静 碳 酸 钠 及 碳 酸 钾 F- + 酸 性 茜 素 锆 试 液 ZrF62-配 位 离 子 ， 茜 素 游 离 使 溶 液 由 红 色 变 为 黄 色 。600 炽 灼 盐 酸 异 丙 嗪 中 特 殊 杂 质 检 查 u 主 要 有 ： 2-二 甲 氨 基 -1-丙 醇 ；

14、N,N, -三 甲 基 -10H-吩 噻 嗪 - 10-乙 胺 异 构 体 和 结 构 不 清 的 分 解 产 物 。 因 此 采 用 TLC法 中 的 高 低 浓 度 对 比 法 控 制 上 述 这 些 杂 质 的 限 量 。三 、 特 殊 杂 质 检 查 返 回 第 三 节 苯 并 二 氮 杂 卓 类 药 物一 、 结 构 特 征 与 典 型 药 物 NNCl H3C O地 西 泮 NN N NCl H3C阿 普 唑 仑 H NN OCl OH奥 沙 西 泮 氯 氮 卓 NN N CH3OCl H (一 ) 化 学 鉴 别 试 验 1。 沉 淀 反 应 氯 氮 卓 橙 红 色 沉 淀 阿

15、普 唑 仑 盐 酸 氟 西 泮 KBiI4 也 生 成 橙 红 色 沉 淀 氯 硝 西 泮 放 置 后 ， 沉 淀 颜 色 变 深 ， 因 此 可 以 相 互 区 别 。二 、 鉴 别 试 验阿 普 唑 仑 + 遇 硅 钨 酸 白 色 沉 淀 ， 药 典 中 也 用 于 鉴 别 。 2.水 解 后 呈 芳 伯 胺 反 应 氯 氮 卓 和 奥 沙 西 泮 ， 其 反 应 如 下 ：CH 3HNONNCl Cl ClNH2 OO N=N-OH OHNaNO2 +H+ 3. 硫 酸 -荧 光 反 应 本 类 药 物 溶 于 硫 酸 后 ， 在 紫 外 光 （ 365nm） 下 ， 显不 同 颜 色

16、的 荧 光 。 例 如 ： 地 西 泮 黄 绿 色 黄 色 氯 氮 卓 黄 色 紫 色 艾 司 唑 仑 + H2SO4 亮 绿 色 + 稀 硫 酸 天 蓝 色 硝 西 泮 淡 蓝 色 蓝 绿 色 奥 沙 西 泮 淡 黄 绿 色 4.分 解 产 物 的 反 应 本 类 药 物 多 为 有 机 氯 化 合 物 ， 用 氧 瓶 燃 烧 法 破 坏 ，显 氯 化 物 反 应 。 Ch.P用 于 地 西 泮 和 三 唑 仑 药 物 的 鉴 别 。 （ 二 ） 紫 外 特 征 吸 收 和 红 外 吸 收 光 谱 药 物 名 称 溶 剂 浓 度 （ g/ml） max（ nm） A 地 西 泮 0.5%硫

17、酸 甲 醇 溶 液 5 242 约 0.51 282 约 0.23 366 氯 氮 卓 盐 酸 溶 液 (9 1000) 7 245,308 阿 普 唑 仑 盐 酸 溶 液 (9 1000) 12 264 盐 酸 氟 西 泮 硫 酸 甲 醇 (1 36) 10 239 2,284 2 比 值 1.95 2.50 362 2 氯 硝 西 泮 0.5%硫 酸 甲 醇 溶 液 10 239 2,307 2 奥 沙 西 泮 乙 醇 10 229, 315 2(较 弱 ) 红 外 吸 收 光 谱 :已 用 于 地 西 泮 、 阿 普 唑 仑 、 艾 司 唑 仑 、 盐 酸 氟 西 泮 、 氯 硝 西 泮

18、 和 奥 沙 西 泮 的 鉴 别 。 （ 一 ） 有 关 物 质 检 查 Ch.P 收 载 的 八 种 本 类 药 物 ， 除 氯 氮 卓 外 ， 其 余均 作 此 项 检 查 。 其 检 查 方 法 除 了 三 唑 仑 采 用 GC法 外 ，其 余 均 用 TLC法 进 行 检 查 。 USP(24)和 BP(2000)中 对 氯氮 卓 都 规 定 了 此 项 检 查 ， 而 且 均 用 TLC法 进 行 检 查 。三 、 特 殊 杂 质 检 查 1.地 西 泮 中 有 关 物 质 的 检 查 地 西 泮 在 合 成 过 程 中 因 其 副 反 应 ， 可 能 引 入 N-去 甲 基 苯 甲

19、 二 氮 卓 及 化 学 结 构 不 清 的 有 关 物 质 ， 可 采 用 TLC法 中 的 高 低 浓 度 对 比 法 进 行 检 查 。 2.氯 氮 卓 中 有 关 物 质 的 检 查 USP(24)用 TLC法 检 查 氯 氮 卓 中 的 有 关 物 质 ， 并 规 定 其 分 解 产 物 2-氨 基 -5-氯 -2-苯 甲 酮 含 量 不 得 过 0.01%； 中 间 体 7-氯 -1， 3-二 氢 -5-苯 基 -2H-1， 4-苯 并 二 氮 杂卓 -2-酮 -4-氧 化 物 含 量 不 得 过 0.1%。 (二 ) 降 解 产 物 的 检 查 地 西 泮 注 射 液 列 入 此

20、 项 检 查 ， 因 本 品 在 贮 藏 过程 中 有 可 能 分 解 成 2-甲 氨 基 -5-氯 -二 苯 甲 酮 等 杂 质 。采 用 HPLC法 进 行 检 查 。 返 回 一 、 非 水 溶 液 滴 定 法(一 ) 基 本 原 理第 四 节 含 量 测 定当 HA酸 性 较 强 时 ， 反 应 不 能 定 量完 成 ， 必 须 除 去 或 降 低 HA的 酸 性 ，使 反 应 顺 利 地 完 成 。BH+A- + HClO4 BH+ClO4 + HA游 离 碱 类 盐 被 置 换 出 的 弱 酸因 此 ， 要 根 据 不 同 情 况 采 用 相 应 测 定 条 件 。 (二 ) 一

21、般 方 法供试品 + 冰醋酸10ml30ml 若 供 试 品 为 氢 卤 酸 盐 再加 5%醋 酸 汞 的 冰 醋 酸 液3ml5ml 结果高 氯 酸 滴 定 液 滴 定 以 空 白试 验 校正 (三 ) 问 题 讨 论1.适 用 范 围 主 要 用 于 Kb 10-8的 有 机 碱 盐 的 含 量 测 定 。 对 碱 性 较 弱 的 杂 环 类 药 物 ， 只 要 选 择 合 适 的 溶 剂 、 滴 定 剂 和 终 点 指 示 的 方 法 ， 可 使 pKb为 813的 弱 碱 性 药 物 采 用 本 法 滴 定 。 一 般 来 说 ： Kb为 10-8 10-10时 ， 宜 选 冰 醋 酸

22、 作 为 溶 剂 ； 药 物 的 Kb为 10-10 10-12时 ， 宜 选 冰 醋 酸 与 醋 酐 的 混 合 溶 液 ； Kb 10-12时 ， 应 用 醋 酐 作 为 溶 剂 。 另 外 ， 在 冰 醋 酸 中 加 入 不 同 量 的 甲 酸 ， 也 能 使 滴 定 突 跃 显 著 增 大 ， 使 一 些 碱 性 极 弱 的 杂 环 类 药 物 获 得 满 意 测 定 结 果。 2.酸 根 的 影 响 ： 无 机 酸 类 ， 在 醋 酸 介 质 中 的 酸 性 以 下 列 排 序 递 减 ： 高 氯 酸 氢 溴 酸 硫 酸 盐 酸 硝 酸 消 除 HX干 扰 的 方 法 ： 加 Hg(

23、Ac)2 量 不 足 终 点 不 明 显 ， 结 果 偏 低 。 2BHX + Hg(Ac)2 2BHAc + HgX2 过 量 (1 3倍 )不 影 响 测 定 结 果 3.终 点 指 示 方 法 u 常 用 电 位 法 和 指 示 剂 法 Ch.P收 载 的 本 类 药 物 大 多 采 用 结 晶 紫 指 示 剂 指 示 终 点 ， 少 数采 用 电 位 法 指 示 终 点 。 (四 ) 应 用 实 例 1.游 离 弱 碱 性 药 物 测 定 异 烟 肼 、 尼 可 刹 米 、 地 西 泮 及 氯 氮 卓 等 。 基 于 这 些 药 物 分 子 结构 中 氮 原 子 的 弱 碱 性 ， 可

24、 用 非 水 溶 液 滴 定 法 直 接 测 定 其 含 量 。 由 于这 些 药 物 的 碱 性 强 弱 不 同 ， 测 定 时 所 采 用 溶 剂 、 指 示 剂 及 其 指 示 终点 的 方 法 也 不 尽 相 同 。 药 物 名 称 取 样 量 (g) 溶 剂 指 示 剂 终 点 颜 色 尼 可 刹 米 0.15 冰 醋 酸 10ml 结 晶 紫 蓝 绿 色 地 西 泮 0.2 冰 醋 酸 、 酸 酐 10ml 结 晶 紫 绿 色 氯 氮 卓 0.3 冰 醋 酸 10ml 结 晶 紫 蓝 色 2.氢 卤 酸 盐 类 药 物 测 定 当 这 些 药 物 溶 于 冰 醋 酸 时 ， 由 于

25、 氢 卤 酸 在 冰 醋 酸 中 酸 性 较 强 ，对 测 定 有 干 扰 ， 必 须 先 加 入 过 量 的 醋 酸 汞 冰 醋 酸 溶 液 ， 使 其 形 成 难以 电 离 的 卤 化 汞 ， 而 氢 卤 酸 盐 药 物 ， 则 转 变 成 可 测 定 的 醋 酸 盐 。 然后 再 用 高 氯 酸 滴 定 液 滴 定 ， 并 可 获 得 满 意 的 结 果 。 应 用 示 例 如 下 ： 药 物 名 称 取 样 量 (g) 溶 剂 加 入 醋 酸 汞 试 液 (ml) 指 示 剂 终 点 颜 色 盐 酸 氯 丙 嗪 0.2 醋 酐 10ml 5 橙 黄 玫 瑰 红 色 盐 酸 异 丙 嗪

26、0.3 冰 醋 酸 10ml 4 结 晶 紫 蓝 色 盐 酸 氟 奋 乃 静 0.3 冰 醋 酸 20ml 5 结 晶 紫 蓝 绿 色 盐 酸 环 丙 沙 星 0.2 冰 醋 酸 25ml 5 橙 黄 粉 红 色 氢 溴 酸 东 莨 菪 碱 0.3 冰 醋 酸 20ml 5 结 晶 紫 纯 蓝 色 盐 酸 硫 利 达 嗪 0.3 丙 酮 100ml 5 电 位 滴 定 法 3.硫 酸 盐 类 药 物 测 定 硫 酸 是 二 元 酸 ， 在 水 溶 液 中 能 完 成 二 级 解 离 ， 生成 SO42-， 但 在 非 水 介 质 中 ， 只 显 示 一 元 酸 解 离 为 HSO4-，即 只

27、供 给 一 个 H+， 所 以 硫 酸 盐 类 药 物 在 冰 醋 酸 中 ， 只能 滴 定 至 硫 酸 氢 盐 ， 因 此 可 以 用 高 氯 酸 滴 定 液 直 接 滴定 。 （ 1） 硫 酸 阿 托 品 测 定 ： 阿 托 品 为 碱 性 较 强 的 一 元 碱 药 物 ， 因 而 硫 酸 阿 托 品 的 化 学 结 构 式 可 以 简 写 为 (BH+)2SO42 -， 用 高 氯 酸 直 接 滴 定 时 的 反 应 式 为 ：(BH+)2SO42- + HClO4 (BH+)ClO4- + (BH+)HSO4- 可 根 据 1mol的 硫 酸 阿 托 品 消 耗 1mol高 氯 酸 的关 系 计 算 其 含 量 。