《高三生物复习资料》二轮复习(选修1)

《《高三生物复习资料》二轮复习(选修1)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《高三生物复习资料》二轮复习(选修1)（108页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、选 修 1 生 物 技 术 实 践 细 菌 培 养 基LB（ Luria-Bertani)液 体 培 养 基酵 母 提 取 物 0.25克蛋 白 胨 0.5克氯 化 钠 0.5克将 上 述 物 质 溶 解 后 ， 添 加 自 来 水 ， 定 溶 至 50mL。一 、 培 养 基LB固 体 培 养 基 需 加 琼 脂 1克 1、 培 养 基 的 配 制 原 则 (1)目 的 要 明 确 根 据 种 类 、 目 的 配 制(2)营 养 要 协 调 (3)pH要 适 宜 如 细 菌 ： pH6.57.5 真 菌 (如 霉 菌 )： pH5.06.0 2、 细 菌 培 养 基 的 制 备 ：培 养 基

2、 的 配 制灭 菌搁 置 斜 面 称 量溶 化调 pH分 装加 棉 塞包 扎 什 么 叫 灭 菌 ？ 什 么 叫 消 毒 ？ 为 什 么 要 灭 菌 ？若 混 有 杂 菌 ， 将 与 菌 种 形 成 竞 争 关 系 ， 影 响 菌 种 的 生长 或 不 能 分 离 到 所 需 的 微 生 物 。灭 菌 是 指 用 物 理 或 化 学 方 法 ， 杀 死 一 定 环 境 中 所 有 微生 物 的 细 胞 、 芽 孢 和 孢 子 的 方 法 。二 、 灭 菌 操 作消 毒 是 指 用 物 理 或 化 学 方 法 ， 杀 死 病 原 菌 的 方 法 。在 培 养 微 生 物 时 必 须 进 行 无

3、菌 操 作 无 菌 操 作 的 要 求 : (1)各 种 器 皿 必 须 是 无 菌 的 (2)各 种 培 养 基 必 须 是 无 菌 (3)转 移 操 作 及 其 它 环 境 也 应 是 无 菌 的 灭 菌 的 方 法(1)干 热 灭 菌 (火 焰 灼 烧 )(2)高 压 蒸 汽 灭 菌 (在 1kg/cm2压 力 的 高 压 蒸 气 锅中 (121 )灭 菌 15min。 )(3)过 滤 灭 菌 法 （ G6玻 璃 砂 漏 斗 ）(4)紫 外 光 灭 菌 法(5)化 学 药 剂 灭 菌 法 （ 如 70%75%酒 精 等 ） 实 验 操 作 前 ， 实 验 用 具 放 在 超 净 台 上

4、， 以 紫 外 灯 和过 滤 风 灭 菌 30min。 如 果 培 养 基 中 有 葡 萄 糖 ， 为 防 止 葡 萄 糖 分 解 碳 化 ，可 在 90 以 上 (500g/cm2压 力 )的 高 压 蒸 气 锅 中 灭 菌30min。 有 些 不 能 加 热 灭 菌 的 化 合 物 ， 如 尿 素 ， 可 用 G6玻璃 砂 漏 斗 过 滤 灭 菌 。灭 菌 或 消 毒 对 象接 种 环 等 金 属 或 某 些 玻 璃 用 具手培 养 基试 管 、 培 养 皿 、 三 角 瓶 等超 净 台 灭 菌 或 消 毒 方 法火 焰 灼 烧70%75%酒 精高 压 蒸 汽 灭 菌高 压 蒸 汽 灭 菌

5、紫 外 光 和 过 滤 风 三 、 细 菌 的 分 离1、 划 线 分 离 法方 法 ： 用 烧 红 后 冷 却 的 接 种 环 蘸 取带 菌 的 培 养 物 ， 在 固 体 培 养 基 的平 板 上 划 线 。分 离 划 线 法 连 续 划 线 法 2、 涂 布 分 离 法方 法 ： 将 培 养 的 菌 液 稀 释 ， 通 常稀 释 10-510-7倍 。 取 0.1mL稀 释 度不 同 的 菌 液 ， 加 在 培 养 皿 的 固 体培 养 基 上 ， 用 玻 璃 刮 刀 涂 布 在培 养 基 的 平 面 上 ， 然 后 进 行 培 养 。在 某 个 稀 释 度 下 ， 可 培 养 得 到相

6、 互 分 开 的 菌 落 ， 通 常 以 每 个 培 养 皿 中 有 20个 以 内的 单 菌 落 最 为 合 适 。划 线 分 离 法 ： 方 法 简 单 。涂 布 分 离 法 ： 单 菌 落 更 易 分 开 ， 但 操 作 复 杂 些 。单 菌 落 的 分 离 是 消 除 污 染 杂 菌 的 通 用 方 法 ， 也 是 用于 筛 选 高 表 达 量 菌 株 的 最 简 便 方 法 之 一 。 实 验 1 大 肠 杆 菌 的 培 养 和 分 离一 、 实 验 内 容 1、 用 LB液 体 培 养 基 扩 大 培 养 大 肠 杆 菌 。 2、 在 固 体 平 面 培 养 基 上 划 线 进 行

7、 分 离 。 大 肠 杆 菌 和 革 兰 氏 染 色大 肠 杆 菌 ： 革 兰 氏 阴 性 、 兼 性 厌 氧 的 肠 道 杆 菌 。 二 、 设 备 及 用 品 灭 菌 锅 、 三 角 瓶 、 封 口 膜 和 橡 皮 圈 （ 或 棉塞 ） 、 培 养 皿 、 接 种 环 和 玻 璃 三 角 刮 刀 、 恒 温培 养 箱 、 摇 床 、 酒 精 灯 和 超 净 台 、 一 次 性 手 套 、酒 精 棉 球 、 镊 子 、 有 棉 塞 的 试 管 等 。 三 、 实 验 材 料 1、 LB培 养 基 （ 液 体 和 固 体 ） 2、 大 肠 杆 菌 菌 种 斜 面 3、 空 白 斜 面 将 装

8、有 LB液 体 和 固 体 培 养基 的 三 角 瓶 ， 加 上 封 口 膜 （ 或棉 塞 ） 。 将 培 养 皿 用 牛 皮 纸 包好 ， 一 起 放 入 高 压 灭 菌 锅 内 ，1kg/cm2压 力 （ 121 ） ， 灭 菌15min四 、 实 验 步 骤 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上1、 为 什 么 用 棉 塞 而 不 用 橡 皮 塞 ？棉 塞 （ 封 口 膜 ） 能 防 止 杂 菌 污 染 ，又 保 证 通 气 良 好 。 2、 高 压 蒸 汽 灭 菌 以 前 ， 为 什么 要 将 灭 菌 锅 内 的 冷 空 气 排 尽 ？3、

9、 灭 菌 完 毕 后 ， 如 果 压 力 未 降至 零 ， 就 打 开 气 阀 ， 会 出 现 什 么现 象 ？ 为 什 么 ？如 果 灭 菌 锅 内 的 冷 空 气 没 有 排 尽 ，当 压 力 上 升 至 98kPa（ 1kg/cm2压力 ） 时 ， 锅 内 的 温 度 就 不 会 上 升 到应 有 的 高 度 （ 121 ） ， 导 致 灭 菌不 彻 底 。如 果 压 力 未 降 到 零 就 打 开 气 阀 ， 试 管 内 的 培 养 基 就 会冲 出 管 口 。 这 是 因 为 高 压 蒸 气 灭 菌 锅 内 外 压 力 不 平 衡的 缘 故 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培

10、养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 4、 固 体 培 养 基 冷 却 至 60 左 右才 能 用 来 倒 平 板 。 用 什 么 方 法 来估 计 培 养 基 的 温 度 ？用 手 触 摸 盛 有 培 养 基 的 锥 形 瓶 ，感 觉 有 些 热 又 不 烫 手 时 。5、 为 什 么 需 使 锥 形 瓶 瓶 口 通 过火 焰 ？通 过 烧 灼 灭 菌 ， 防 止 瓶 口 的 微生 物 污 染 培 养 基 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 将 三 角 瓶 内 的 固 体 培 养 基 倒入 培 养 皿 中 ， 使 之 置 于 水 平

11、 位 置 ，并 轻 轻 晃 动 ， 使 培 养 基 铺 满 底 部 ，凝 固 后 即 可 形 成 平 面 。 6、 接 种 操 作 为 什 么 要 在 火 焰 旁进 行 ？空 气 中 存 在 有 大 量 的 微 生 物 ， 而 接 种灯 的 火 焰 旁 能 形 成 一 个 无 菌 的 区 域 ，在 这 里 操 作 ， 可 以 避 免 杂 菌 的 污 染 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 在 酒 精 灯 火 焰 旁 ， 用 灭 菌 的 接种 环 将 菌 种 接 种 到 三 角 瓶 内 的 液体 培 养 基 中 ， 37 摇 床 振 荡 培 养

12、12h。7、 如 何 使 接 种 环 冷 却 后 再 挑 取菌 体 ？ 为 什 么 要 冷 却 ？让 环 先 接 触 培 养 基 上 未 长 菌 的 部 位 ，使 环 冷 却 。以 免 接 种 环 温 度 太 高 ,杀 死 菌 种 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 在 酒 精 灯 火 焰 旁 ， 用 灭 菌 的 接种 环 蘸 菌 液 一 次 ， 在 固 体 培 养 基的 平 板 上 连 续 划 线 ， 将 培 养 皿 倒置 ， 37 恒 温 培 养 箱 中 培 养 24h。8、 为 什 么 在 操 作 的 第 一 步 要 灼烧 接 种 环

13、？为 了 避 免 接 种 环 上 可 能 存 在 的 微 生物 造 成 污 染 。 9、 若 用 分 离 划 线 的 方 法 ， 为 什 么 每次 划 线 前 都 要 灼 烧 接 种 环 ？及 时 杀 死 接 种 环 上 残 留 的 菌 种 ,避免 细 菌 污 染 环 境 和 感 染 操 作 者 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上10、 为 什 么 在 划 线 操 作 结 束 时 仍 需 灼烧 接 种 环 ？为 了 杀 死 上 次 划 线 结 束 后 ， 接 种环 上 残 留 的 菌 种 ， 使 一 次 划 线 时 ，接 种 环 上 的 菌

14、种 直 接 来 自 上 次 划线 的 末 端 ， 从 而 通 过 划 线 次 数 的增 加 ， 使 每 次 划 线 时 菌 种 的 数 目减 少 ， 以 便 得 到 单 菌 落 。 11、 进 行 恒 温 培 养 时 为 什 么 要 将培 养 皿 倒 置 ? 恒 温 培 养 时 ， 培 养 基 中 的 水 分 会 以水 蒸 汽 的 形 式 蒸 发 ， 倒 放 培 养 皿 则 会使 水 蒸 汽 所 凝 结 的 水 滴 留 在 盖 上 ； 如果 正 放 培 养 皿 ， 则 水 分 形 成 的 水 滴 会落 入 培 养 基 表 面 并 且 扩 散 开 。 则 菌 落中 的 菌 会 随 水 扩 散 ，

15、 菌 落 间 相 互 影 响 ，很 难 再 分 成 单 菌 落 ， 达 不 到 分 离 的 目的 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 12、 接 种 斜 面 画 线 时 要 注 意 什 么 ？(1)由 里 向 外 画 ， (2)线 条 要 细 且 密 ；(3)不 要 重 复 划 线 ， (4)不 要 画 破 培 养 基 ，不 要 接 触 到 管 壁 或 管 口 。13、 在 什 么 条 件 下 培 养 细 菌 ？恒 温 箱 中 ， 在 37 下 培 养 24小 时 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至

16、斜面 上 在 酒 精 灯 火 焰 旁 ， 将 单 菌 落 用灭 菌 的 接 种 环 取 出 ， 用 划 线 法 接种 在 斜 面 上 ， 37 恒 温 培 养 箱 中培 养 24h后 ,置 于 4 冰 箱 中 保 存 。 14、 如 何 操 作 才 可 以 尽 量 避 免 被杂 菌 污 染 ?(1)胆 大 心 细 ， 操 作 快 捷 。(2)注 意 灭 菌 原 则 ， 灭 菌 彻 底 ， 降 低 环境 污 染 几 率 ， 手 和 实 验 服 要 清 洁 ， 减少 操 作 时 间 。(3)注 意 微 生 物 生 长 条 件 ， 如 pH、 渗 透压 、 温 度 等 。 灭 菌倒 平 板接 种 至

17、 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 15、 培 养 后 如 何 判 断 是 否 有 杂 菌污 染 ?(1)从 菌 落 形 态 看 ：细 菌 菌 落 ： 表 面 一 般 光 滑 而 湿 润 ， 有黏 稠 性 ， 多 数 透 明 或 半 透 明 。放 线 菌 菌 落 ： 表 面 是 紧 密 的 绒 状 、 坚实 多 皱 ， 长 孢 子 后 就 成 粉 末 状 ， 常 有不 同 颜 色 ， 菌 丝 可 深 入 到 培 养 基 内 。霉 菌 菌 落 ： 为 绒 毛 状 ， 孢 子 有 各 种 颜色 。(2)用 显 微 镜 镜 检 ， 观 察 其 形 态 、 大 小 ，看 是 否

18、有 菌 丝 、 孢 子 等 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 16、 实 验 完 成 后 ， 接 触 过 细 菌 的器 皿 应 如 何 处 理 ? 所 有 接 触 过 细 菌 的 器 皿 都 必 须 先高 压 灭 菌 后 再 洗 涤 ， 特 别 是 培 养 基 。使 用 后 的 废 弃 物 也 要 高 压 灭 菌 后 再 抛弃 。17、 如 果 分 离 的 是 转 基 因 工 程 的工 程 菌 ， 如 何 保 证 没 有 被 普 通 的大 肠 杆 菌 污 染 ? 因 转 基 因 用 的 质 粒 通 常 是 经 过 改造 的 质 粒 ， 具

19、有 某 种 抗 性 基 因 。 可 用含 某 种 相 应 抗 生 素 的 培 养 基 培 养 。 灭 菌倒 平 板接 种 至 液 体培 养 基 中划 线 分 离接 种 至 斜面 上 实 验 4 果 汁 中 的 果 胶 和 果 胶 酶 1、 果 胶一 、 果 胶 和 果 胶 酶 的 基 础 知 识 果 胶 是 植 物 细 胞 壁 以 及 胞 间 层 的 主 要组 成 成 分 之 一 ， 起 着 将 植 物 细 胞 粘 合 在 一起 的 作 用 。 它 是 由 半 乳 糖 醛 酸 聚 合 而 成 的一 种 高 分 子 化 合 物 (含 半 乳 糖 醛 酸 和 半 乳 糖醛 酸 甲 酯 )， 不 溶

20、 于 乙 醇 。 会 减 少 水 果 组 织的 分 散 性 ， 故 在 果 汁 加 工 中 ， 果 胶 不 仅 会影 响 出 汁 率 ， 还 会 使 果 汁 浑 浊 。 果 胶 酶 并 不 特 指 某 一 种 酶 ， 而 是 分 解 果胶 的 一 类 酶 的 总 称 ， 通 常 包 括 果 胶 酸 酶 （等 。2、 果 胶 酶 去 掉 果 胶 ， 植 物 组 织 变 得 松 散 ， 利 于 榨 取 果 汁 。作 用 ： 果 胶 酶 分 解 果 胶 ， 瓦 解 细 胞 壁 和 胞 间层 ， 使 榨 取 果 汁 变 得 更 容 易 ， 提 高 水 果 的出 汁 率 。 果 胶 分 解 成 可 溶

21、性 的 半 乳 糖 醛 酸 ，也 使 浑 浊 的 果 汁 变 得 澄 清 。来 源 ： 有 些 微 生 物 如 黑 曲 霉 、 苹 果 青 霉 等 都 可用 于 生 产 果 胶 酶 。 二 、 实 验 内 容 1、 探 究 利 用 苹 果 匀 浆 制 作 果 汁 的 最 佳 条 件 。 2、 检 测 果 胶 酶 的 活 性 。 3、 了 解 果 胶 酶 对 果 汁 形 成 的 作 用 和 收 集 果胶 酶 的 应 用 材 料 。 三 、 设 备 及 用 品 匀 浆 机 、 小 刀 、 烧 杯 、 水 浴 锅 或 酒 精 灯 、 试管 、 移 液 管 、 量 筒 等 。四 、 实 验 材 料 1

22、、 山 楂 或 苹 果 2、 黑 曲 霉 提 取 液 或 2%果 胶 酶 溶 液 3、 95%的 乙 醇 1、 将 苹 果 洗 净 、 切 开 ， 去 皮 、 籽 、 柄 ， 切 成小 块 ， 将 切 成 小 块 的 苹 果 放 入 匀 浆 机 中 ， 榨取 苹 果 汁 2、 将 榨 取 的 苹 果 汁 倒 出 ， 用 双 层 纱 布 过 滤 后装 入 烧 杯 中 备 用 。 + 4ml 苹 果 汁 + 45保 温 15分 钟12 1ml果 胶 酶+34 + 沸 水 浴4ml 苹 果 汁 + 45保 温 15分 钟1ml果 胶 酶4ml 苹 果 汁 + 45保 温 15分 钟1ml蒸 馏 水

23、沸 水 浴4ml 苹 果 汁 + 45保 温 15分 钟1ml蒸 馏 水 1 2 3 4 + 2ml 乙 醇 + 静 置10分 钟12 1ml1号 管上 清 液+34 + 1 2 3 42ml 乙 醇 + 静 置10分 钟1ml2号 管上 清 液2ml 乙 醇 + 静 置10分 钟1ml3号 管上 清 液2ml 乙 醇 + 静 置10分 钟1ml4号 管上 清 液 1 2 3 4 烧 杯号 试 管号 处 理 加 酒 精 前 现 象 加 酒 精 后 现 象A(加 酶 ) 1 加 热2 不 加 热B(加 水 ) 3 加 热4 不 加 热 分 层 十 分 明 显 ， 沉 淀浓 缩 成 一 小 团 ，

24、 果 汁澄 清 度 (+ + + +)分 层 十 分 明 显 ， 不 如 1号 试 管 澄 清 度 (+ + +)液 体 浑 浊 ， 比 4号 稍澄 清 度 (+ +)。液 体 浑 浊 ， 澄 清 度(+) 果 汁 被 稀 释沉 淀 物 (+)果 汁 被 稀 释沉 淀 物 (+ +)产 生 絮 状 沉 淀沉 淀 物 ( + + +)产 生 大 量 絮 状 沉 淀沉 淀 物 (+ + + +)1 2 3 4 1 2 3 4六 、 实 验 结 果 另取试管做 1、 果 胶 酶 能 使 果 胶 完 全 水 解 成 半 乳 糖 醛 酸 ，增 加 固 形 物 的 分 散 度 ， 降 低 水 果 匀 浆

25、的 黏度 ， 使 果 汁 澄 清 。2、 果 胶 不 溶 于 乙 醇 ， 加 乙 醇 能 使 果 胶 析 出 。 1.影 响 果 胶 酶 降 解 果 胶 的 因 素 温 度 pH值 酶 作 用 时 间 酶 的 用 量 酶 抑 制 剂 等 等 2.设 计 实 验 ， 探 究 果 汁 制 作 中 果 胶 酶 催 化 的 最适 温 度 。3.设 计 实 验 ， 探 究 果 汁 制 作 中 果 胶 酶 催 化 的 最适 pH。用 滤 出 的 苹 果 汁 的 体 积 大 小 或果 汁 的 澄 清 度 来 判 断 果 胶 酶 活 性 的 高 低 。 自 变 量 、 因 变 量 、 无 关 变 量 分 别

26、是 什 么 ？如 何 控 制 自 变 量 和 无 关 变 量 ？观 察 指 标 是 什 么 ？混 合 苹 果 泥 和 果 胶 酶 之 前 ， 要 将 果 泥 和 果 胶 酶 分 装在 不 同 的 试 管 中 恒 温 处 理 。 4.设 计 实 验 ， 探 究 果 汁 制 作 中 果 胶 酶 的 最 佳 用量 。自 变 量 、 因 变 量 、 无 关 变 量 分 别 是 什 么 ？ 如 何控 制 自 变 量 和 无 关 变 量 ？观 察 指 标 是 什 么 ？ 5.果 胶 酶 还 可 能 有 什 么 作 用 ？ 果 胶 酶 除 用 于 制 备 果 汁 外 ， 还 用 于 果 酒 澄清 ， 还 可

27、 作 为 洗 衣 粉 的 添 加 剂 （ 除 去 衣 服上 的 果 汁 、 果 酱 等 ） 。6.果 胶 酶 水 解 果 胶 的 最 终 产 物 是 什 么 ？ 要 使 果汁 澄 清 ， 应 该 使 用 果 胶 酶 和 果 胶 甲 酯 酶 中 的 哪一 种 ？ 还 是 同 时 使 用 ？ 为 什 么 ？ 这 样 才 能 使 果 胶 完 全 水 解 成 半 乳 糖 醛 酸 ， 增加 固 形 物 的 分 散 度 ， 降 低 水 果 匀 浆 的 黏 度 ， 有利 于 过 滤 掉 不 溶 物 ， 使 果 汁 澄 清 。应 同 时 使 用 。 果 胶 酶 水 解 果 胶 的 最 终 产 物 是 半 乳

28、糖 醛 酸 。 实 验 5 加 酶 洗 衣 粉 的 使 用 条 件 和 效 果 表 面 活 性 剂 有 离 子 型 和 非 离 子 型 两 种 类 型 。离 子 型 又 可 分 为 阳 离 子 型 和 阴 离 子 型 。一 、 基 础 知 识 一 般 的 家 用 洗 衣 粉 和 其 他 各 种 家 用 洗 涤 剂的 成 分 基 本 相 同 ， 主 要 含 有 表 面 活 性 剂 、 水软 化 剂 、 碱 剂 、 漂 白 剂 和 香 精 等 成 分 。 洗 衣 粉 中 主 要 含 阴 离 子 表 面 活 性 剂 如十 二 烷 基 硫 酸 钠 ， 有 的 也 加 入 非 离 子 型 表 面 活性

29、剂 如 脂 肪 醇 聚 氧 乙 烯 醚 。表 面 活 性 剂 种 类 表 面 活 性 剂 能 优 先 吸 附 在 各 种 界 面 上 ,起 到降 低 表 面 张 力 、 改 变 体 系 界 面 状 态 的 作 用 。 表 面 活 性 剂 中 含 有 疏 水 基 团 和 亲 水 基 团 ，在 洗 涤 过 程 中 有 乳 化 作 用 和 通 透 作 用 ， 使 衣 服中 的 脂 肪 类 物 质 进 入 水 中 。表 面 活 性 剂 作 用 加 酶 洗 衣 粉 就 是 在 普 通 洗 衣 粉 中 ， 加 入0.2 0.5 的 酶 制 剂 制 成 的 。 在 洗 衣 粉 中 添 加的 酶 的 种 类

30、很 多 ， 如 蛋 白 酶 、 淀 粉 酶 、 脂 肪 酶 和纤 维 素 酶 等 。 其 中 蛋 白 酶 多 用 枯 草 杆 菌 碱 性 蛋 白酶 。 加 酶 洗 衣 粉 添 加 的 酶 二 、 实 验 内 容1、 探 究 加 酶 洗 衣 粉 与 普 通 洗 衣 粉 洗 涤 效 果 的区 别 。2、 用 加 酶 洗 衣 粉 洗 涤 沾 有 鸡 血 的 棉 织 品 ， 观察 不 同 温 度 下 的 洗 涤 效 果 。三 、 设 备 及 用 品 三 角 瓶 、 镊 子 、 水 浴 锅 、 沾 有 鸡 血 的 棉 布 等 。四 、 实 验 材 料 加 酶 洗 衣 粉 和 不 加 酶 洗 衣 粉 +1

31、00ml 水 + 40 水 浴 保 温12 0.5g加酶 洗 衣粉3 摇 匀 沾 有 鸡血 的 棉布 搅 拌或 摇动+ 观察洗涤效果+100ml 水+100ml 水 + 40 水 浴 保 温摇 匀 沾 有 鸡血 的 棉布 搅 拌或 摇动+ 40 水 浴 保 温摇 匀 沾 有 鸡血 的 棉布 搅 拌或 摇动+0.5g普通 洗 衣粉不 加 洗衣 粉五 、 实 验 步 骤比 较 污 物 的 残 留 状 况 ， 如 ： 已 消 失 、 颜 色 变 浅 、 面 积缩 小 等 。判 断 洗 涤 效 果 好 与 差 的 指 标 是 什 么 ？ 衣 服 上 的 污 渍 ， 一 般 有 血 、 汗 、 油 、色

32、 素 和 食 物 的 汁 液 等 ， 它 们 无 非 是 淀 粉 、蛋 白 质 、 脂 质 等 物 质 。 这 些 物 质 可 用 淀 粉酶 、 蛋 白 酶 和 脂 肪 酶 水 解 成 为 水 溶 性 小 分子 物 质 。 因 此 ， 加 酶 洗 衣 粉 除 了 具 有 表 面活 性 剂 的 作 用 外 ， 还 有 各 种 水 解 作 用 ， 更有 利 于 去 除 污 渍 。 1.设 计 实 验 ， 探 究 加 酶 洗 衣 粉 在 什 么 温 度 下 洗涤 效 果 最 好 ？自 变 量 、 因 变 量 、 无 关 变 量 分 别 是 什 么 ？如 何 控 制 自 变 量 和 无 关 变 量 ？

33、观 察 指 标 是 什 么 ？2.设 计 实 验 ， 探 究 不 同 种 类 的 加 酶 洗 衣 粉 洗 涤效 果 的 差 别 ？七 、 问 题 讨 论 +100ml 水 + 40 水 浴 保 温12 0.5g加酶 洗 衣粉3 摇 匀 沾 有 鸡血 的 棉布 搅 拌或 摇动+ 观察洗涤效果+100ml 水+100ml 水 + 40 水 浴 保 温摇 匀 沾 有 鸡血 的 棉布 搅 拌或 摇动+ 40 水 浴 保 温摇 匀 沾 有 鸡血 的 棉布 搅 拌或 摇动+0.5g普通 洗 衣粉不 加 洗衣 粉 3.丝 绸 和 毛 织 品 能 否 用 加 酶 洗 衣 粉 洗 涤 ？ 为 什么 ？ 加 酶

34、洗 衣 粉 中 ， 多 数 都 加 了 蛋 白 酶 ， 丝 绸和 毛 织 品 都 是 由 蛋 白 质 纤 维 组 成 的 织 物 ， 酶 能切 断 纤 维 蛋 白 。 因 此 ， 不 能 使 用 。4.脂 肪 酶 对 沾 有 矿 物 油 的 棉 布 是 否 起 作 用 ？ 脂 肪 酶 水 解 的 是 酯 键 ， 只 有 对 羟 基 和 羧 基形 成 的 酯 键 起 作 用 。 但 矿 物 油 多 为 饱 和 链 烃 ，没 有 酯 键 ， 不 能 将 其 水 解 。 因 此 ， 不 起 作 用 。 实 验 6 -淀 粉 酶 的 固 定 化 及 淀 粉 水 解 作 用 的 检 测 一 、 基 础

35、知 识固 定 化 酶 ： 是 将 酶 用 物 理 或 化 学 的 方 法固 定 在 某 种 介 质 上 ， 使 之 成 为 不 溶 于 水而 又 有 酶 活 性 的 制 剂 。优 点 ： 固 定 化 酶 固 定 在 一 定 的 空 间 范 围内 ， 可 以 重 复 使 用 ， 且 能 及 时 与 产 物 分离 。 酶 固 定 化 的 常 用 方 法1. 吸 附 法 (1)物 理 吸 附 法 (2)离 子 交 换 法4. 包 埋 法 将 酶 蛋 白 包 埋 在 凝 胶交 联 后 的 “ 格 子 ” 中 。3. 交 联 法 酶 蛋 白 的 氨 基 以 戊二 醛 与 载 体 相 连 。 1. 吸 附

36、 法 (1)物 理 吸 附 法 ： 将 酶 蛋 白 分 子 吸 附 在 惰 性 载体 上 。 惰 性 载 体 指 对 蛋 白 质 有 高 度 吸 附 能 力 的活 性 炭 、 石 英 砂 等 。 (2)离 子 交 换 法 ： 酶 蛋 白 带 有 电 荷 的 基 团 与 离 子交 换 剂 形 成 离 子 键 。2. 共 价 偶 联 法 酶 蛋 白 的 一 些 基 团 与 载 体 共 价 结 合 。 二 、 实 验 内 容 1、 用 吸 附 法 将 -淀 粉 酶 固 定 在 石 英 砂 上 。 三 、 设 备 及 用 品 塑 料 注 射 器 、 烧 杯 、 滴 管 、 自 行 车 用 气 门 心和

37、 夹 子 、 注 射 器 架 、 试 管 或 微 量 离 心 管 等 。四 、 实 验 材 料 1、 -淀 粉 酶 ， 石 英 砂 ， 2、 可 溶 性 淀 粉 溶 液 3、 5mmol/LKI-I 2溶 液 一 定 浓 度 的 淀 粉 溶 液 经 过 固 定 酶 柱 后 ，可 使 淀 粉 水 解 成 糊 精 。 用 淀 粉 指 示 剂 溶 液 测试 ， 流 出 物 呈 红 色 ， 表 明 水 解 产 物 糊 精 生 成 。淀 粉 糊 精 麦 芽 糖 葡 萄 糖遇 碘 显蓝 色 遇 碘 显红 色 遇 碘 不显 色-淀 粉 酶 -淀 粉 酶 糖 化 淀 粉 酶 六 、 实 验 步 骤 5mg -

38、淀 粉 酶 +4mL蒸 馏 水+5g石 英 砂 （ 搅 拌 30min）装 入 下 端 接 有 气 门 心 并用 夹 子 封 住 的 注 射 器 中10倍 体 积 蒸 馏 水 洗 涤 注 射 器 以 除 去未 吸 附 的 淀 粉 酶 ， 流 速 1mL/min用 滴 管 滴 加 淀 粉 溶 液 ， 以0.3mL/min流 速 过 柱流 出 5mL溶 液 后 接 收 0.5mL流 出 液 ， 加12滴 KI-I 2溶 液 ， 观 察 颜 色10倍 体 积 蒸 馏 水 洗 涤 注 射 器 4 保 存为 什 么 要 控 制 流 速 ？ 淀 粉 溶 液 吸 附 有 -淀 粉 酶 的 石 英 砂 1 2

39、 3 41、 2mL水 +12滴 KI-I 2溶 液2、 2mL淀 粉 液 +12滴 KI-I2溶 液3、 2mL淀 粉 滤 液 +12滴 KI-I2溶 液4、 2mL淀 粉 滤 液 +12滴 KI-I2溶 液 +稀 释 1倍 七 、 实 验 结 果 1.冰 箱 保 存 后 的 固 定 化 酶 柱 ， 重 复 实 验 ， 是 否有 相 同 结 果 ？2.如 何 证 明 洗 涤 固 定 化 酶 柱 的 流 出 液 中 没 有 淀粉 酶 ？八 、 问 题 讨 论 实 验 8 果 酒 及 果 醋 的 制 作 一 、 酵 母 菌 的 基 础 知 识 形 态 结 构 单 细 胞 真 菌 ， 属 真 核

40、生 物 ， 呈 圆 形 、 椭 圆 形 等 。 繁 殖 方 式 酵 母 菌 的 繁 殖 方 式 有 出 芽 生 殖 、 分 裂 生 殖 和 孢 子生 殖 ， 常 进 行 出 芽 生 殖 。 分 布 自 然 界 中 ， 酵 母 菌 分 布 广 泛 ， 多 分 布 在 含 糖 较高 的 偏 酸 环 境 中 ， 如 水 果 、 花 、 树 皮 等 。 一 年 四季 ， 土 壤 始 终 是 酵 母 菌 的 大 本 营 。 第 一 节 、 果 酒 的 制 作 需 氧 呼 吸 的 反 应 式 ： 厌 氧 呼 吸 的 反 应 式 ：C6H12O 6+6O 2+6H2O 6CO 2+12H2O +能 量C6H

41、12O 6 2C2H5O H+2 CO 2+能 量酶当 乙 醇 浓 度 超 过 16 时 ， 酵 母 菌 死 亡 。 代 谢 类 型 异 养 ， 兼 性 厌 氧 繁 殖 的 最 适 温 度 ： 20 ；酒 精 发 酵 的 温 度 范 围 ： 1825 。 影 响 酒 精 发 酵 的 主 要 环 境 条 件 酶温 度 、 氧 气 和 pH 三 、 设 备 及 用 品 510L的 大 瓶 、 适 合 于 瓶 口 的 软 木 塞 或 橡 胶 塞 或压 紧 的 一 大 团 棉 花 、 有 弯 曲 的 安 全 玻 璃 管 、 过 滤 器 、纱 布 、 多 功 能 榨 汁 机 或 研 钵 及 杵 、 若

42、干 带 瓶 盖 的 小口 瓶 等四 、 实 验 材 料 (葡 萄 酒 的 制 作 ） 1、 紫 葡 萄 2、 新 鲜 酵 母 或 干 酵 母 四 、 实 验 步 骤 清 洗 榨 汁制 备 酵 母 悬 液原 料 装 瓶发 酵过 滤 、 保 存1、 高 锰 酸 钾 溶 液 中 浸 泡 5 min 的作 用 ？ 应 该 先 冲 洗 ， 然 后 再 除 去 枝 梗 ， 以 避 免 除 去 枝梗 时 引 起 葡 萄 破 损 ， 增 加 被 杂 菌 污 染 的 机 会 。葡 萄 洗 净 高 锰 酸 钾 溶 液 中浸 泡 5 min冲 洗 后 榨 成 浆 状2、 你 认 为 应 该 先 冲 洗 葡 萄 还

43、是 先 除 去枝 梗 ？ 为 什 么 ？ 清 洗 榨 汁制 备 酵 母 悬 液原 料 装 瓶发 酵过 滤 、 保 存适 量 干 酵 母 (每 2.5kg葡 萄 约 1g干 酵 母 )加 少 量 温 水 (小 于 40 )在 烧 杯 内 调 成糊 状 。 为 使 其 迅 速 发 生 作 用 ， 可 加 极少 量 蔗 糖 ， 混 匀 ， 放 置 片 刻 ， 出 现 气泡 即 可 。 清 洗 榨 汁制 备 酵 母 悬 液原 料 装 瓶发 酵过 滤 、 保 存葡 萄 浆 放 入 发 酵 瓶 中 ，装 量 不 超 过 2/3， 然 后加 入 酵 母 悬 液 ， 搅 拌均 匀 。 加 上 一 个 软 木塞

44、 ， 塞 内 插 入 弯 曲 玻璃 管 。3.为 什 么 发 酵 瓶 中 的 液 体 不 能 装 满 ?发 酵 过 程 中 有 气 体 产 生 ， 留 有 空 间 可 暂 时 储气 ， 起 缓 冲 作 用 ； 否 则 液 体 装 满 后 气 体 会 使液 体 外 溢 ， 损 失 发 酵 液 ， 且 瓶 口 等 处 由 于 有发 酵 液 易 引 起 杂 菌 污 染 。4.装 水 的 弯 曲 玻 璃 管 起 什 么 作 用 ? 既 可 防 止 氧 气 进 入 ， 又 可 排 出 二 氧 化 碳 ， 同 时 还 能 防 止 杂 菌污 染 。 清 洗 榨 汁制 备 酵 母 悬 液原 料 装 瓶发 酵过

45、 滤 、 保 存5.发 酵 完 毕 的 标 志 是 什 么 ?6.适 宜 温 度 是 多 少 ？ 高 于 30 ， 为 什 么 需 要 降 温 ？发 酵 瓶 放 在 2530 条 件 下 23天 ，当 停 止 出 现 气 泡 ， 表 示 发 酵 完 毕 。若 温 度 偏 低 ， 则 时 间 相 对 延 长 。 若温 度 高 于 30 ， 需 要 降 温 ， 否 则 酒的 风 味 不 佳 。 清 洗 榨 汁制 备 酵 母 悬 液原 料 装 瓶发 酵过 滤 、 保 存用 两 层 纱 布 滤 去 葡 萄 皮 和 籽 ， 将获 得 的 滤 液 分 装 到 12L的 细 口 瓶中 ， 加 盖 密 封 ，

46、 静 置 。 待 沉 淀 后 ，上 清 夜 即 为 葡 萄 酒 。 （ 可 保 存12年 ）在 发 酵 的 过 程 中 ， 随 着 酒 精 度 的 提 高 ， 红 葡萄 皮 的 色 素 也 进 入 发 酵 液 ， 使 葡 萄 酒 呈 红 色 7、 葡 萄 酒 呈 红 色 的 原 因 ？ C6H12O 6 2C2H5O H+2 CO 2+能 量酶酵 母 菌 在 无 氧 条 件 下 进 行 酒 精 发 酵 ， 将葡 萄 糖 氧 化 成 酒 精 1.葡 萄 或 其 他 果 实 上 常 有 天 然 的 野 生 酵 母 存 在 ,为什 么 上 述 实 验 还 要 接 种 酵 母 ? 为 了 加 速 反

47、应 ， 使 观 察 更 直 观 ， 需 要 较 多 数量 的 酵 母 菌 ； 同 时 ， 加 酵 母 后 使 酵 母 的 酒 精 发 酵占 有 优 势 ， 避 免 许 多 霉 菌 生 长 ， 出 现 异 味 。2.制 酒 时 必 须 保 证 所 有 用 具 都 是 清 洁 的 ， 为 什 么 ? 各 种 水 果 对 微 生 物 来 说 都 是 良 好 的 培 养 基 ，特 别 是 霉 菌 。 如 果 用 具 不 洁 净 ， 就 可 能 有 许 多 杂菌 进 入 果 汁 ， 那 制 作 的 就 不 是 果 酒 ， 而 是 杂 菌 培养 液 。 3、 你 认 为 应 该 从 哪 些 方 面 防 止

48、 发 酵 液 被 污 染 ？ 用 果 汁 制 作 果 酒 用 葡 萄 制 作 的 葡 萄 酒 含 糖 较 低 ， 酒 精 含 量也 低 （ 平 均 体 积 分 数 为 8%） 。 用 果 汁 制 作 的 果 酒 含 糖 量 高 ， 酒 精 含 量 也较 高 （ 可 达 ） 15%。设 备 及 用 品同 “ 用 葡 萄 制 作 葡 萄 酒 ”材 料1.苹 果 （ 最 好 ） 、 梨 、 柑 橘 或 其 他 水 果2.新 鲜 酵 母 或 干 酵 母 实 验 步 骤 清 洗 榨 汁制 备 酵 母 悬 液原 料 装 瓶发 酵过 滤 、 保 存1.为 什 么 要 加 蔗 糖 ?向 发 酵 瓶 中 先 加

49、 一 定 量蔗 糖 ， 再 倒 入 果 汁 ， 最后 倒 入 酵 母 悬 液 ， 混 匀 ，加 盖 。2、 发 酵 开 始 时 ， 酵 母 菌 的 需 氧 呼吸 会 使 发 酵 瓶 内 出 现 负 压 ， 为 什 么 ? 为 了 加 速 反 应 ， 使 观 察 更 直 观 ，需 要 更 多 的 底 物 参 加 反 应 。 清 洗 榨 汁制 备 酵 母 悬 液原 料 装 瓶发 酵过 滤 、 保 存3天 后 气 泡 冒 出 ， 10天 后 剧 烈 的 发酵 停 止 ， 取 出 过 滤 分 装 。若 3天 后 还 没 有 气 泡 冒 出 ， 必 须 加入 更 多 酵 母 ， 使 发 酵 尽 快 发

50、生 。静 置 56个 月 ， 酵 母 下 沉 ， 上 清 液即 为 果 酒 。 可 用 虹 吸 法 取 出 。 一 、 醋 化 醋 杆 菌 的 基 础 知 识 形 态 结 构 单 细 胞 原 核 生 物 ， 椭 圆 、 杆 状 等 。 繁 殖 方 式 分 裂 生 殖第 二 节 、 果 醋 的 制 作 代 谢 类 型 异 养 需 氧 型 C 2H5O H+O 2 CH3CO O H+H2O最 适 生 长 温 度 ： 30 35 。 最 适 pH值 为 3.56.5。 在 有 氧 条 件 下 ， 能 将 乙 醇 氧 化 成 醋 酸 醋 杆 菌醋 酸 含 量 可 高 达 13 。 二 、 设 备 及

51、 用 品5L的 下 口 瓶 2个 、 500L锥 形 瓶 1个 、直 角 玻 璃 管 (长 短 不 同 )3根 、直 玻 璃 管 4根 、 单 孔 橡 胶 塞 2个 、双 孔 橡 胶 塞 1个 、 胶 管 约 1m 、锯 末 适 量 (足 以 装 满 1.5L的 下 口 瓶 、脱 脂 棉 少 量 、 铝 箔 少 量 、 水 族 箱通 气 泵 1、 铁 架 及 铁 夹 几 副三 、 材 料1.果 酒2.醋 酸 杆 菌 四 、 步 骤1.装 置 连 接如 图 ， 甲 内 装 入 800mL酒 -水 混 合 物 ， 铝 箔 盖 住 上 口 。乙 瓶 为 发 酵 瓶 ， 内 填 锯 末至 八 分 满

52、； 下 口 各 插 入 一直 角 玻 璃 管 (发 酵 液 出 口 )和 另 一 直 角 玻 璃 管 (内 塞 脱脂 棉 ,用 以 过 滤 空 气 ,另 一端 升 至 锯 末 之 上 ) 通 入 空 气 (2)将 水 族 箱 通 气 泵 的 出 气管 与 乙 瓶 上 塞 棉 花 的 玻 璃管 相 连 ， 通 气 。2.醋 酸 发 酵(1)适 量 醋 化 醋 杆 菌 的 培 养 物 或 醋曲 悬 液 加 入 200mL酒 -水 混 合 物中 混 匀 ， pH调 至 7.0后 倒 入 乙 瓶 ，使 锯 末 均 匀 湿 透 。 通 入 空 气2.为 什 么 要 向 发 酵 瓶 中 通 入 空 气 ?

53、3.为 什 么 空 气 要 用 棉 花 过 滤 ?醋 酸 发 酵 为 需 氧 发 酵可 防 止 微 生 物 进 入1.锯 末 的 作 用 是 什 么 ?使 醋 化 醋 杆 菌 附 着 在 锯 末 上 (3)发 酵 48h， 检 测 pH， 若 明显 酸 性 ， 则 进 入 下 一 步 。(4)调 节 甲 到 乙 的 流 量 为 每5分 钟 1滴 。 乙 到 丙 也 同 样速 度 。2.醋 酸 发 酵 通 入 空 气(5)每 天 检 测 pH， 等 到 流 出液 pH不 再 减 少 ， 或 甲 瓶 液体 全 部 流 入 乙 瓶 时 ， 停 止实 验 。 2.醋 瓶 子 、 未 喝 干 的 啤 酒

54、 瓶 子 放 置 久 了 ， 在 醋 和 啤 酒表 面 形 成 一 层 “ 白 膜 ” 。 它 是 怎 样 形 成 的 ？ 醋 酸 菌 大 量 繁 殖 形 成 的 。 1.影 响 醋 酸 发 酵 的 环 境 因 素 有 哪 些 ？ 3.你 所 得 到 的 丙 瓶 中 的 液 体 是 否 就 是 市 售 的 白醋 ,为 什 么 ?不 是 ， 市 售 白 醋 除 含 有 醋 酸 外 还 有 丰 富 的 不 挥发 性 酸 、 糖 、 酯 、 醇 等 物 质 ， 这 些 多 为 酵 母 所产 生 。温 度 、 氧 气 和 pH等 实 验 现 象发 酵 酒 精 发 酵 醋 酸 发 酵气 味 和 味 道

55、酒 味 酸 味气 泡 和 泡 沫 有 气 泡 和 泡 沫 无 气 泡 和 泡 沫发 酵 液 颜 色 混 浊 混 浊 ， 液 面 形 成 白 色 菌 膜酒 精 发 酵 和 醋 酸 发 酵 的 比 较 醋 酸 发 酵酒 精 发 酵 为 醋 酸 发 酵 提 供 。 酒 精 发 酵联 系氧 气微 生 物区 别 酵 母 菌 醋 化 醋 杆 菌无 氧 有 氧 酒 精 实 验 10 泡 菜 的 腌 制 和 亚 硝 酸 测 定 第 一 节 泡 菜 的 制 作 泡 菜 腌 制 过 程 中 起 作 用的 主 要 是 假 丝 酵 母 和 乳 酸 菌 。 无 氧 条 件 下 ， 微 生 物 利 用 菜 中 的 糖 和

56、其 它 营 养 物 进 行 发 酵 ， 发 酵 产 物 有 有 机 酸和 醇 类 物 质 等 ， 其 中 也 有 亚 硝 酸 盐 。泡 菜 是 一 种 以 湿 态 发 酵 方 式 加 工 制成 的 浸 制 品 ， 是 一 种 发 酵 食 品 。泡 菜 制 作 容 易 ， 成 本 低 廉 ， 风 味 可 口 ， 利 于 贮 存 。一 、 基 础 知 识 （ 泡 菜 的 制 作 ） 三 、 设 备 及 用 品 泡 菜 坛 、 菜 刀 、 菜 板 ； 四 、 实 验 材 料 各 种 蔬 菜 均 可 ， 一 般 用 白 菜 、 洋 白 菜 、 黄 瓜 、 柿 子椒 、 胡 萝 卜 、 白 萝 卜 等

57、； 添 加 的 调 味 品 ， 如 花 椒 、 大 蒜 、 辣 椒 等 ； 白 酒 ； 食 糖 和 盐 。二 、 实 验 内 容 制 作 泡 菜 并 对 亚 硝 酸 盐 进 行 测 定 五 、 实 验 步 骤 原 料 清 洗 、切 块 、 晾 干清 洗 泡 菜 坛原 料 装 瓶 、 加 入 调 味品 ， 再 加 一 些 白 酒加 盖 、 密 封发 酵1.起 发 酵 作 用 的 主 要 菌 种 是 什么 ？ 来 自 哪 里 ？假 丝 酵 母 和 乳 酸 菌 ， 主 要 来 自蔬 菜 等 自 然 环 境 。2.加 入 白 酒 起 什 么 作 用 ？可 抑 制 泡 菜 表 面 杂 菌 的 生 长 ，

58、它 也 是 一 种 调 味 剂 ， 可 增 加 醇香 感 。 原 料 清 洗 、切 块 、 晾 干清 洗 泡 菜 坛原 料 装 瓶 、 加 入 调 味品 ， 并 加 一 些 白 酒加 盖 、 密 封发 酵创 造 无 氧 环 境 ， 使 乳 酸 菌 进 行乳 酸 发 酵 。如 不 封 闭 ， 则 会 有 许 多 需 氧 细菌 生 长 ， 蔬 菜 会 腐 烂 。3.用 水 封 闭 坛 口 起 什 么 作 用 ？ 不封 闭 有 什 么 结 果 ？ 原 料 清 洗 、切 块 、 晾 干清 洗 泡 菜 坛原 料 装 瓶 、 加 入 调 味品 ， 并 加 一 些 白 酒加 盖 、 密 封发 酵无 氧 环

59、境 ， 使 许 多 需 氧 菌 不 能生 存 。乳 酸 菌 产 生 的 乳 酸 及 某 些 代 谢产 物 能 抑 制 细 菌 的 生 长 。4.为 什 么 泡 菜 较 耐 贮 存 ？5. 有 时 要 加 一 些 “ 腌 制 过 的 泡菜 汁 ” ， 有 什 么 作 用 ?腌 制 过 的 泡 菜 汁 中 有 较 多 假 丝酵 母 和 乳 酸 菌 等 菌 种 ， 可 减 少腌 制 时 间 。 第 二 节 亚 硝 酸 盐 含 量 的 测 定 一 、 实 验 原 理 亚 硝 酸 盐 可 与 对 氨 基 苯 磺 酸 发 生 重 氮 化 反 应后 ， 这 一 产 物 再 与 N-1 萘 基 乙 二 胺 偶

60、 联 ， 形 成紫 红 色 产 物 。 可 用 光 电 比 色 法 定 量 。 （ 将 经 过 反 应 显 色 后 的 待 测 样 品 与 标 准 液比 色 ， 即 可 大 概 算 出 样 品 中 的 亚 硝 酸 盐 含 量 。 ） 2HCl+NaNO2+H2N- -SO3H 重 氮 化H3SO-Cl- - +NaCl 2H+ 2O2HCl.H2NH2CH2CHN- + -N-Cl N- -SO3H 偶 合-CHN2CH2NH2H.2HCl -N- H3SO-N + HCl盐 酸 萘 乙 二 胺紫 红 色 二 、 材 料 与 器 具泡 菜N-1 萘 基 乙 二 胺 溶 液 、 对 氨 基 苯

61、磺 酸 、硫 酸 锌 溶 液 、 氢 氧 化 钠 、 亚 硝 酸 钠 、 氯化 铵 缓 冲 液 等蒸 馏 水 、 移 液 器 、 容 量 瓶 、 榨 汁 机 、 分光 光 度 计 等 亚 硝 酸 钠 标 准 溶 液 (测 定 时 用 )： 取 1mL亚 硝 酸 钠 储 液 ， 移 至 100mL容量 瓶 中 ， 加 蒸 馏 水 定 容 ， 即 制 得 5g/mL亚 硝 酸 钠 标 准 液 。显 色 液 ： 将 N 1 萘 基 乙 二 胺 溶 液 与 对 氨 基苯 磺 酸 溶 液 (上 清 液 )等 体 积 混 合 。试 剂 的 配 制 泡 菜 样 品 处 理测 定 光 密 度 值绘 标 准 曲

62、 线计 算取 25g泡 菜 ， 打 成 匀 浆 ， 过 滤 ，洗 涤 ， 用 NaO H调 pH至 8， 加25mLZnSO 4， 60 水 浴 ， 过 滤 ，洗 涤 ， 定 容 于 500mL容 量 瓶 中 。 泡 菜 样 品 处 理测 定 光 密 度 值绘 标 准 曲 线计 算 用 移 液 器 吸 取 10mL样 品 溶液 ， 加 入 4.5 mLNH4CL缓冲 液 ， 2.5mL60%乙 酸 和5mL显 色 液 ， 加 水 定 容 于25mL的 容 量 瓶 中 。 混 合均 匀 ， 暗 处 静 止 25min ，测 光 密 度 值 。 以 10mL水为 空 白 对 照 。 泡 菜 样 品

63、 处 理测 定 光 密 度 值绘 标 准 曲 线计 算用 移 液 器 先 吸 取 0， 0.5， 1.0，3.0， 5.0mL的 亚 硝 酸 钠 标 准 溶液 ， 分 别 置 于 25mL容 量 瓶 中 。再 各 加 入 4.5 mLNH4CL缓 冲 液 ，2.5mL60%乙 酸 和 5mL显 色 液 ，加 水 定 容 至 25mL， 混 合 均 匀 ，暗 处 静 置 25min， 测 光 密 度 值 。以 亚 硝 酸 钠 质 量 为 横 坐 标 ， 以光 密 度 值 为 纵 坐 标 ， 绘 标 准 曲线 。 泡 菜 样 品 处 理测 定 光 密 度 值绘 标 准 曲 线计 算若 通 过 标

64、准 曲 线 ， 查 出 10mL样品 中 含 m2(g)的 亚 硝 酸 盐 ， 则每 千 克 样 品 中 含 亚 硝 酸 盐 多 少mg? 实 验 11 植 物 的 组 织 培 养 1、 植 物 组 织 培 养 的 过 程外 植 体愈 伤 组 织胚 状 体或 根 、 芽 等植 物 体脱 分 化再 分 化 愈伤组织一 、 基 础 知 识 你 认 为 培 养 基 应 有 哪 些 成 分 ?2、 植 物 组 织 培 养 的 培 养 基 培 养 基 的 成 分 矿 质 元 素 蔗 糖 植 物 激 素 维 生 素 有 机 添 加 物 琼 脂 等 外 植 体愈 伤 组 织胚 状 体或 根 、 芽植 物 体

65、脱 分 化再 分 化 培 养 基培 养 基 MS培 养 基 MS培 养 基 含 有 十 几 多 种 化 合 物 ， 配 制不 方 便 也 难 称 量 准 确 ， 可 将 培 养 基 中 的 各 种成 分 扩 大 一 定 倍 数 分 别 称 量 ， 配 成 浓 缩 液 ，这 种 浓 缩 液 叫 做 培 养 基 母 液 。 (母 液 配 制 见 下表 ) Murashige和 Skoog于 1962年 为 烟 草 细 胞培 养 设 计 的 。 能 满 足 植 物 细 胞 的 营 养 和 生 理需 要 ， 适 用 范 围 比 较 广 ， 多 数 植 物 组 织 培 养快 速 繁 殖 用 它 作 为

66、培 养 基 的 基 本 培 养 基 。 MS培 养 基 的 配 制 : 按 比 例 分 别 取 适 量 各 种 成 分 的 母 液 ， 加入 烧 杯 ， 称 取 适 量 的 蔗 糖 和 琼 脂 ， 加 适 量 蒸馏 水 并 加 热 使 琼 脂 溶 解 ， 按 照 需 要 的 浓 度 分别 加 入 激 素 ， 用 1mol/L NaO H和 1mol/L HCl溶 液 调 节 pH至 5.86.0。 灭 菌 。 调 控 芽 和 根 的 发 生细 胞 分 裂 素 /生 长 素 大 致 相 等时 ， 愈 伤 组 织 继 续 生 长 而 不分 化细 胞 分 裂 素 /生 长 素 比 例 高 ，有 利 芽 的 发 生细 胞 分 裂 素 /生 长 素 比 例 低 ，有 利 根 的 发 生3、 植 物 激 素 对 植 物 组 织 培 养 的 影 响 外 植 体愈 伤 组 织胚 状 体或 根 、 芽植 物 体脱 分 化再 分 化 无 菌培 养 基无 菌培 养 基 实 验 中 使 用 的 生 长 素 是 人 工 合成 的 萘 乙 酸 （ NAA） ， 细 胞 分裂 素 也 是 人 工 合 成 的 苄 基