钼锑抗比色法测定可溶性磷含量

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1、word专业资料-可复制编辑-欢迎下载钼锑抗比色法测定可溶性磷含量试剂准备:钳锑贮存溶液:量取153诚浓硫酸(分析纯,密度1.84g/ml),缓缓加入到400ml蒸馏水 中,不断搅拌,冷却。另称取经磨细的钳酸铵(NHLMOa * HO,分析纯10g溶于温度 467242约60300ml水中,冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钳酸铵溶液中。再加入0.5%酒石酸锑 钾KSbOC4H4O61/2H2O,分析纯溶液100ml,冷却后,加水稀释至1000ml,摇匀,贮于 棕色试剂瓶中,此贮备液含钳酸铵1 %,硫酸2.75mol/L。钳锑抗显色剂:称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钳锑贮存溶液中,此溶液有效期

2、不长, 宜随配随用。5mg/L磷标准溶液:0.4394g在50C烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯),100ml水, 加5ml浓硫酸(防腐),用水定容到1L,浓度为100mg/L磷(P),此溶液可以长期保存。吸取 上述溶液10ml于200ml容量瓶中,加水至标度,浓度为5mg/L磷(P)标准溶液,此溶液不宜 久存。标准曲线的绘制:分别准确吸取5mg/L磷(K2HPO4)标准溶液(也可用摩尔浓度)0、2、4、6、8、10ml 于50ml容量瓶中,同时加入与显色测定所用的样品溶液等体积的空白溶液,加入二硝基酚 指示剂23滴,并用100g/L碳酸钠溶液或50ml/L硫酸溶液调节至溶液刚呈微黄色,

3、准确加 入5ml钳锑抗显色剂,摇匀,加水定容,即得含磷(P)量分别为0.0、0.2、0.4、0.8、1.0mg/L 的标准溶液系列。摇匀,于室温15C以上,放置30min。在波长700nm处,测定其吸光度, 以吸光度为纵坐标,磷浓度(mg/L)为横坐标,绘制标准曲线。可溶性磷测定(显色与比色):将待测液体(细菌真菌培养液离心后取上清)适量(第一次做需摸索加入量)移至50ml 容量瓶中,用水稀释至总体积约3/5处,加入二硝基酚指示剂12滴,并用100g/L碳酸钠 (或氢氧化钠)溶液或50ml/L硫酸(或盐酸)溶液调节至溶液刚呈微黄色,准确加入5ml 钳锑抗显色剂,摇匀,加水定容,室温15C以上,放置30min (8h内)。显色的样品溶液在 722分光光度计上,以空白(溶剂,细菌真菌实验为不接菌体的空白培养基)为参比液调节仪 器零点,进行比色测定,读取吸光度OD700nm,再从标准曲线上查得相应的含磷量14。

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