病原学诊断与防治PPT课件

第八章第八章 病原学诊断与防病原学诊断与防治治 n第一节细菌学诊断n一、病原菌检测一、病原菌检测n1.标本标本n标本采集与送检的原则标本采集与送检的原则：n（1）据）据不同疾病不同疾病以及疾病的以及疾病的不同时期不同时期采集采集不同标本不同标本n（2）严格无菌操作，避免标本被污染）严格无菌操作，避免标本被污染n（3）尽可能在疾病）尽可能在疾病早期早期以及抗菌以及抗菌药物使用药物使用前前采集标本采集标本n（4）采集的标本必须）采集的标本必须尽快送检尽快送检，大多数细，大多数细菌标本可以冷藏送检。菌标本可以冷藏送检。n（5）标本作好标记。）标本作好标记。标本采集与送检的原则标本采集与送检的原则n2.细菌形态与结构检查细菌形态与结构检查n（1）显微镜放大法）显微镜放大法n普通光镜普通光镜,电子显微镜等电子显微镜等n（2）染色法）染色法n染色剂与细菌细胞质的结合。染色剂与细菌细胞质的结合。n最常用的染色剂是最常用的染色剂是盐类盐类。n3.分离和鉴定分离和鉴定n鉴定的主要内容有：鉴定的主要内容有：n培养特征、形态特征、生化反应、血清学鉴定、动物培养特征、形态特征、生化反应、血清学鉴定、动物试验、药物敏感试验试验、药物敏感试验n4.病原菌抗原的检测病原菌抗原的检测n常用的细菌学诊断的免疫学技术有：常用的细菌学诊断的免疫学技术有：n沉淀反应、协同凝集试验、免疫荧光法、对流免疫电沉淀反应、协同凝集试验、免疫荧光法、对流免疫电泳、酶免疫测定和免疫印迹技术。泳、酶免疫测定和免疫印迹技术。n5.其他检测法其他检测法n二、血清学诊断二、血清学诊断n用用已知抗原已知抗原检测检测病人血清或其它体液中病人血清或其它体液中未未知抗体知抗体及其量的变化，可作为感染性疾病及其量的变化，可作为感染性疾病的辅助诊断。的辅助诊断。n第二节第二节病毒学诊断病毒学诊断n目前常用的病毒学诊断方法包括病毒的分目前常用的病毒学诊断方法包括病毒的分离鉴定、病毒的血清学检查、病毒蛋白和离鉴定、病毒的血清学检查、病毒蛋白和核酸的检测。核酸的检测。n一、标本的采取与送检一、标本的采取与送检n原则：原则：n1.对本身对本身带有杂菌带有杂菌（如咽拭子、粪便）或易受（如咽拭子、粪便）或易受污染的标本，要进行污染的标本，要进行病毒分离培养病毒分离培养，应使用抗，应使用抗生素。生素。n2.标本标本应低温保存应低温保存并并尽快送检尽快送检。n3.血清学诊断标本的采取应在血清学诊断标本的采取应在发病初期和病后发病初期和病后23w内内各取各取1份血清以便份血清以便对比对比双份血清抗体效双份血清抗体效价的动态变化。价的动态变化。n二、病毒的分离与鉴定二、病毒的分离与鉴定n（一）病毒的分离（一）病毒的分离n1.动物接种动物接种最早的病毒分离方法最早的病毒分离方法n2.鸡胚培养鸡胚培养n按病毒按病毒种类不同种类不同接种于接种于不同部位不同部位如绒毛尿囊膜、如绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。n3.细胞培养细胞培养n（1）从生长方式可分）从生长方式可分n单层细胞和悬浮细胞培养单层细胞和悬浮细胞培养n（2）从来源、染色体特征及传代次数分）从来源、染色体特征及传代次数分n 原代细胞原代细胞n来源于动物、鸡胚或引产人胚组织细胞来源于动物、鸡胚或引产人胚组织细胞n 二倍体细胞二倍体细胞n细胞在体外分裂细胞在体外分裂50100代后仍保持代后仍保持2倍染色倍染色体数目体数目的的单层细胞单层细胞。n 传代细胞系传代细胞系n多由癌细胞或多由癌细胞或2倍体细胞倍体细胞突变突变而来，能在体外而来，能在体外持续传代，对病毒的敏感性稳定持续传代，对病毒的敏感性稳定n（3）病毒在培养细胞中增殖的指标）病毒在培养细胞中增殖的指标n 细胞的变化细胞的变化 n细胞病变、多核巨细胞、包涵体细胞病变、多核巨细胞、包涵体n 红细胞吸附红细胞吸附 n红细胞吸附和红细胞吸附抑制现象红细胞吸附和红细胞吸附抑制现象n 干扰现象干扰现象n 细胞代谢的变化细胞代谢的变化尖锐多久能自愈http:/ n斑点杂交、细胞内原位杂交、斑点杂交、细胞内原位杂交、DNADNA印迹杂交、印迹杂交、RNARNA印迹杂交印迹杂交n2.核酸扩增技术核酸扩增技术nPCR、连接酶链反应、反转录、连接酶链反应、反转录PCRn3.基因芯片技术基因芯片技术沈阳治疗生殖器疱疹专家？http:/