羊肚菌菌种制作技术1

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1、羊肚菌菌种制作技术羊肚菌是世界上珍贵的稀有食用菌之一,属高级营养品。它富含蛋白质、碳水化合物、多种维生素及20多 种氨基酸,特别是有机锗含量高,具有补肾、壮阳、补脑、提神的功能;主治精肾亏损、阳痿不举、性欲 冷淡;对头晕失眠、肠胃炎症、脾胃虚弱、消化不良、饮食不振有良好的辅助治疗作用;还可以防癌抗癌、 预防感冒、增强人体免疫力,在医学上有重要的开发价值。由于它功能齐全,香味独特,食疗效果显著, 目前国内每千克售价8001000元,尤其在西欧国家供应十分紧俏,价格更昂贵。因羊肚菌与其它食用菌不同,栽培适应性较差,特别是在异地栽培稳定性差。因此,利用当地的羊肚菌品 种分离制出的菌种,能适应当地环境

2、,可避免异地购种的地区性差异和邮寄途中的影响,建议种植户最 好分离当地的品种。它能适应当地环境,但也要注意羊肚菌的菌种隔年使用效果不好,有变异现象。这就 给大面积栽培和推广带来了困难。所以羊肚菌的菌种最好每年分离、驯化。这是迄今尚未实现商品化栽培 的原因之一,加上栽培管理或环境达不到要求就会不出菇。这就是羊肚菌人工栽培困难的奥秘。一、制种注意事项羊肚菌的菌种性能与其它食用菌不同,菌种分离方法和育种手段及栽培管理技术与其它 食用菌也有很大差异。最大的缺点就是容易退化、变异、生霉。这对栽培羊肚菌带来很大困难。对此,首 先要控制菌种传代,无论母种、原种、栽培种,若违反技术要求,多传一代就会出现上述不

3、良反应或不长 子实体。母种只能经过原种栽培种,到栽培中的一次流程和3次破菌愈合才能保住质量;若超过3次菌 丝断裂而重新萌发的新菌丝,会失去或降低酶的分解作用,以致抗病力差,易生杂菌,不出菇。二、母种制作(一)培养基配方 黄豆芽500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,羊肚菌基脚50克,水1升。 黄豆芽500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,水1升。栋木屑500克(煮汁),白糖20 克,琼脂20克,水1升。马铃薯200克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,蛋白胨0.5克,牛 肉膏0.5克,水1升。蛋白胨1克,葡萄糖20克,琼脂20克,酵母膏1克,磷酸二氢钾1克, 硫酸镁1克,维生素B1,1克,水

4、1升。pH值自然。上述配方任选一组。将木屑或豆芽加水1升煮 30分钟,过滤取汁,并将余下的水补足1升,加入其它原料,煮至溶化后,按母种制作常规方法,分装 于18毫米X180毫米或20毫米X200毫米试管的1/5,塞上棉塞,使用高压灭菌锅彻底灭菌;在0.68千克压力下维持60分钟,自然冷却至指针回到原位才可打开,放成斜面备用。(二)菌种分离首先要具有食用菌专业基础知识、多年的菌种分离经验及菌丝鉴别能力,其次要购置母种 培养基、无菌接种箱、恒温培养箱、冰箱、高倍显微镜等必要设备。根据当地羊肚菌生长季节,趁羊肚菌生长旺盛时做菌种分离工作。1. 分离方法。羊肚菌的分离方法与其它食用菌大不相同。它需要一

5、种助生菌与羊肚菌菌丝共生时才能出菇。 这种助生菌长期活动在土壤中,有时以芽抱菌形式出现,有时以菌丝形式出现。它为羊肚菌的原基形成和 子实体生长发育起着至关重要的作用。因此,从土壤中分离该菌比其它任何方式分离要好些。但从土壤分 离难度太大,成功率不到万分之一,并且难以分辨,所以只有采取羊肚菌基脚土分离,才能真正找到羊肚 菌的出菇菌丝。初学者可在四川绵阳市食用菌研究所购买培养好的羊肚菌优良母种,并参加现场培训。2. 操作过程。在羊肚菌生长的周围,可见白色菌丝充满土壤。从土壤中挑选这种菌丝容易成功。现介绍两种土壤分离的简易方法:一种是土壤直接分离,另一种是浸提分离。土壤直接分离法:在羊肚菌生长的地方

6、去掉羊肚菌,取周围5厘米以内的土壤,去掉表层,把土壤放入无菌接种箱内,然后放入试管培养基,进行接种箱空间消毒。即按接种箱每立方米空间用甲醛10毫升,高锰酸钾5克,混合产生气体消毒,半小时后才可操作。将基脚土用接种针挑取黄豆大小一块,迅速放到试管内的空白培养基上,每管放一块,塞上棉塞,接种后取出培养。浸提分离法:将基脚土用无菌水稀释,澄清后用接种针蘸取少量溶液,滴到试管内的空白培养基上,塞上 棉塞后取出培养。分离后,放在1218C温度下培养观察。3天后培养基上萌发菌丝,每天仔细检查每 支试管的发菌及变化情况。区分和认识各类杂菌是最关键的核心技术。真正的羊肚菌菌丝最初为灰白 色,生长很快,时间长会

7、变成棕黄色,有时会出现菌核,母种7天长满试管,原种、栽培种15天可长 满瓶底。是否分离成功,必须做栽培出菇试验,待出菇后才能准确认定是否羊肚菌的菌种。一旦菌种分离 成功,在以后的转接过程中要小心,不能再让杂菌感染,必须把好高温灭菌关和接种消毒关,才能保证菌 种质量和成活率。(三)转接提纯待培养基表面余水干后才能使用,否则会被细菌感染。接种要求在接种箱内通过药物灭菌 进行,将第一代纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基,放入空白培养基上,每支母种可接1015支,母种只能扩种一次,不能多接或多扩,否则会影响子实体生长。(四)培养接种后放在1822C温度下避光培养,23天菌丝萌发,7天可长满斜面培养基。

8、如不使用则放入冰箱在03C温度下保存,时间最长不超过半年。三、原种制作(一)培养基配方栋木屑50%,棉籽壳30%,麦麸15%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%,土 2%,pH 值自然。栋木屑75%,米糠或麦麸20%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%,土 2%,pH值自然。稻 草粉70%,麦麸25%,石膏1.5%,过磷酸钙1.5%,土 2%,pH值自然。棉籽壳90%,木屑8%,土 2%,pH值自然。玉米芯50%,木屑30%,米糠15%,石膏1%,过磷酸钙1%,土 3%,pH值自然。(二)操作过程按配方将原料混合均匀,加入清水,使含水量达65%时装瓶。装瓶要求松紧一致,装至瓶肩,将表面压平,洗去瓶

9、壁内外沾染的培养基,塞上棉塞,或用塑料薄膜封口。(三)灭菌高压灭菌在0.68千克压力下维持1小时,常压灭菌在100C温度下保持68小时。灭菌时间不能过长或压力过高,否则会破坏其中养分。(四)接种与培养接种在接种箱内经消毒后,每支母种可接种原种510瓶。接种后放在1822C温度 下避光培养,3天菌丝萌发吃料,10天菌丝布满培养基表面,1520天菌丝长满瓶底。培养期间尽量避免强光刺激,菌龄以不超过50天为好。菌丝寿命与温度有关,超过30C以上几小时就死亡。四、栽培种制作(一)培养基配方 栋木屑75%,米糠或麦麸20%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%,土 2%,pH值自然。 棉籽壳75%,麦麸20%,石膏1%,过磷酸钙1%,土 3%,pH值自然。 稻草粉75%,麦麸15%,过磷酸钙2%,土 3%,pH值自然。 玉米芯80%,米糠15%,石膏2%,过磷酸钙1%, 土 2%, pH值自然。 农作物藤秆粉75%,米糠10%,麦麸10%,白糖1%,石膏1%,过磷酸钙1%, 土 2%, pH值自然。(二)操作过程按配方将原料混匀后,加水调至含水量为65%,装瓶,灭菌接种,培养。操作方法同上述原种。经1个月菌丝长满瓶后就可用于生产栽培。

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