《实验一分光光度计的性能检验.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验一分光光度计的性能检验.ppt（13页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、分光光度计的性能检验,实验一,目 的,（1）学会使用分光光度计。 （2）掌握分光光度计的性能检验方法。,实验原理,（1）分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，均需进行检验调整。 （2）利用KMnO4溶液的最大吸收值来检验波长的精度。 （3）同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故在使用时需加以选择配对。,仪器和试剂,（1）722型分光光度计 （2）容量瓶：25ml 1支；100ml 1 支 （3）吸量管：1ml 1支，10ml 1 支 （4）0.2mol/L KMnO4溶液 （5） 0.02mol/L K2C
2、r2O7溶液,操作步骤1,1比色皿透光率的检查 以空气的透光率为100%，则比色皿的透光率应不低于84%，同时在450nm、650nm处测其透光率，各透光率差值应小于5%。 2比色皿的配对性 同种厚度的比色皿之间，透光率误差应小于0.5%。 检查方法：将0.02mol/L的K2Cr2O7溶液5ml稀释到25ml,分别注入厚度相同的几个比色皿中。以其中一个比色皿的溶液做空白，在440nm波长处分别测定其它各比色皿中溶液的透光率，然后选择相差小于0.5%的比色皿使用。,操作步骤2,3.重现性 仪器在同一工作条件下(440)，用同种溶液连续测定7次，其透光率最大读数与最小读数之差(极差)应小于0.5
3、%。 检查方法如下:以蒸馏水的透光率为100%,用同一K2Cr2O7溶液连续测定7次，求出极差，如小于0.5%，则符合要求。,操作步骤2,4.波长精度的检查 为了检查分光系统的质量,可用 KMnO4溶液的吸光度最大吸收波长525nm为标准,在待检查仪器上测绘KMnO4溶液的吸收曲线。 检查方法如下:取0.2mol/L的KMnO4溶液0.3ml,用水稀释到100ml。以水为空白调零，在460570nm处，每隔5nm分别测定吸光度，在坐标纸上绘出吸收曲线。若测得的最大吸收波长在52510nm以内，说明该仪器符合使用要求。,722型分光光度计使用方法,1.开机后需预热20分钟。 2.波长设定需从短波
4、向长波方向调整。 3.调零需在透射比模式下将比色皿架置于调零档。 4.调满度时将空白样品置于光路，按100%T（OA）键。 5.按方式键可实现透射比，吸光度方式转换。 6.波长改变后千万不能忘了再调到零和调满度。,注意事项,1.待测溶液装量应超过比色皿2/3，但也不能装得太满。 2.实验过程中，注意不要将溶液撒入机器内部，如果发生上述情况，请及时清理干净。 3.比色皿用后，请洗净后，用95%乙醇浸泡，长期不用，请擦干后，收好。,数据,1比色皿透光率的检查 4个比色皿在450nm、650nm的透光率 2比色皿的配对性 4个比色皿中K2Cr2O7溶液在440nm的透光率 3.重现性 1个比色皿中K2Cr2O7溶液在440nm的透光率 4.波长精度的检查 1个比色皿中KMnO4溶液在460570nm吸光度,思考题,1同种比色皿透光度的差异对测定有何影响？ 2检查分光光度计的波长精度及重现性对测定有什么实际意义？ 3使用721或722型分光光度计时，应注意哪能些问题？,下一次实验内容： 水中微量铁的测定,
实验一分光光度计的性能检验.ppt
