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1、人巨细胞病毒pp65抗原检测,监测免疫抑制病人的CMV感染,* 人巨细胞病毒（CMV）感染甚为普遍 * 人巨细胞病毒（CMV）感染是免疫功能低下者的常见机会感染 * 器官移植后活动性HCMV感染率为20-70%，如发生CMV肺炎，死亡率可达80-90% * CMV还有抑制机体免疫功能的作用，CMV感染可增加真菌和其他机会感染发生率， * 还可能造成异基因移植物的损害。 * 目前对器官移植后CMV病的重点是预防，包括预防性抗病毒或针对CMV亚临床感染(Preemptive)抗病毒治疗治疗 。,* 早期检测活动性HCMV感染是pre-emptive治疗的前提条件 * CMV常规病毒培养(CCC)往
2、往需4周才能获阳性结果,对早期 诊断帮助不大 * CMV特异性抗体IgM，在严重免疫抑制患者可不出现或延迟出现。 * 人巨细胞病毒pp65白细胞抗原血症较特异性抗体IgM阳性早出现30天1。优点是可定量检测，5小时内可出结果。,研究目的 了解HCMVpp65抗原检测在免疫功能低下者临床HCMV疾病预测或早期诊断中的价值。 了解HCMVpp65抗原检测在监测疾病活动性和指导CMV“亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。 应用HCMVpp65抗原检测分析免疫抑制病人CMV感染的危险因素,试验原理 用免疫荧光标记的单克隆抗体检测CMV的低基质磷蛋白 pp65。 pp65的特点 * CMV病毒复制的早期蛋白
3、，它出现于病毒感染的早期，在细胞感染后34小时即开始出现 * 是CMV病毒含量最丰富的蛋白 * 其功能是将病毒的DNA锚定在受感染细胞的核膜上 * 在胞浆的高尔基体内合成,然后运回核内。,CMV PP65抗原血症检测 （一)分离白细胞及制片 (二) 固定和打孔 (三) 免疫荧光染色 (四)、读片和结果判断,试验结果,讨论 一pp65抗原血症检测 直接检测病毒蛋白的方法不受机体免疫功能的响，在检测免疫抑制病人的CMV活动性感染时尤其有用. 其检出率明显高于血清学方法 特点为快速（手工操作4-5小时）、敏感性高（活动性感染80-90%，CMV病99-100%）和较高的特异性（77-95%）、可以定
4、量测试 用其指导治疗明显降低了死亡率,在骨髓移植中，可在发病早期诊断，亚临床感染的检出率偏低，应寻求更好的预测方法，或调整诊断标准 不能检测新毒株和抗原决定簇有变异的毒株 治疗后抗原血症转阴的病人少部分会复发，应结合更好的监控疗效的方法,一PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用1 早期诊断 * 骨髓移植后早期用IGM来诊断CMV感染将贻误治疗 * pp65抗原检测可用于早期诊断，甚至预测发病 * 如果能在骨髓重建的早期检测到对CMV的细胞免疫或体液免疫异常或抑制则能更准确地预测CMV感染。,PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用 2 骨髓移植后CMV感染的危险因素 CD34细胞
5、分选 GVHD(FK506) TBI 合并其他病原体感染,PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用3 治疗时间 细胞数多者和少者症状性感染的发病率是相近的 90的症状性感染首次阳性抗原血症的PP65阳性细胞数 10个/1.510（17） 我们认为这组病人只要发现阳性细胞即应治疗,首次pp65抗原阳性细胞数与CMV疾病危险性 首次pp65抗原阳性细胞 发病/活动性感染 计数 例数 1 1/1 23 5/5 410 5/6 10 2/2 由于病例数少，无法进行COXS比例危险性分析.,PP65在监测自身免疫病病人CMV感染中的应用 发热的自身免疫病病人出现CMV感染发病率和死亡率均很高，CM
6、V感染可能是重要的致病原 较之白细胞减少机体免疫状态异常和这种异常未被有效控制，可能是病毒活动性复制的更主要的原因 阳性细胞数多少可以帮助判断和预测CMV症状性感染 CMV特异性IgM的阳性检出率非常低，,CMV感染的危险因素 CMV感染组DRI评分大多20 合并细菌或感染 病程长、未正规治疗的狼疮,三 PP65检测在监测血液肿瘤化疗后和再障病人中CMV感染中的应用,发热的血液肿瘤化疗后和再障病出现CMV感染发病率和死亡率均很高 幼稚细胞多，分化程度低，无抗病毒作用或病毒 作用很弱，可能是病毒活动性复制的更主要的原因 CMV特异性IgM的阳性检出率非常低 合并细菌或其他感染者CMV感染率高，感染可由多种炎症因子触发,结论 人巨细胞病毒pp65白细胞抗原血症检测可作为免疫功能低下者活动性CMV感染或HCMV疾病的预测指标 骨髓移植后或激素冲击/化疗后发热患者PP65抗原血症出现开始抗病毒治疗可明显降低死亡率。 CMV感染与多种临床危险因素有关,
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