石细胞的测定方法

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1、法一冷冻法:将梨皮削去, 按果实的四分法取样注意勿将果心周围的 石细胞取入,每组样品取200g果肉,放入塑料袋中,置于低温冰箱 (-16-20C)过夜。次日取出,待解冻后加水约100ml,用组织捣碎 机捣碎(1500转/分)1 分钟, 取出放入800毫升的大烧杯中, 加约200毫 升水, 用玻棒搅拌, 静置片刻, 去掉上面的果肉渣, 再加水搅拌,倒去 上层物, 反复3-4次。最后呈现在下面的是颗粒完整的石细胞。分别 用孔径0.75,0.5和0.25毫米的分样筛过筛, 得到的便是干净、完整的 直径大于0.75毫米, 直径在0.75-0.5毫米直径在0.25-0.5毫米的石 细胞。再用滤纸吸干水分

2、, 分别称重, 计算每百克果肉所含石细胞的 量。法二冷冻法:每种处理设重复。每个重复200 g果肉。取1.0cm3种果肉 切块,一 16 20C冰柜中冷冻24h,样品解冻后,22000 r/min匀浆 3min。将匀浆转移至1000 mL烧杯中。加水至800 mL.用玻璃棒搅拌 1 min,静置3 rai n,倾出上层悬浮液。如此反复漂洗,直至洗净一般 需要漂洗34次)。收集最初几次漂洗倾出的悬浮液,漂洗。合并所 得石细胞,用粗滤纸过滤。将石细胞铺开,连同滤纸置烘箱中)0 65C烘2 h,取出,干燥器中冷却至室温。收集石细胞,称量,精确 到1 mg法二冷冻酶解法:去除果皮和果核,切块四分法取果肉100 g,放于 一2OC冰箱中冷冻24 h,解冻后加少许水用组织捣碎机(1 500 r/min) 打浆1分钟,转入量筒中,加适量水搅拌,静置片刻吸去上部带果肉 液体,反复几次,留下稍带果肉的石细胞,再转入烧杯中,煮沸10 min, 冷却至室温,调pH值至3.5,加入果胶酶3滴,4oC酶解2 h。转入量 筒中去除果肉渣,石细胞用孔径0. 75 mm、0. 5 mm和0. 25 mm的 分样筛过筛,不同大小的石细胞分别转入培养皿,用滤纸吸干水分 室内晾干30 min称取鲜重;然后放入80C烘箱中30 min称取干重。

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