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1、裸鼠肿瘤接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式，接种取材有手术活检标 本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。做体外培养的细胞的裸鼠接种，一般用带 6 号针头的注射器取适量细胞悬液 注射于裸鼠的皮下，部位看试验要求而定，一般在腋下或背部皮下，每个接种部 位注射0.1-0.2ml。就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清 的培养液或 PBS 中，放于冰盒中携至动物房，直接注射即可。是牵涉到细胞株的成瘤性问题，可以通过增大细胞悬液浓度的办法来解决。一般细胞浓度可在1X106到5X10 7之间，浓度再大就可能打不进去了。具体浓 度需要查相关文献。如果成瘤率太低，可以通过把瘤块在裸鼠身上传
2、 23 代的 方法提高成瘤率，即将已成瘤鼠的瘤块取出接种于新鼠身上，成瘤后再取出接种 新鼠，如此传几代，肿瘤性质稳定后，再将肿瘤取出，剪碎、研磨、匀浆成为细 胞悬液后再接种。一、可移植性肿瘤的建立方法1腹水瘤的建立 将动物实体瘤细胞注入受体动物腹腔内，或将实体疤移 植于受体动物的腹壁内，肿瘤生长后引起腹水，腹水内含高大量瘤细胞可移植 传代即为腹水瘤。建议腹水瘤初期、腹水往往是血性，多次传代后逐渐变为乳白色的瘤性腹 水。腹水如培养基一样供给瘤细胞生长所需的营养。若将腹水瘤细胞注入皮下， 又可形成实体瘤。由于瘤细胞游离在腹水内，因此总呈圆形，体积可有大、中、 小之分c： r在一些细胞边缘偶见大小不
3、等的泡状突起，称之为“鼓泡”。一 般在接种后第 5天时核分裂相达高峰。偶见三极或四极分裂。二、肿癌移植方法1常规保种传代方法（1）腹水瘤移植方法：瘤源一般用接种后第56天的腹水，抽出的腹水以乳 白色为佳。接种应从下腹部注入受体动物腹腔，一般接种0.1- 0.2m1。可在腹 水内加适量的抗凝药物。（2）实体型肿瘤接种法：1）小块接种法：将瘤取出后，切开，选出生长良好而无变性坏死、呈谈红色、 鱼肉状的瘤组织，切成小块（约5X5X5mm）；在受体动物腹部外例剪开一个小口， 用无钩眼科镊子夹取小块，送入切口内皮下。本法多用于建瘤株的初期及少量的 接种。接种部位以腋窝和鼠蹊部为佳，特别是腋窝部皮肤松弛能
4、使瘤结长得较大， 宿主寿命也可延长。2）悬液接种法： 将选取的瘤组织用玻璃匀浆器研磨制成悬液，用注射器吸 取瘤悬液先计算活细胞数再将瘤悬液注射到接种部位（多种丁皮下），细胞数 多在100000010000000。注射后用小镊夹针孔片刻，可避免注入液外溢。本法 适用于成活率高的移植瘤的常规接种或大批接种实验。3）瘤组织浆接种法：此法曾被广泛使用。从实体瘤选出新鲜瘤组织，剪碎成 浆后即可做注射用。多适用于大动物（免、狗）的移植瘤。以保证较高成活率。移 植部位以体内深部肌肉内或器官内较佳，家兔的成骨肉瘤移植多用此法。（4） 培养细胞的移植法：将单层培养的细胞消化脱壁后稀释为一定浓度的细 胞悬液，移植于动物皮下或其他部位。活细胞计数方法如下： 用新配制的0.05伊红或0.1台盼蓝生理盐水溶 液将瘤细胞悬液稀释、混匀后在血球计数盘上计数 染色者为死细胞、不染 色为活细胞
裸鼠肿瘤接种
