微生物的纯培养和显微技术

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1、 第 二 章微 生 物 的 纯 培 养 和 显 微 技 术 1、 微 生 物 的 纯 种 分 离 ： 将 多 种 混 杂 的 微 生 物 ， 经 某 种 技 术 或 方法 分 离 或 纯 化 的 过 程 。 2、 微 生 物 的 纯 培 养 （ pure culture)： 在 人 为 规 定 的 条 件 下 培 养 、 繁 殖 得 到 一种 微 生 物 的 培 养 物 。 3、 菌 落 （ colony): 单 个 微 生 物 在 适 宜 的 固 体 培 养 基 表 面或 内 部 生 长 、 繁 殖 到 一 定 程 度 形 成 的 肉 眼可 见 、 有 一 定 形 态 结 构 的 子 细 胞

2、 生 长 群 体 。4、 无 菌 技 术 （ aseptic technique） 在 分 离 、 转 接 及 培 养 纯 培 养 物 时 防 止其 被 其 他 微 生 物 污 染 的 技 术 被 称 为 无 菌 技术 第 一 节 微 生 物 的 分 离 和 纯 培 养一 、 无 菌 技 术 1、 微 生 物 培 养 的 常 用 器 具 ： 试 管 、 玻璃 烧 瓶 、 培 养 皿 。 2、 最 常 用 的 灭 菌 方 法 ： 高 压 蒸 汽 灭 菌 注 意 事 项 ： 排 净 冷 空 气 ； 灭 菌 终 了 ， 缓 慢 降压 ； 灭 菌 结 束 ， 趁 热 取出 物 品 。 无 菌 操 作

3、箱 1、 涂 布 平 板 法 （ Spread Plate method）2、 稀 释 倒 平 板 法3、 平 板 划 线 分 离 法 （ Streak Plate）4、 稀 释 摇 管 法 （ 厌 氧 培 养 法 ） 简 单 易 行 ， 但 易 造 成 机 械 损 伤Liquid specimen is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass rod. 2、 稀 释 倒 平 板 法 特 点 ： 快 速 、 方 便 。 分 区 划 线 （ 适 用 于 浓 度 较 大 的 样 品 ） 连 续 划 线 （ 适 用

4、于 浓 度 较 小 的 样 品 ） 4、 稀 释 摇 管 法 （ 厌 氧 培 养 法 ） 将 待 分 离 的 样 品 进 行 连 续 稀 释 得 到 高 度 稀 释的 效 果 , 如 果 经 过 稀 释 后 的 大 多 数 试 管 中 没 有 微生 物 生 长 ,那 么 有 微 生 物 生 长 的 试 管 得 到 的 培 养物 可 能 就 是 由 一 个 微 生 物 个 体 繁 殖 而 来 的 纯 培 养物 . 这 种 方 法 适 合 于 细 胞 较 大 的 微 生 物 . 采 用 显 微 分 离 法 从 混 杂 群 体 中 直 接 分 离 单 个 细 胞或 单 个 个 体 进 行 培 养 以

5、 获 得 纯 培 养 的 方 法 。 该 方 法要 在 显 微 镜 下 进 行 。毛 细 管 法 ： 用 毛 细 管 提 取 微 生 物 个 体 ， 适 合 于 较 大微 生 物 。显 微 操 作 仪 ： 用 显 微 针 、 钩 、 环 等 挑 取 单 个 细 胞 或孢 子 以 获 得 纯 培 养 。小 液 滴 法 ： 将 经 过 适 当 稀 释 后 的 样 品 制 成 小 液 滴 ，在 显 微 镜 下 选 取 只 含 一 个 细 胞 的 液 滴 来 进 行 纯 培 养物 的 分 离 。适 应 于 高 度 专 业 化 的 科 学 研 究 为 了 从 混 杂 的 微 生 物 群 体 中 分 离

6、出 某 种微 生 物 ， 可 以 根 据 该 微 生 物 的 特 点 ， 包 括 营养 、 生 理 、 生 长 条 件 等 ， 采 用 选 择 培 养 的 方法 进 行 分 离 。1、 利 用 选 择 培 养 基 进 行 直 接 分 离2、 富 集 培 养 1、 选 择 平 板 培 养 根 据 微 生 物 的 特 点 ， 在 培 养 基 中 加 入 一 些抑 制 剂 ， 使 不 需 要 的 菌 不 生 长 ， 需 要 的 菌 生 长后 有 一 定 特 征 ， 然 后 挑 取 单 菌 落 。 分 离 抗 生 素 抗 性 菌 株 ， 可 在 加 有 抗 生 素 的平 板 上 分 离 。 分 离 蛋

7、 白 酶 产 生 菌 ， 可 在 培 养 基 中 加 入 牛奶 或 酪 素 ， 蛋 白 酶 产 生 菌 在 平 板 上 生 长 会 形 成透 明 的 蛋 白 质 水 解 圈 。 主 要 是 指 利 用 不 同 微 生 物 间 生 命 活 动 特 点 的 不同 ， 制 定 特 定 的 环 境 条 件 ， 使 仅 适 应 于 该 条 件 的 微生 物 旺 盛 生 长 ， 从 而 使 其 在 群 落 中 的 数 量 大 大 增 加 ，更 容 易 从 混 杂 的 群 体 中 分 离 到 特 定 的 微 生 物 。 富 集 条 件 可 从 多 方 面 选 择 ， 如 温 度 、 pH、 紫 外线 、 高

8、 压 、 光 照 、 氧 气 、 营 养 等 等 。 例 如 ： 分 离 产 芽 孢 细 菌 ， 可 以 对 样 品 进 行 高 温处 理 ， 然 后 再 进 行 培 养 。 六 、 微 生 物 的 保 藏 技 术 ： 目 的 ： 存 活 ， 不 丢 失 ， 不 污 染 防 止 优 良 性 状 丧 失 随 时 为 生 产 、 科 研 提 供 优 良 菌 种原 理 ： 选 用 优 良 的 纯 种 ， （ 最 好 是 休 眠 体 ， 如 分 生 孢子 、 芽 胞 等 ） ， 创 造 降 低 微 生 物 代 谢 活 动 强 度 ， 生 长繁 殖 受 抑 制 ， 难 以 发 生 突 变 的 环 境 条

9、 件 。 （ 其 环 境 要素 是 干 燥 、 低 温 、 缺 氧 、 缺 营 养 以 及 添 加 保 护 剂 等 ） 菌 连 续 在 培 养 基 上 （ 内 ） 移 种 种 生 活 态 传 代 培 养 保 藏 法 连 续 在 活 宿 主 上 （ 内 ） 移 种 保 固 体 斜 面 藏 湿 法 半 固 体 琼 脂 柱 方 休 眠 态 液 体 介 质 （ 蒸 馏 水 、 糖 液 、 其 它 溶 液 ） 法 干 法 藏 在 玻 璃 管 内 吸 附 在 合 适 的 载 体 上微 生 物 菌 种 保 藏 的 方 法 1、 传 代 培 养 保 藏 方 法 ： （ 琼 脂 斜 面 、 半 固 体 、 液

10、体 ） 低 温 保 藏 法方 法 ： 菌 种 管 置 4 冰 箱 保 藏 ， 定 时 传 代 原 理 ： 低 温 下 ， 微 生 物 代 谢 强 度 明 显 下 降 。 石 蜡 油 低 温 保 藏 法 ：橡 皮 塞 取 代 棉 塞 、 加 石 蜡 油 。2、 冷 冻 保 藏 低 于 70 液 氮 超 低 温 保 藏 法将 菌 种 置 于 保 护 剂 中 ， 预 冻 后 保 存 在 液 氮 超 低 温 冰 箱中 （ -196 ） 。 或 低 温 冰 箱适 用 于 各 种 微 生 物 的 较 理 想 的 保 藏 方 法 3、 干 燥 保 藏 法 真 空 冷 冻 干 燥 法加 有 保 护 剂 的 菌

11、 悬 液 在 冻 结 状 态 下 予 以 真 空 干 燥 。适 用 于 各 种 微 生 物 ， 便 于 大 量 保 藏 ， 菌 种 存 活 时间 长 ， 是 目 前 最 好 的 保 藏 方 法 。 干 燥 保 藏 法将 菌 种 置 于 土 壤 、 细 纱 、 滤 纸 、 硅 胶 等 干 燥 材 料上 保 藏 。 如 砂 土 管 法 ， 适 用 于 放 线 菌 、 芽 孢 菌 和某 些 真 菌 保 藏 ， 保 藏 时 间 几 至 几 十 年 。 几 种 常 用 菌 种 保 藏 方 法 的 比 较方 法 名 称 主 要 措 施 适 宜 菌 种 保 藏 期 评价冰 箱 保 藏 法 （ 斜 面 ）冰

12、箱 保 藏 法 （ 半 固 体 ）石 蜡 油 封 藏 法 *沙 土 保 藏 法冷 冻 干 燥 法 低 温低 温低 温 、 缺 氧干 燥 、 无 营 养干 燥 、 无 氧 、 低 温 、 有 保 护 剂 各 大 类细 菌 、 酵 母 菌各 大 类 *产 孢 子 微 生 物各 大 类 36月612月12年110年515年以 上 简 便简 便简 便简 便有 效简 便有 效 ： 广 泛 收 集 科 研 和 生 产 菌 种 、菌 株 ， 并 加 以 妥 善 保 管 ， 使 之 达 到 不 死 、 不 衰 、 不 乱 以 及便 于 研 究 、 交 换 和 使 用 的 目 的 。： 中 国 微 生 物 菌

13、种 保 藏 委 员 会 (CCCCM) 美 国 的 典 型 菌 种 保 藏 中 心 (ATCC) 英 国 国 家 典 型 菌 种 保 藏 所 （ NCTC） 法 国 里 昂 巴 斯 德 研 究 所 （ IPL）国 内 外 菌 种 保 藏 机 构 ： l 普通光学显微镜 l 暗视野显微镜 l 相差显微镜 l 荧光显微镜l 荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别 ： l1. 照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上（如下图）；l2. 光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；l3. 有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人目。 l 荧 光 显

14、微 镜 照 片 （ 微 管 呈 绿 色 、 微 丝 红 色 、 核 蓝 色 ） ， l 1933年 Ruska发 明 了 以 电子 束 为 光 源 的 透 射 电 子显 微 镜 （ transmission electron microscope，TEM） ， 电 子 束 的 波 长要 比 可 见 光 和 紫 外 光 短得 多 ， 并 且 电 子 束 的 波长 与 发 射 电 子 束 的 电 压平 方 根 成 反 比 ， 也 就 是说 电 压 越 高 波 长 越 短 。目 前 TEM的 分 辨 力 可 达0.2nm。 l 用 电 子 束 作 光 源 ， 用 电 磁 场 作 透镜 ,由 电 子

15、照 明 系 统 、 电 磁 透镜 成 像 系 统 、 真 空 系 统 、 记 录系 统 、 电 源 系 统 等 5部 分 构 成 。 l 透 射 电 子 显 微 镜 工 作 示 意 图 （ 左 ） 和 照 片 （ 右 ） l 扫 描 电 子 显 微 镜 l 人 类 血 细 胞 SEM照 片 1、 光 学 显 微 镜 的 制 片 ： 活 体 （ 压 滴 法 ） ； 染 色 涂 片 干 燥 固 定染 色 1min水 洗 、 吸 干镜 检简 单 染 色制 备 涂 片 标 本 染 色 2、 电 子 显 微 镜 的 制 片透 射 电 镜 的 样 品 制 备 负 染 技 术 负 染 就 是 用 重 金 属

16、 盐 （ 如 磷 钨 酸 、 醋 酸 双 氧 铀 ） 对 铺 展 在 载 网 上的 样 品 进 行 染 色 ； 吸 去 染 料 ， 样 品 干 燥 后 ， 样 品 凹 陷 处 铺 了 一 薄层 重 金 属 盐 ， 而 凸 的 出 地 方 则 没 有 染 料 沉 积 ， 从 而 出 现 负 染 效 果分 辨 力 可 达 1.5nm左 右 。 投 影 技 术 见 P28 超 薄 切 片 通 常 以 锇 酸 和 戊 二 醛 固 定 样 品 ， 以 环 氧 树 脂 包 埋 ， 以 热 膨 胀 或 螺旋 推 进 的 方 式 推 进 样 品 切 片 （ 图 2-13） ， 切 片 厚 度 2050nm，

17、切片 采 用 重 金 属 盐 染 色 ， 以 增 大 反 差 。扫 描 电 镜 样 品 的 制 备 ： 标 本 在 固 定 、 脱 水 后 ， 要 喷 涂 上 一 层 重 金 属微 粒 ， 重 金 属 在 电 子 束 的 轰 击 下 发 出 次 级 电 子 信 号 。 扫 描 电 镜 工 作 原 理 是 用 一 束 极 细 的 电 子 束 扫 描 样 品 ， 在 样 品 表 面 激 发 出 次 级 电 子 ，次 级 电 子 的 多 少 与 电 子 束 入 射 角 有 关 ， 也 就 是 说 与 样 品 的 表 面 结 构 有 关 ， 次级 电 子 由 探 测 体 收 集 ， 并 在 那 里 被

18、 闪 烁 器 转 变 为 光 信 号 ， 再 经 光 电 倍 增 管 和放 大 器 转 变 为 电 信 号 来 控 制 荧 光 屏 上 电 子 束 的 强 度 ， 显 示 出 与 电 子 束 同 步 的扫 描 图 像 。 图 像 为 立 体 形 象 ， 反 映 了 标 本 的 表 面 结 构 。 第 三 节 显 微 镜 下 的 微 生 物一 、 细 菌 和 古 细 菌1、 细 菌 的 形 态 和 排 列球 状杆 状螺 旋 状基本形态 1、 球 菌 细 胞 个 体 呈 球 形 或 椭 圆 形 ， 不 同 种 的 球 菌 在 细 胞 分裂 时 会 形 成 不 同 的 空 间 排 列 方 式 ， 常

19、 被 作 为 分 类 依 据 。 单 球 菌 ： 细 胞 分 裂 沿 一 个 平 面 进 行 ，新 个 体 分 散 而 单 独 存 在 .如 尿 素 微 球 菌 (Micrococcus ureae) 双 球 菌 ： 细 胞 沿 一 个 平 面 分 裂 ， 新 个体 成 对 排 列 . 如 肺 炎 双 球 菌 (Diplococcus pneumoniae) 链 球 菌 ： 细 胞 沿 一 个 平 面 进 行 分 裂 ， 新 个 体 不但 可 保 持 成 对 的 样 子 ， 并 可 连 成 链 状 .如 ：乳 链 球 菌 （ Streptococcus lactis）无 乳 链 球 菌 （ S

20、treptococcus agalactiae)溶 血 链 球 菌 （ Streptococcus hemolyticus) 四 联 球 菌 ： 细 胞 分 裂 是 沿 两 个 相 垂 直 的平 面 进 行 ， 分 裂 后 每 四 个 细胞 特 征 性 地 连 在 一 起 ， 呈 田字 形 . 如 四 联 微 球 菌 （ Micrococcus tetragenus） 八 叠 球 菌 ： 细 胞 按 三 个 互 相 垂 直 的平 面 进 行 分 裂 后 ， 每 八个 球 菌 特 征 性 地 连 在 一起 成 立 方 体 形 . 如 藤 黄 八 叠 球 菌 （ Sarcina ureae) 葡

21、萄 球 菌 ： 细 胞 无 定 向 分 裂 ， 多 个新 个 体 形 成 一 个 不 规 则的 群 体 ， 犹 如 一 串 葡 萄 。 如 ： 金 黄 色 葡 萄 球菌 （ Staphylococcus aureus)白 色 葡 萄 球 菌（ Staphylcoccus albus) 2、 杆 菌 细 胞 呈 杆 状 或 圆 柱 形 ， 一 般 其 粗 细 （ 直 径 ） 比 较稳 定 ， 而 长 度 则 常 因 培 养 时 间 、 培 养 条 件 不 同 而 有 较大 变 化 。 杆 菌 (bacillus)及 其 排 列 状 态杆 菌 是 细 菌 中 种 类 最 多 的 类 型 ,因 菌

22、种 不 同 ,菌 体 细 胞 的 长短 、 粗 细 等 都 有 所 差 异 。杆 菌 的 形 态 ： 短 杆 状 、 长 杆 状 、 棒 杆 状 、 梭 状 杆 状 、 月 亮状 、 竹 节 状 等 ； 按 杆 菌 细 胞 繁 殖 后 的 排 列 方 式 则 有 链 状 、栅 状 、 “ 八 ” 字 状 等 。短 杆 菌 长 杆 菌 梭 状 芽 孢 杆 菌 3、 螺 形 菌 弧 菌螺 旋 菌螺 旋 体 菌 螺 旋 菌 (spirilla)螺 旋 状 的 细 菌 称 为 螺 旋 菌 。根 据 其 弯 曲 情 况 分 为 ：弧 菌 （ vibrio)： 螺 旋 不 满 一 圈 ， 菌 体 呈 弧

23、形 或 逗 号 形 例 ： 霍 乱 弧 菌 、 逗 号 弧 菌螺 旋 菌 (spirillum)： 螺 旋 满 2 6环 ， 螺 旋 状 例 ： 干 酪 螺 菌 螺 旋 体 (spirochaeta)： 旋 转 周 数 在 6环 以 上 ， 菌 体 柔软 。 例 ： 梅 毒 密 螺 旋 体 Vibrio cholerae l 柄 细 菌 的 特 征 形 态 电 镜 照 片 。a） 双 鞘 不 粘 杆 菌 ； b） 游 离 臂 微 菌 ；c） 普 氏 绿 臂 菌 ； d） 柄 杆 菌 l 鞘 衣 菌 Sphaerotilus natans（ a） 相 差 显 微 镜 照 片（ b） 透 射 电

24、镜 超 薄 切 片 l a） 星 形 细 菌 （ Stella， a star-shaped bacterium） ； b） 方 形 细 菌 （ square-shaped bacteria ） 。 左 为 模 式 图 ， 右 为 照 片 Actinomycetes是 介 于 细 菌 和 真 菌 之 间 ， 而 更 接 近 于细 菌 的 原 核 生 物 。 它 是 一 类 具 有 丝 状 分 枝 的 单 细 胞 ， 主 要以 外 生 孢 子 的 形 式 繁 殖 ， 革 兰 氏 阳 性 ， 与 细 菌 同 属 原 核 微生 物 。 放 线 菌 菌 落 中 的 菌 丝 常 从 一 个 中 心 向

25、四 周 辐 射 状 呈放 射 状 生 长 ， 并 因 此 而 得 名 。 放 线 菌 有 特 殊 的 土 霉 味 。分 布 ： 含 水 量 较 低 、 有 机 物 丰 富 、 呈 微 碱 性 的 土 壤 中 。 估 计 每 克 土 壤 中 约 含 放 线 菌 孢 子 107个 。应 用 ： a、 能 产 生 大 量 的 、 种 类 繁 多 的 抗 菌 素 。 b、 放 线 菌 还 是 酶 类 、 抗 生 素 的 生 产 菌 ； c、 有 的 放 线 菌 有 固 氮 能 力 ； d、 具 有 较 强 的 分 解 复 杂 有 机 物 的 能 力 ， 对 于 土壤 肥 力 的 提 高 有 重 要 作

26、 用 。放 线 菌 概 述 1、 营 养 菌 丝匍 匐 生 长 于 培 养 基 内 ， 吸 收 营 养 ， 也 称 基 内 菌 丝 。 一 般 无 隔 膜 ，直 径 0.2-0.8 mm， 长 度 差 别 很 大 ， 有 的 可 产 生 色 素 。2、 气 生 菌 丝营 养 菌 丝 发 育 到 一 定 阶 段 ， 伸 向 空 间 形 成 气 生 菌 丝 ， 叠 生 于 营 养菌 丝 上 ， 可 覆 盖 整 个 菌 落 表 面 。 在 光 学 显 微 镜 下 观 察 ， 颜 色 较 深， 直 径 较 粗 （ 1-1.4 mm） ， 有 的 产 色 素 。3、 孢 子 丝气 生 菌 丝 发 育 到

27、 一 定 阶 段 ， 其 上 可 分 化 出 形 成 孢 子 的 菌 丝 ， 即 孢子 丝 ， 又 称 产 孢 丝 或 繁 殖 菌 丝 。 其 形 状 和 排 列 方 式 因 种 而 异 ， 常被 作 为 对 放 线 菌 进 行 分 类 的 依 据 。 放 线 菌 孢 子 丝 类 型 ： 二 级 轮 生一 级 轮 生丛 生 松 螺 旋紧 螺 旋钩 状 放 线 菌 的 菌 落干 燥 、 不 透 明 、 难 以 挑 取 ， 当大 量 孢 子 覆 盖 于 菌 落 表 面 时 ，就 形 成 表 面 为 粉 末 状 或 颗 粒 状的 典 型 放 线 菌 菌 落 ， 由 于 基 内菌 丝 和 孢 子 常

28、有 颜 色 ， 使 得 菌落 的 正 反 面 呈 现 出 不 同 的 色 泽 。 湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。 铜 绿 假 单 孢 菌弗 氏 志 贺 氏 菌 德 国 科 学 家 H. N. Schulz等 1999年 在 纳 米 比 亚 海 岸 的 海 底 沉 积 物 中发 现 的 一 种 硫 磺 细 菌 （ sulfur bacterium） ， 其 大 小 可 达 0.75 mm，Thiomargarita namibiensis， -“纳 米 比 亚 硫 磺 珍 珠 ” （ nanobacteria） （ 50 nm）最 大 和 最

29、 小 细 菌 的 个 体 大 小 悬 殊 ：（ Thiomargarita namibiensis） （ 0.75mm）15000倍 细 菌 大 小 测 量 结 果 的 影 响 因 素个 体 差 异 ；干 燥 、 固 定 后 的 菌 体 会 一 般 由 于 脱 水 而 比 活 菌 体 缩 短 1/3-1/4；染 色 方 法 的 影 响 ， 一 般 用 负 染 色 法 观 察 的 菌 体 较 大 ；幼 龄 细 菌 一 般 比 成 熟 的 或 老 龄 的 细 菌 大 ；环 境 条 件 ， 如 培 养 基 中 渗 透 压 的 改 变 也 会 导 致 细 胞 大 小 的 变 化 。 l 真 核 生 物

30、 ： 是 一 大 类 细 胞 核 具 有 核 膜 、 能进 行 有 丝 分 裂 、 细 胞 质 中 存 在 线 粒 体 或 同时 存 在 叶 绿 体 等 多 种 细 胞 器 的 生 物 称 真 核生 物 。l 真 核 生 物 的 特 征 ： 细 胞 核 有 核 膜 ； 细 胞 质中 有 多 种 细 胞 器 ； 能 进 行 有 丝 分 裂 。 微 生物 中 的 真 核 生 物 ， 即 为 真 核 微 生 物 。l 即 具 有 上 述 特 征 的 微 小 生 物 。 菌 物 界 真 菌假 菌粘 菌 单 细 胞 真 菌 酵 母 菌丝 状 真 菌 霉 菌大 型 真 菌 蕈 菌 1、 丝 状 真 菌 霉

31、 菌霉 菌 （ mold） 是 丝 状 真 菌 的 一 个 俗 称 ， 通 常 指 那 些 菌丝 体 较 为 发 达 又 不 产 生 大 型 肉 质 子 实 体 结 构 的 真 菌 。 、 分 布 及 与 人 类 的 关 系 工 业 上 的 有 机 酸 、 酶 制 剂 抗 生 素 、 维 生 素 、 生 物 碱 等 的 发 酵 生 产 进 行 生 物 防 治 ， 污 水 处 理 和 生 物 测 定 食 品 制 造 方 面 ， 如 酱 油 的 酿 造 和 干 酪 的 制 造 在 基 础 理 论 研 究 方 面 ， 霉 菌 是 良 好 的 实 验 材 料 霉 菌 的 菌 体 由 分 枝 或 不 分

32、 枝 的 菌 丝（ hyphae)构 成 。 菌 丝 是 真 菌 营 养 体 的 基 本 单 位 。菌 丝 是 中 空 管 状 结 构 ， 直 径 一 般 3 10m， 有分 枝 ， 有 隔 膜 或 无 隔 膜 。 根 据 菌 丝 有 无 隔 膜 ， 可 以 将 真 菌 分 成 低 等真 菌 （ 鞭 毛 菌 亚 门 和 接 合 菌 亚 门 ） 和 高 等 真 菌（ 子 囊 菌 亚 门 、 担 子 菌 亚 门 和 半 知 菌 亚 门 ） 两大 类 。 许 多 菌 丝 分 枝 连 接 ， 相 互 交 织 在 一 起 所 构成 的 形 态 称 菌 丝 体 （ mycelium)。 菌 丝 体 及 其

33、 各 种 分 化 形 式由 许 多 菌 丝 相 互 交 织 而 成 的 一 个 菌 丝 集 团 称 菌 丝 体 营 养 菌 丝 体 密 布 在 固 体 营 养 基 质 内 部 ， 主 要 执 行 吸 收 营 养 物 功 能 的 菌 丝 体 气 生 菌 丝 体 伸 展 到 空 间 的 菌 丝 体 这 两 类 菌 丝 体 在 长 期 的 进 化 中 ， 因 其 自 身 的 生 理 功 能和 对 不 同 环 境 的 高 度 适 应 ， 已 明 显 地 发 展 出 各 种 特 化的 构 造 。 （ 2） 匍 匐 菌 丝 ： 毛 霉 目 真 菌 在 固 体 基 质 上 常 形 成 与 表 面 平 行 、

34、 具 有 延 伸 功 能 的 菌 丝 ， 又 称 匍 匐 枝 。营 养 菌 丝 体 的 特 化 形 态（ 1） 假 根 ： 是 Rhizopus(根 霉 属 )等 低 等 真 菌 匍 匐 菌 丝 与 固 体 基 质 接 触 处 分 化 出 来 的 根 状 结 构 ， 具 有 固 着 和 吸 取 养 料 等 功 能 。 l b） 产 黄 青 霉 c） 黄 曲 霉 的 分 生 孢 子 形态 电 镜 照 片 干 燥 ， 不 透 明 ， 呈 现 或 紧 或 松 的 蛛 网 状 、绒 毛 状 或 棉 絮 状 ； 菌 落 与 培 养 基 的 连 接紧 密 ， 不 易 挑 取 ； 菌 落 正 反 面 的 颜

35、 色 和边 缘 与 中 心 的 颜 色 常 不 一 致 。霉 菌 的 菌 落 大 多 数 酵 母 菌 的 菌 落 特 征 与 细 菌 相 似 ， 但比 细 菌 菌 落 大 而 厚 ， 菌 落 表 面 光 滑 、 湿 润 、 粘稠 ， 容 易 挑 起 ， 菌 落 质 地 均 匀 ， 正 反 面 和 边 缘 、中 央 部 位 的 颜 色 都 很 均 一 ， 菌 落 多 为 乳 白 色 ，少 数 为 红 色 ， 个 别 为 黑 色 。 A 酿 酒 酵 母 B 路 德 酵 母 C 白 地 霉 D 膜 醭 毕 赤 酵 母 a） 微 星 鼓 藻 属 ， 单 细 胞 ； b） 团 藻 属 ， 由 很 多 单

36、 细 胞 组 成 的群 体 ； c） 栅 藻 属 ， 四 个 细 胞 组 成 的 栅 状 d） 水 棉 属 ， 一 种丝 状 藻 类 ， 注 意 其 螺 旋 状 的 叶 绿 体 。 l 光 学 显 微 镜 下 的 原 生 动 物 。l a） 阿 米 巴 （ Amoeba） ； b） 纤 毛 （ Paramecium） ； c）鞭 毛 虫 （ Dunaliella） ； d） 间 日 疟 原 虫 思 考 题1、 一 般 说 来 ， 严 格 的 无 菌 操 作 是 一 切 微 生 物工 作 的 基 本 要 求 ， 但 在 分 离 与 培 养 极 端 嗜 盐菌 时 常 在 没 有 点 酒 精 灯 的 普 通 实 验 台 上 倾 倒培 养 平 板 、 在 日 常 环 境 中 直 接 打 开 皿 盖 观 察和 挑 取 菌 落 ， 而 其 研 究 结 果 并 没 有 因 此 受 到影 响 ， 你 知 道 这 是 为 什 么 吗 ？2、 如 果 希 望 从 环 境 中 分 离 得 到 厌 氧 固 氮 菌 ，你 该 如 何 设 计 实 验 。 再见