《激发与发射光谱》PPT课件

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1、激 发 与 发 射 光 谱 的 含 义v激 发 光 谱 固 定 发 射 波 长 (一 般 将 其 固 定 于 发 射波 段 中 感 兴 趣 的 峰 位 ),扫 描 出 的 化 合物 的 发 射 光 强 (荧 光 /磷 光 ) 与 入 射 光 波长 的 关 系 曲 线 。 如 右 图 中 曲 线 I 。v发 射 光 谱 固 定 激 发 波 长 (一 般 将 其 固 定 于 激 发波 段 中 感 兴 趣 的 峰 位 ),扫 描 出 的 化 合物 的 发 射 光 强 (荧 光 /磷 光 ) 与 波 长 的 关系 曲 线 。 如 右 图 中 曲 线 I I。 激 发 光 谱 与 发 射 光 谱 的 关

2、 系 a.Stokes位 移 激 发 光 谱 与 发 射 光 谱 之 间 的 波 长 差 值 。 发 射 光 谱 的 波 长 比激 发 光 谱 的 长 ， 振 动 弛 豫 消 耗 了 能 量 。 b.发 射 光 谱 的 形 状 与 激 发 波 长 无 关 电 子 跃 迁 到 不 同 激 发 态 能 级 ， 吸 收 不 同 波 长 的 能 量 (如 能 级图 2 , 1)， 产 生 不 同 吸 收 带 ， 但 均 回 到 第 一 激 发 单 重 态 的 最低 振 动 能 级 再 跃 迁 回 到 基 态 ， 产 生 波 长 一 定 的 荧 光 (如 2 )。 c. 镜 像 规 则 通 常 荧 光

3、发 射 光 谱 与 它 的 吸 收 光 谱 （ 与 激 发 光 谱 形 状 类似 ） 成 镜 像 对 称 关 系 。 吸 收 谱 与 激 发 谱v 吸 收 谱 化 合 物 的 吸 收 光 强 与 入 射 光 波 长 的 关 系 曲 线 。 吸 收 谱 反 映 出 的 是 物 质 的 基 态 能 级 与 激 发 态 能 级 之 间 所 有 的 允 许 跃 迁 。 通 常 状 态 下 的 物 质 的 表 观 颜 色 大 部 分 时 候 取 决 于 其 吸 收 特 性v 激 发 光 谱 固 定 发 射 波 长 (一 般 将 其 固 定 于 发 射 波 段 中 感 兴 趣 的 峰 位 ),扫 描 出

4、的 化 合 物 的 发 射光 强 (荧 光 /磷 光 ) 与 入 射 光 波 长 的 关 系 曲 线 。 激 发 光 谱 则 反 映 的 是 基 态 与 所 有 与 该 荧 光 发 射 有 关 的 上 能 级 之 间 的 跃 迁 。 其 所呈 现 的 关 系 比 吸 收 谱 要 有 选 择 性 ， 但 有 时 候 有 不 如 吸 收 谱 来 的 直 接 。 S3S 0 吸收 发射荧光 1 0 0S2 S4S5 4 3 一 、 荧 光 光 谱 与 磷 光 光 谱v 荧 光 光 谱 固 定 激 发 光 波 长 (一 般 将 其 固 定 于 激 发 波 段中 感 兴 趣 的 峰 位 ), 物 质 发

5、 射 的 荧 光 强 度 与 发射 光 波 长 关 系 曲 线 ， 如 右 图 中 曲 线 II。 荧 光本 身 则 是 由 电 子 在 两 能 级 间 不 发 生 自 旋 反 转的 辐 射 跃 迁 过 程 中 所 产 生 的 光 。v 磷 光 光 谱 固 定 激 发 光 波 长 (一 般 将 其 固 定 于 激 发 波 段中 感 兴 趣 的 峰 位 ), 物 质 发 射 的 磷 光 强 度 与 发射 光 波 长 关 系 曲 线 ， 如 右 图 中 曲 线 III。 磷 光 本 身 则 是 由 电 子 在 两 能 级 间 发 生 自 旋 反 转 的辐 射 跃 迁 过 程 中 所 产 生 的 光

6、 。 S2 S1S 0 T1吸收 发射荧光 发射磷光 系 间 跨 越内 转 换 振 动 弛 豫能量 2 1 3 外 转 换 2 T2内 转 换 振 动 弛 豫Stokes能 级 图 0.荧 光 与 磷 光 的 产 生 过 程 由 分 子 结 构 理 论 ， 主 要 讨 论 荧 光 及 磷 光 的 产 生 机 理 。1. 分 子 能 级 与 跃 迁 分 子 能 级 比 原 子 能 级 复 杂 ； 在 每 个 电 子 能 级 上 ， 都 存 在 振 动 、 转 动 能 级 ； 基 态 (S0)激 发 态 (S1、 S2、 激 发 态 振 动 能 级 )： 吸 收 特 定 频率 的 辐 射 ； 量

7、子 化 ； 跃 迁 一 次 到 位 ； 激 发 态 基 态 ： 多 种 途 径 和 方 式 (见 能 级 图 )； 速 度 最 快 、激 发 态 寿 命 最 短 的 途 径 占 优 势 ； 第 一 、 第 二 、 电 子 激 发 单 重 态 S 1 、 S2 ； 第 一 、 第 二 、 电 子 激 发 三 重 态 T1 、 T2 ； 1.电 子 激 发 态 的 多 重 度 电 子 激 发 态 的 多 重 度 ： M=2S+1 S为 电 子 自 旋 量 子 数 的 代 数 和 (0或 1)； 平 行 自 旋 比 成 对 自 旋 稳 定 (洪 特 规 则 )， 三 重 态 能 级 比 相 应单 重

8、 态 能 级 低 ； 大 多 数 有 机 分 子 的 基 态 处 于 单 重 态 ； S0T1 禁 阻 跃 迁 ；通 过 其 他 途 径 进 入(见 能 级 图 )； 进 入 的几 率 小 ； 2.镜 像 规 则 的 解 释 基 态 上 的 各 振 动 能 级 分布 与 第 一 激 发 态 上 的 各 振 动能 级 分 布 类 似 ； 基 态 上 的 零振 动 能 级 与 第 一激 发 态 的 二 振 动能 级 之 间 的 跃 迁几 率 最 大 ， 相 反跃 迁 也 然 。 3.激 发 态 基 态 的 能 量 传 递 途 径 电 子 处 于 激 发 态 是 不 稳 定 状 态 ， 返 回 基

9、态 时 ， 通 过 辐 射跃 迁 (发 光 )和 无 辐 射 跃 迁 等 方 式 失 去 能 量 ；传 递 途 径辐 射 跃 迁荧 光 延 迟 荧 光 磷 光 内 转 移 外 转 移系 间 跨 越 振 动 弛 预无 辐 射 跃 迁 激 发 态 停 留 时 间 短 、 返 回 速 度 快 的 途 径 ， 发 生 的 几 率 大 ，发 光 强 度 相 对 大 ；荧 光 ： 10 -7 10 -9 s,第 一 激 发 单 重 态 的 最 低 振 动 能 级 基 态 ；磷 光 ： 10-4 10s； 第 一 激 发 三 重 态 的 最 低 振 动 能 级 基 态 ； 4.非 辐 射 能 量 传 递 过

10、 程 振 动 弛 豫 ： 同 一 电 子 能 级 内 以 热 能 量 交 换 形 式 由 高 振 动 能 级至 低 相 邻 振 动 能 级 间 的 跃 迁 。 发 生 振 动 弛 豫 的 时 间 10 -12 s。 内 转 换 ： 同 多 重 度 电 子 能 级 中 ,等 能 级 间 的 无 辐 射 能 级 交 换 。 通 过 内 转 换 和 振 动 弛 豫 ， 高 激 发 单 重 态 的 电 子 跃 回 第 一激 发 单 重 态 的 最 低 振 动 能 级 。 外 转 换 ： 激 发 分 子 与 溶 剂 或 其 他 分 子 之 间 产 生 相 互 作 用 而 转移 能 量 的 非 辐 射 跃

11、 迁 ； 外 转 换 使 荧 光 或 磷 光 减 弱 或 “ 猝 灭 ” 。系 间 跨 越 ： 不 同 多 重 态 ,有 重 叠 的 转 动 能 级 间 的 非 辐 射 跃 迁 。 改 变 电 子 自 旋 ， 禁 阻 跃 迁 ， 通 过 自 旋 轨 道 耦 合 进 行 。 5.辐 射 能 量 传 递 过 程 荧 光 发 射 ： 电 子 由 第 一 激 发 单 重 态 的 最 低 振 动 能 级 基 态 （ 多 为 S1 S0跃 迁 ） ， 发 射 波 长 为 2的 荧 光 ； 10-7 10 -9 s 。 由 图 可 见 ， 发 射 荧 光 的 能 量 比 分 子 吸 收 的 能 量 小 ，

12、波 长长 ； 2 2 1 ； 磷 光 发 射 ： 电 子 由 第 一 激 发 三 重 态 的 最 低 振 动 能 级 基 态 （ T1 S0跃 迁 ） ； 电 子 由 S0进 入 T1的 可 能 过 程 ： （ S0 T1禁 阻 跃 迁 ） S 0 激 发 振 动 弛 豫 内 转 移 系 间 跨 越 振 动 弛 豫 T1 发 光 速 度 很 慢 ： 10-4 100 s 。 光 照 停 止 后 ， 可 持 续 一 段 时 间 。 200 260 320 380 440 500 560 620 荧 光 激 发 光 谱 荧 光 发 射 光 谱 磷 光 光 谱 室 温 下 菲 的 乙 醇 溶 液 荧

13、 （ 磷 ） 光 光 谱 200 250 300 350 400 450 500荧 光 激 发 光 谱 荧 光 发 射 光 谱nm蒽 的 激 发 光 谱 和 荧 光 光 谱 二 、 荧 光 的 产 生 与 分 子 结 构 的 关 系 1.分 子 产 生 荧 光 必 须 具 备 的 条 件（ 1） 具 有 合 适 的 结 构 ；（ 2） 具 有 一 定 的 荧 光 量 子 产 率 。 荧 光 量 子 产 率 （ ） ：吸 收 的 光 量 子 数发 射 的 光 量 子 数 荧 光 量 子 产 率 与 激 发 态 能 量 释 放 各 过 程 的 速 率 常 数 有 关， 如 外 转 换 过 程 速

14、度 快 ， 不 出 现 荧 光 发 射 ； 2.化 合 物 的 结 构 与 荧 光（ 1） 跃 迁 类 型 ： * 的 荧 光 效 率 高 ， 系 间 跨 越 过 程 的 速 率常 数 小 ， 有 利 于 荧 光 的 产 生 ；（ 2） 共 轭 效 应 ： 提 高 共 轭 度 有 利 于 增 加 荧 光 效 率 并 产 生 红 移（ 3） 刚 性 平 面 结 构 ： 可 降 低 分 子 振 动 ， 减 少 与 溶 剂 的 相 互 作用 ， 故 具 有 很 强 的 荧 光 。 如 荧 光 素 和 酚 酞 有 相 似 结 构 ， 荧 光素 有 很 强 的 荧 光 ， 酚 酞 却 没 有 。（ 4）

15、 取 代 基 效 应 ： 芳 环上 有 供 电 基 ， 使 荧 光 增强 。 三 、 影 响 荧 光 强 度 的 因 素 影 响 荧 光 强 度 的 外 部 因 素1.溶 剂 的 影 响 除 一 般 溶 剂 效 应 外 ， 溶 剂 的 极 性 、 氢 键 、 配 位 键 的 形 成都 将 使 化 合 物 的 荧 光 发 生 变 化 ；2.温 度 的 影 响 荧 光 强 度 对 温 度 变 化 敏 感 ， 温 度 增 加 ， 外 转 换 去 活 的 几率 增 加 。3. 溶 液 pH 对 酸 碱 化 合 物 ， 溶 液 pH的 影 响 较 大 ， 需 要 严 格 控 制 ； 4.内 滤 光 作

16、用 和 自 吸 现 象 自 吸 现 象 ： 化 合 物 的 荧 光 发 射 光 谱 的 短 波 长 端 与 其 吸 收光 谱 的 长 波 长 端 重 叠 ， 产 生 自 吸 收 ； 如 蒽 化 合 物 。 内 滤 光 作 用 ： 溶 液 中 含 有 能 吸 收 激 发 光 或 荧 光 物 质 发 射的 荧 光 ， 如 色 胺 酸 中 的 重 铬 酸 钾 ； 5.溶 液 荧 光 的 猝 灭 碰 撞 猝 灭 ； 氧 的 熄 灭 作 用 等 。 红 外 荧 光红 外 荧 光 的 特 点 及 应 用 所 内 红 外 荧 光 领 域 的 研 究 分 布v 近 红 外 激 光 晶 体1. 稀 土 离 子

17、掺 杂 的 激 光 晶 体2. 过 渡 族 离 子 掺 杂 的 激 光 晶 体v 红 外 荧 光 探 针1. 过 渡 金 属 配 合 物 稀 土 离 子 掺 杂 的 激 光 晶 体 稀 土 离 子能 级 简 图 荷 兰 的 R. T. Wegh等 利 用 德 国DESY同 步 辐 射 装 置 对 稀 土 离 子VUV波 段 的 激 发 谱 做 了 细 致 研究 ， 并 对 比 理 论 计 算 对 VUV谱区 4f能 级 的 预 测 ， 成 功 地 将Dieke图 扩 展 到 了 70000cm-1的 能量 范 围 。他 们 选 择 高 纯 LiYF4作 为 稀 土 掺杂 的 基 质 ， 因 为

18、 在 这 种 氟 化 物晶 格 中 ， 有 可 能 与 稀 土 离 子 高能 区 的 4f n能 级 相 互 干 扰 的 4fn-15d和 电 荷 迁 移 态 （ CTS） 能 级都 处 于 尽 可 能 高 的 能 区 ， 故 与4fn能 级 易 于 区 分 开 来 ， 更 便 于理 论 与 实 验 上 对 能 级 的 指 认 研究 。 扩 展 Dieke图 荧 光 图 例 Nd3+ Nd3+ Yb3+ Yb3+ Er3+ Er3+ Pr3+ Pr3+ Tm3+ Tm3+ Ho3+ Eu3+ Sm3+ Tb3+ 过 渡 族 离 子 掺 杂 的 激 光 晶 体 荧 光 图 例 相 关 参 考 过

19、 渡 金 属 配 合 物 过 渡 金 属 配 合 物 荧 光 探 针过 渡 金 属 配 合 物 的 特 点 很 多 过 渡 族 金 属 与 配 体 配 合 时 能 够 形 成 新 的能 级 结 构 （ HOMO/LUMO） ， 基 态 与 这 些 能级 的 跃 迁 往 往 被 归 结 为 MLCT或 LMCT。 这 种新 的 跃 迁 机 制 ， 较 容 易 导 致 量 子 产 率 相 对 于配 体 的 显 著 增 强 ， 同 时 可 以 通 过 改 变 配 位 中心 或 配 体 结 构 在 很 宽 的 波 段 内 调 控 其 发 射 波段 ， 所 以 从 几 十 年 前 就 开 始 研 究 了

20、 。 过 渡 金 属 配 合 物 荧 光 探 针应 用 参 考v 在 其 在 生 命 科 学 中 的 应 用 方 面 位 于 Maryland的 CFS作 了 诸 多 工 作 。综 述v Emerging Biomedical Applications of Time-Resolved Fluorescence Spectroscopy. Lakowicz, J. R. (1994) In: Topics in Fluorescence Spectroscopy, Vol. 4: Probe Design and Chemical Sensing (J. R. Lakowicz, Ed.),

21、Plenum Press, 1-19. v Recent Developments in Fluorescence Spectroscopy (1996). Lakowicz, J.R., Terpetschnig, E., Szmacinski, H., Malak, H., Kusba, J. and Gryczynski, I.,. In: Analytical Use of Fluorescent Probes in Oncology. (Kohen, E., and Hirschberg, J.G., Eds.), Plenum Press, New York. pp. 65-79.

22、 v Long-Lifetime Metal-Ligand Complexes as Probes in Biophysics and Clinical Chemistry (1997). Terpetschnig, E., Szmacinski, H., and Lakowicz, J. R. In: Methods in Enzymology, Vol. 278. Academic Press, pp. 295-321. v Recent Developments in Fluorescence Spectroscopy. Long-Lived Metal-Ligand Probes, T

23、hree-Photon Excitation, Two-Color Two-Photon Excitation and Optical Control of Excited State Population. Lakowicz, J. R., Gryczynski, I., and Szmacinski, H. (1998). Fluorescence Microscopy and Fluorescent Probes, Vol. 2 (J. Slavik, Ed.), Plenum Press, New York, pp. 1-12. 应 用 进 展v Long-lifetime Lipid

24、 Rhenium Metal-Ligand Complex for Probing Membrane Dynamics on the Microsecond Timescale. Li, L., Castellano, F. N., Gryczynski, I., and Lakowicz, J. R. (1999). Chem. Physics Lipids 99:1-9. v Synthesis and Characterization of a Sulfhydryl-Reactive Rhenium Metal-Ligand Complex. Dattelbaum, J. D., Abu

25、go, O. O., and Lakowicz, J. R. (2000). Bioconjugate Chem. 11:533-536. v Spectral Properties of Fluorophores Combining the Boronic Acid Group with Electron Donor or Withdrawing Groups. Implication in the Development of Fluorescence Probes for Saccharides, N. DiCesare and J. R. Lakowicz (2001). J. Phy

26、s. Chem. A., 105(28):6834-6840. 过 渡 金 属 配 合 物 荧 光 探 针前 景v 过 渡 金 属 配 合 物 很 多 能 实 现 较 强 的 红 外 波 段 宽 带 发射 ， 可 以 有 效 避 开 组 织 体 的 吸 收 ， 可 以 穿 透 组 织 体实 现 红 外 成 像 ， 克 服 同 位 素 原 子 示 踪 对 人 体 的 伤 害 ；v 寿 命 处 于 us量 级 ， 可 以 用 于 较 大 分 子 的 形 变 和 转 动扩 散 研 究 ， 当 然 ， 结 合 其 特 有 的 发 射 波 段 也 能 对 活体 环 境 中 的 许 多 扩 散 和 转 变

27、 过 程 进 行 研 究 。 过 渡 金 属 配 合 物 图 例 荧 光 探 针细 胞 活 性 探 针v 细 胞 活 性 和 细 胞 毒 性 试 剂 盒v 活 细 胞 探 针v 死 细 胞 探 针v 测 定 活 细 胞 中 巯 基 和 谷 光 甘 肽 的 探 针膜 荧 光 探 针v 膜 流 动 性 荧 光 探 针v 荧 光 基 团 标 记 的 磷 脂 v 阴 离 子 型 膜 探 针v 阳 离 子 型 膜 探 针v 中 性 膜 探 针 细 胞 器 探 针v 线 粒 体 探 针v 溶 酶 体 探 针v 内 质 问 探 针 v 高 尔 基 复 合 体 探 针位 点 特 异 性 荧 光 探 针v 受

28、体 特 异 性 荧 光 探 针v 细 胞 骨 架 探 针v 研 究 钙 调 节 及 活 性 的 荧 光 探 针v 核 酸 荧 光 探 针 荧 光 探 针 胞 内 离 子 探 针v 钙 离 子 探 针v 胞 内 pH值 荧 光 探 针v 其 他 离 子 探 针电 位 敏 感 性 探 针v 快 响 应 探 针v 慢 响 应 探 针笼 锁 化 合 物 探 针底 物 荧 光 探 针v 核 昔 酸 拟 生 物 及 寡 核 昔 吱 荧 光 探针v LacZ基 因 表 达 的 底 物 荧 光 探 针v GM基 因 表 达 的 底 物 荧 光 探 针v Luc基 因 表 达 的 底 物 荧 光 探 针v 脱

29、辅 水 母 蛋 白 基 因 表 达 的 底 物 荧光 探 针 v 氯 霉 素 乙 酰 转 移 酶 (cAT)的 底 物 荧光 探 针v HIv蛋 白 酶 的 底 物 荧 光 探 针 v 人 肾 素 底 物 荧 光 探 针 稀 土 元 素 探 针v 稀 土 离 子 也 是 一 类 核 酸 探 针 的 检 测 试 剂 。 在 水 溶 液 中 仅 有Tb( )和 Eu( )发 出 荧 光 ， 与 DNA配 合 后 仍 保 留 荧 光 性 能 ，可 特 异 识 别 核 苷 酸 。 Tb( )和 Eu( )与 一 些 小 分 子 配 体 配 合 ，由 于 配 体 本 身 性 质 、 中 心 离 子 -配

30、 体 成 键 及 溶 剂 等 因 素 影 响 ，使 配 合 物 的 激 发 态 寿 命 达 到 ms 级 ， 并 发 出 窄 而 强 的 荧 光 。Tb( )和 Eu( )与 小 分 子 的 配 合 物 探 针 通 过 共 价 键 与 靶 DNA 共 价 结 合 后 多 用 于 实 时 定 量 荧 光 PCR 反 应 产 物 的 分 析 及 杂交 测 试 。 该 类 探 针 要 求 稀 土 配 合 物 易 于 合 成 并 且 足 够 稳 定 ，同 时 荧 光 发 射 强 度 大 。 Nurmi 等 用 Tb( )和 Eu( )标 记 的 探针 进 行 实 时 同 步 扩 增 及 前 列 腺 特

31、 异 抗 原 的 测 定 ， 信 噪 比 要 高于 传 统 的 TaqMan 探 针 ， 而 循 环 阈 值 则 降 低 。 量 子 点 荧 光 探 针v 量 子 点 荧 光 探 针 是 由 - 族 和 - 族 元 素 组 成 的 半 导 体 纳 米 颗 粒 ， 将 核 酸 连 接 到 量 子 点的 表 面 ， 做 成 探 针 ， 通 过 体 外 杂 交 常 规 荧 光 (FISH)分 析 ， 发 现 染 色 体 的 异 常 及 变 异 ， 可 取代 一 些 有 机 荧 光 染 料 进 行 生 物 分 子 检 测 。 研 究 较 多 的 有 CdSe、 CdTe、 ZnS 等 。 量 子 点

32、探针 可 以 在 有 机 溶 剂 中 制 备 ， 但 须 经 过 一 定 的 化 学 修 饰 ， 使 其 表 面 具 有 一 定 的 水 溶 性 基 团 ，同 时 又 具 备 一 些 与 生 物 分 子 偶 连 的 活 性 基 团 ， 因 而 反 应 条 件 苛 刻 ， 步 骤 复 杂 ， 成 本 较 高 。尽 管 在 水 溶 液 中 制 备 的 成 本 低 ， 但 量 子 点 的 荧 光 产 率 低 ， 尺 寸 分 布 较 大 。 目 前 较 多 采 用 在有 机 溶 剂 中 合 成 。 在 强 激 光 下 易 发 生 光 漂 白 ， 是 有 机 类 荧 光 染 料 最 普 遍 的 缺 陷

33、。 量 子 点 探针 较 传 统 的 有 机 荧 光 染 料 具 有 一 定 的 优 越 性 。 首 先 ， 荧 光 光 谱 范 围 宽 ， 通 过 改 变 纳 米 晶 体材 料 和 尺 寸 ， 获 得 的 激 光 诱 导 荧 光 光 谱 范 围 在 400nm 2m； 其 次 ， 荧 光 光 谱 范 围 可 调 ，稳 定 性 好 ， 荧 光 寿 命 长 ， 且 可 用 单 一 波 长 的 激 发 光 源 同 时 激 发 不 同 大 小 尺 寸 的 量 子 点 ， 得到 不 同 荧 光 发 射 波 长 的 检 测 信 号 ， 相 对 于 有 机 荧 光 染 料 的 单 一 光 源 激 发 得

34、到 单 一 荧 光 发 射信 号 ， 降 低 了 实 验 成 本 并 简 化 了 分 析 步 骤 。 1998年 ， Bruchez 等 44制 备 了 CdSe-ZnS 核 -壳 结 构 的 纳 米 晶 体 ， 之 后 又 增 加 了 SiO2 层 ， 使 其 具 有 水 溶 性 ， 同 时 SiO2 经 过 修 饰 后 可 以与 生 物 分 子 结 合 ， 量 子 产 率 高 且 稳 定 。 Nie 等 将 量 子 点 的 表 面 连 接 上 巯 基 乙 酸 ， 使 量 子 点 不 仅 具 有 水 溶 性 ， 同 时 可 与 生 物 分 子 连 接 。 Pathak 等 将 量 子 点 表

35、 面 用 众 多 的 羟 基 修 饰 ， 解决 了 量 子 点 探 针 杂 交 过 程 中 的 水 溶 性 问 题 ， 同 时 降 低 了 量 子 点 表 面 大 分 子 的 非 特 异 连 接 ，稳 定 性 也 大 大 增 加 。 以 上 量 子 点 都 是 在 有 机 溶 剂 中 合 成 的 ， 林 章 碧 等 以 巯 基 乙 酸 为 稳 定 剂 ，在 水 溶 液 中 ， 合 成 了 尺 寸 为 3nm 的 CdTe 半 导 体 纳 米 粒 子 。 总 之 ， 量 子 点 荧 光 探 针 用 于 生物 荧 光 标 记 ， 是 一 个 具 有 广 阔 应 用 前 景 的 领 域 。 相 关

36、参 考v 21世 纪 化 学 丛 书 光 化 学 作 者 ： 姜 月 顺 李 铁 津 等 编 化 学 工 业 出 版 社 2005年 1月 v 荧 光 探 针 应 用 技 术 李 楠 王 凤 翔 周 春 喜 主 编 军 事 医 学 科 学 出 版 社 1998 9v Long-Lifetime Metal-Ligand Complexes as Probes in Biophysics and Clinical Chemistry (1997). Terpetschnig, E., Szmacinski, H., and Lakowicz, J. R. In: Methods in Enzym

37、ology, Vol. 278. AcademicPress, pp. 295-321. 荧 光 探 针 技 术 在 高 分 子 科 学 中 的 应 用v 利 用 荧 光 探 针 来 研 究 高 分 子 的 链 结 构 及 高 分 子 材 料 物 化 参 数v 通 过 荧 光 探 针 来 研 究 高 分 子 光 化 学 与 光 物 理 问 题v 通 过 荧 光 探 针 研 究 高 分 子 体 系 的 聚 合 反 应 过 程v 利 用 荧 光 探 针 研 究 特 殊 环 境 的 物 理 化 学 性 质v 荧 光 探 针 法 测 定 胶 束 ， 囊 胞 等 特 殊 环 境 的 微 极 性 和 微 黏 度v 荧 光 探 针 法 测 定 胶 束 的 聚 集 数v 荧 光 探 针 研 究 高 分 子 溶 液 的 Sol-Gel过 程 和 凝 胶 化 点 的 测 定v 参 考 书 目 ： 高 分 子 光 化 学 导 论 基 础 和 应 用 吴 世 康 著 科 学 出 版 社 2003-10出 版 探 针 的 其 它 应 用v当 然 也 还 有 相 应 的 稀 土 探 针 用 于 玻 璃 体 和 纳米 科 学 中 对 物 质 状 态 局 域 环 境 和 过 程 的 研 究 TiO2发 射 谱 （ 323nm激 发 ）