食用菌制种技术课件

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1、食用菌制种技术1食用菌菌种的生产食用菌菌种的生产 食用菌制种技术2 食用菌制种技术3 食用菌菌种有特定的制作程序，只有掌握了食用菌菌种有特定的制作程序，只有掌握了制种技术，才能生产出优良菌种，使食用菌栽培制种技术，才能生产出优良菌种，使食用菌栽培获得成功。获得成功。 1 1、菌种类型及制种程序、菌种类型及制种程序 食用菌制种技术4食用菌制种技术5 一一 、菌种的制作、菌种的制作 食用菌制种技术6食用菌制种技术7 一一 、菌种的制作、菌种的制作 一级种又称母种、试管种。一级种又称母种、试管种。 将经孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物，移将经孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物，移接到试管斜面培

2、养基上培养而得到的纯种。接到试管斜面培养基上培养而得到的纯种。 采用分离法获得的母种数量有限，一般可将菌丝再采用分离法获得的母种数量有限，一般可将菌丝再次转接到新的斜面培养基上进行转管繁殖，能得到更多的次转接到新的斜面培养基上进行转管繁殖，能得到更多的母种，称为母种，称为再生母种再生母种，即可用于生产，也适用于纯种的保，即可用于生产，也适用于纯种的保藏藏 。 一支长满菌丝体的试管母种可分移成一支长满菌丝体的试管母种可分移成10多支新试管。多支新试管。试管种若不马上使用，可置于试管种若不马上使用，可置于4的冰箱中保存。的冰箱中保存。 食用菌制种技术8 一一 、菌种的制作、菌种的制作 二级种又称二

3、级种又称原种原种，这是由母种转接到装有麦粒等固体培，这是由母种转接到装有麦粒等固体培养基质的专有菌种瓶中经过培养后形成。原种可采用养基质的专有菌种瓶中经过培养后形成。原种可采用750mL菌种瓶或菌种瓶或500mL罐头瓶作为培养容器。一般一支母种可扩大罐头瓶作为培养容器。一般一支母种可扩大繁殖繁殖6-8瓶原种。瓶原种。 若原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种还必若原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种还必须进一步扩大繁殖成三级种，使菌种数量增多，才能用于须进一步扩大繁殖成三级种，使菌种数量增多，才能用于栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的基质，因此原栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的

4、基质，因此原种也可用于小规模的栽培。种也可用于小规模的栽培。 食用菌制种技术9 一一 、菌种的制作、菌种的制作 三级种又称栽培种，它是由二级种进一步扩大繁殖三级种又称栽培种，它是由二级种进一步扩大繁殖而得。而得。 栽培种的培养基质与二级种相似，更接近于栽培基质。栽培种的培养基质与二级种相似，更接近于栽培基质。三级种数量多、成本低。三级种数量多、成本低。 栽培种一般采用固体培养基，用聚乙烯塑料袋或玻璃栽培种一般采用固体培养基，用聚乙烯塑料袋或玻璃瓶作培养容器。通瓶作培养容器。通 常一瓶原种可繁殖常一瓶原种可繁殖30-50袋栽培种。袋栽培种。 食用菌制种技术101 1、菌种类型及制种程序、菌种类型

5、及制种程序 （2 2）制种程序）制种程序 菌种生产是菌种生产是指通过无菌操指通过无菌操作，大量培养作，大量培养繁殖菌种的过繁殖菌种的过程。程。 食用菌制种技术11切片机是将切片机是将木材切成规格木材切成规格木片的专用机木片的专用机械，是食用菌械，是食用菌培养基质粉碎培养基质粉碎处理的预前工处理的预前工序设备。序设备。 食用菌制种技术12 一一 、菌种的制作、菌种的制作 食用菌制种技术13搅拌机是将搅拌机是将培养料通过搅拌培养料通过搅拌使其分布充分均使其分布充分均匀的专业机械。匀的专业机械。其配套动力为其配套动力为3KW，每次拌，每次拌料量为料量为100KG湿湿重重 。食用菌制种技术14 一一

6、、菌种的制作、菌种的制作 食用菌制种技术15 一一 、菌种的制作、菌种的制作 食用菌制种技术16 高压灭菌锅是密闭耐压的金属灭菌容器。其工作原理是在驱尽锅内空气的前提下，通过加热把密闭锅内的水蒸气压力升高，从而使蒸汽温度相应提高到100以上。压力在98KPa时，蒸汽温度可达121 。常见的高压灭菌锅有手提式、立式与卧式，也有自制的高压灭菌锅。手提式主要用于一级种制作，立式和卧式主要用于二级种、三级种和栽培瓶、袋的制作。 食用菌制种技术17食用菌制种技术18食用菌制种技术19食用菌制种技术20食用菌制种技术21食用菌制种技术22食用菌制种技术23 超净工作台：超净工作台：是一种局部层流是一种局部

7、层流(平行或垂直流平行或垂直流)装置，它能在局部装置，它能在局部造成高洁净度的工作空间；使小造成高洁净度的工作空间；使小房间内的空气经预过滤器和高效房间内的空气经预过滤器和高效过滤器除尘、洁净后，以垂直或过滤器除尘、洁净后，以垂直或水平层流状态通过操作区，因此，水平层流状态通过操作区，因此，可使操作区保持既无尘又无菌的可使操作区保持既无尘又无菌的环境。环境。食用菌制种技术24 接种箱：接种箱：是用木材与玻璃是用木材与玻璃制成密闭箱。有单人式或双人制成密闭箱。有单人式或双人对接式。接种箱前后斜面为玻对接式。接种箱前后斜面为玻璃窗，便于操作时观察，可开璃窗，便于操作时观察，可开启，以便取放物品。玻

8、璃窗下启，以便取放物品。玻璃窗下的木板有一对椭圆形开孔，操的木板有一对椭圆形开孔，操作孔装有白布袖套，一端固定作孔装有白布袖套，一端固定在圆孔上，另一端套口用松紧在圆孔上，另一端套口用松紧带箍住操作者的手腕带箍住操作者的手腕，以防，以防杂菌进入。箱内可安装杂菌进入。箱内可安装20W日日光灯和光灯和30W紫外线灯管。紫外线灯管。 食用菌制种技术25 一一 、菌种的制作、菌种的制作 食用菌制种技术26食用菌制种技术27 培养室：培养室：是专门用于培养菌种的场所。各级菌种在接是专门用于培养菌种的场所。各级菌种在接种完毕之后，即移人培养室。冬季培养室应有专用加温设种完毕之后，即移人培养室。冬季培养室应

9、有专用加温设备。无论采用何种方法加温，都要注意培养室内空气的相备。无论采用何种方法加温，都要注意培养室内空气的相对湿度，一般维持在对湿度，一般维持在6570，否则菌瓶失水过多。菌，否则菌瓶失水过多。菌种培养架可用木制，也可用钢材或铝合金材料制成，宽度种培养架可用木制，也可用钢材或铝合金材料制成，宽度11.5m，有，有4-6层，层间距层，层间距0.4- 1m. 培养室内还需温、湿培养室内还需温、湿度计，用于培养室温度、湿度的测量。度计，用于培养室温度、湿度的测量。 食用菌制种技术28 一一 、菌种的制作、菌种的制作 多数菌种要在低温、多数菌种要在低温、干燥、隔绝空气等环境中干燥、隔绝空气等环境中

10、保藏。常用的主要设备是保藏。常用的主要设备是电冰箱、干燥器、真空抽电冰箱、干燥器、真空抽气机等。高温型菌类的菌气机等。高温型菌类的菌种需继代保藏，由于要越种需继代保藏，由于要越过寒冷的冬季，常用电热过寒冷的冬季，常用电热恒温箱恒温箱 .食用菌制种技术29琼脂、葡萄糖、蔗糖、琼脂、葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、麦芽汁、酵蛋白胨、麦芽汁、酵母膏和维生素母膏和维生素B1B1等。等。 石膏粉、碳酸钙、过石膏粉、碳酸钙、过磷酸钙、蔗糖、红糖、磷酸钙、蔗糖、红糖、尿素、硫酸铵等。尿素、硫酸铵等。食用菌制种技术30食用菌制种技术31食用菌制种技术32食用菌制种技术33食用菌制

11、种技术34食用菌制种技术35食用菌制种技术36 一一 、菌种的制作、菌种的制作 4 4、菌种培养基的制备、菌种培养基的制备 （1 1）培养基）培养基( (料料) )的配制原则的配制原则 注注意意各各种种营营养养成成分分的的比比例例 培养基培养基( (料料) )中各种营养物质的比例是影响菌中各种营养物质的比例是影响菌丝生长的重要因素。营养物质比例适当，菌丝生丝生长的重要因素。营养物质比例适当，菌丝生长发育就好，否则就差。长发育就好，否则就差。 应根据不同培养对象的需要，配以适当比应根据不同培养对象的需要，配以适当比例。菌丝生长要求培养基例。菌丝生长要求培养基( (料料) )有一定的碳氮比，有一定

12、的碳氮比，一般碳氮比一般碳氮比(C(C：N)N)以以20:120:1为好。为好。 如培养基如培养基( (料料) )中碳源供应不足时，容易引中碳源供应不足时，容易引起菌丝的过早衰老和自溶，如氮源过多或过少起菌丝的过早衰老和自溶，如氮源过多或过少时，会引起菌丝的过于旺盛生长或生长缓慢，时，会引起菌丝的过于旺盛生长或生长缓慢，对菌丝生长造成不良影响。对菌丝生长造成不良影响。 食用菌制种技术37食用菌制种技术38选选择择经经济济实实用用的的原原料料 制做培养基制做培养基( (料料) )的原料，有些价格比较贵、的原料，有些价格比较贵、成本高，可用一些价格低廉的代用原料。成本高，可用一些价格低廉的代用原料

13、。 可用一些农副产品代替化学药品，常用的可用一些农副产品代替化学药品，常用的有马铃薯、麦芽，玉米面、麦麸等。有马铃薯、麦芽，玉米面、麦麸等。 在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用量较大，选择合适的代用原料，其经济意义量较大，选择合适的代用原料，其经济意义就更大。就更大。 过去多用麦粒和玉米，现在可用锯木屑过去多用麦粒和玉米，现在可用锯木屑和棉籽壳等来代替。但是选用代用料时，必和棉籽壳等来代替。但是选用代用料时，必须就地取材，来源丰富、价格便宜的原则，须就地取材，来源丰富、价格便宜的原则，而且原料没有毒性。而且原料没有毒性。 食用菌制种技术394 4、菌种培养

14、基的制备、菌种培养基的制备 （2 2）培养基的类型培养基的类型 培养基的类型培养基的类型 营养来源营养来源 物理状态物理状态 表面形式表面形式 用途用途 天然培养基天然培养基 合成培养基合成培养基半合成培养基半合成培养基固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基 半固体培养半固体培养基基 斜面培养基斜面培养基 平面培养基平面培养基 高层培养基高层培养基 母种培养基母种培养基 原种培养基原种培养基 食用菌制种技术40 天然的有机物质配制天然的有机物质配制而成。如农副产品麦麸，而成。如农副产品麦麸，米糠，豆饼及许多农作物米糠，豆饼及许多农作物秸秆等，也有动植物浸出秸秆等，也有动植物浸出液，如牛肉膏、

15、麦芽汁、液，如牛肉膏、麦芽汁、豆芽汁及马铃薯汁等。豆芽汁及马铃薯汁等。 培养基的优点培养基的优点是营养是营养丰富、经济方便，但它的丰富、经济方便，但它的化学成分不能定量，每批化学成分不能定量，每批成分也不稳定，不宜用作成分也不稳定，不宜用作精确的实验。常用的天然精确的实验。常用的天然培养基有马铃薯培养基、培养基有马铃薯培养基、麦芽汁培养基等。麦芽汁培养基等。食用菌制种技术41 常用的合成常用的合成培养基有（高氏培养基有（高氏一号培养基）、一号培养基）、察氏培养基等察氏培养基等 。食用菌制种技术42 在天然培养基中适当在天然培养基中适当添加一些无机盐类，或添加一些无机盐类，或者在合成培养基中添加

16、者在合成培养基中添加少数天然有机物质配制少数天然有机物质配制而成。而成。 食用菌制种技术43 培养基培养基呈液体状态。呈液体状态。它含有食用它含有食用菌菌丝生长菌菌丝生长发育所需要发育所需要的各种营养的各种营养物质。物质。 食用菌孢子或菌丝在食用菌孢子或菌丝在这种这种培养基培养基中能够更好中能够更好地接触和吸收养料，因而地接触和吸收养料，因而菌丝体生长迅速而粗壮，菌丝体生长迅速而粗壮，同时这种液体菌种便于接同时这种液体菌种便于接种工作的机械化、自动化，种工作的机械化、自动化，有利于提高生产效率。有利于提高生产效率。 缺点缺点是要发酵设是要发酵设备，成本较高，也备，成本较高，也较复杂。液体培养较

17、复杂。液体培养基常用来观察菌种基常用来观察菌种的培养特征以及检的培养特征以及检查菌种的污染情况。查菌种的污染情况。 食用菌制种技术44 在液体培在液体培养基中加入凝养基中加入凝固剂即成为固固剂即成为固体培养基。常体培养基。常用的凝固剂是用的凝固剂是琼脂。琼脂。 根据季节和用途的不根据季节和用途的不同，凝固剂的添加量一同，凝固剂的添加量一般在般在1 18 82 2之间。之间。固体培养基可制成试管固体培养基可制成试管斜面，也可制成平皿平斜面，也可制成平皿平面（平板），试管斜面面（平板），试管斜面用来培养和保存菌种，用来培养和保存菌种，平皿平面可用来分离和平皿平面可用来分离和纯化菌种。纯化菌种。 除

18、了加凝固剂的除了加凝固剂的固体培养基外，天然固体培养基外，天然的固体基质做成的培的固体基质做成的培养基也称固体培养基。养基也称固体培养基。在菌种制作中，用麦在菌种制作中，用麦粒、玉米粒、木屑、粒、玉米粒、木屑、棉籽壳、甘蔗渣等农棉籽壳、甘蔗渣等农副产品制成的培养基副产品制成的培养基也属固体培养基。也属固体培养基。 食用菌制种技术45食用菌制种技术46食用菌制种技术47 也称一级培养也称一级培养基。它是分离母种基。它是分离母种或试管种扩大繁殖或试管种扩大繁殖用的培养基。因母用的培养基。因母种培养基装在试管种培养基装在试管内，并摆成斜面，内，并摆成斜面，因此也叫斜面培养因此也叫斜面培养基基。 也称

19、二级培养也称二级培养基通常装在罐头基通常装在罐头瓶或者瓶或者750750毫升容积毫升容积的菌种瓶内，也可的菌种瓶内，也可装在装在10001000毫升容积毫升容积的白色聚丙烯塑料的白色聚丙烯塑料瓶内瓶内。 也称三级培养基，也称三级培养基，它是供食用菌栽培用的它是供食用菌栽培用的菌种培养基。通常装在菌种培养基。通常装在罐头瓶或罐头瓶或750750毫升容积的毫升容积的菌种瓶内，也可装在菌种瓶内，也可装在17X 17X 3333厘米或厘米或l7X28l7X28厘米大小厘米大小的聚丙烯塑料袋内。的聚丙烯塑料袋内。 食用菌制种技术48食用菌制种技术49 马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基

20、(PDA(PDA培养基培养基) ) 马铃薯马铃薯( (去皮去皮)200)200克，葡萄糖克，葡萄糖2020克，琼脂克，琼脂18182020克，水克，水10001000毫升。毫升。 马铃薯、蔗糖、琼脂培养基马铃薯、蔗糖、琼脂培养基(PSA(PSA培养基培养基) ) 马铃薯马铃薯( (去皮去皮)200)200克，蔗糖克，蔗糖2020克，琼脂克，琼脂18201820克，水克，水10001000毫升。毫升。 蛋白胨、葡萄糖、琼脂培养基蛋白胨、葡萄糖、琼脂培养基 蛋白胨蛋白胨2 2克，葡萄糖克，葡萄糖2020克，磷克，磷酸氢二钾酸氢二钾1 1克，磷酸二氢钾克，磷酸二氢钾0 05 5克，维生素克，维生素B

21、10B100505毫克，硫酸镁毫克，硫酸镁0 05 5克，琼脂克，琼脂18-2018-20克，水克，水10001000毫升。毫升。 食用菌制种技术50 (2) (2)母种（一级种）培养基的配制方法母种（一级种）培养基的配制方法工艺流程工艺流程计算计算 配方各配方各物用量物用量按比例称量各按比例称量各物质物质 配制配制 调调pH 分装试管分装试管 塞棉塞塞棉塞 灭菌及摆斜面灭菌及摆斜面 无菌检查无菌检查 食用菌制种技术51食用菌制种技术52 首先要选择合适的浸煮容器，一般选用铝锅、首先要选择合适的浸煮容器，一般选用铝锅、搪瓷缸或玻璃烧杯等，而不能用铜，铁器皿，以搪瓷缸或玻璃烧杯等，而不能用铜，铁

22、器皿，以免铜锈或铁锈混进培养基中。免铜锈或铁锈混进培养基中。 计算计算 先选好培养基配方，按照培养基需先选好培养基配方，按照培养基需要的数量计算各种成分的用量，然后称量。要的数量计算各种成分的用量，然后称量。 食用菌制种技术53 称量称量 用架盘天平称取培养基各种成分的用量，对用架盘天平称取培养基各种成分的用量，对一些不易称量的成分，需采用特殊方式称量，如牛肉膏比一些不易称量的成分，需采用特殊方式称量，如牛肉膏比较粘稠，可先称好一根玻棒和烧杯，再用玻棒取牛肉膏放较粘稠，可先称好一根玻棒和烧杯，再用玻棒取牛肉膏放在烧杯中一起称。微量元素与生长因子等，需要量很少，在烧杯中一起称。微量元素与生长因子

23、等，需要量很少，难以称准，可先配成较浓的原液，再从中取出需要的量。难以称准，可先配成较浓的原液，再从中取出需要的量。 为避免发生沉淀，加入的顺序一般是先加缓为避免发生沉淀，加入的顺序一般是先加缓冲化合物，溶解后加入主要元素，然后是微量元素，再加冲化合物，溶解后加入主要元素，然后是微量元素，再加入维生素等。最好是每种成分溶解后，再加入第二种营养入维生素等。最好是每种成分溶解后，再加入第二种营养成分。若各种成分均不发生沉淀，也可以一起加入。成分。若各种成分均不发生沉淀，也可以一起加入。食用菌制种技术54 一一 、菌种的制作、菌种的制作 若用马铃薯、玉米粉、苹果、米粉、木屑等原料时，若用马铃薯、玉米

24、粉、苹果、米粉、木屑等原料时，应先制取这些原料的煮汁，然后再把煮汁与其它成分混应先制取这些原料的煮汁，然后再把煮汁与其它成分混合合 把选好的马铃薯洗净，去皮挖去芽眼，切成薄片把选好的马铃薯洗净，去皮挖去芽眼，切成薄片或或1 1厘米大小的方块，称取厘米大小的方块，称取200200克放在容器中，加水克放在容器中，加水10001000毫升，加热煮沸毫升，加热煮沸20203030分钟，至软而不烂的程度，分钟，至软而不烂的程度，用四层纱布过滤；取其滤液。用四层纱布过滤；取其滤液。 食用菌制种技术55 在滤液中加入琼脂，小火加热，用玻璃棒不断搅拌，在滤液中加入琼脂，小火加热，用玻璃棒不断搅拌，以防溢出或焦

25、底，至琼脂全部溶化，再加入葡萄糖和其以防溢出或焦底，至琼脂全部溶化，再加入葡萄糖和其它营养物质使其溶化，最后加水至它营养物质使其溶化，最后加水至10001000毫升即成。毫升即成。 调调pHpH 一般用一般用1010盐酸盐酸(HCl)(HCl)或或1010氢氧化钠氢氧化钠(NaOH)(NaOH)调调pHpH，用，用pHpH试纸进行测试。调时要小心，要几滴几试纸进行测试。调时要小心，要几滴几滴地加碱或加酸，调至所需要的滴地加碱或加酸，调至所需要的pHpH值。值。 食用菌制种技术56 分装分装 培养基配制好后，趁热倒入大的玻培养基配制好后，趁热倒入大的玻璃漏斗中，打开弹簧夹，按需要分装于试管或三璃

26、漏斗中，打开弹簧夹，按需要分装于试管或三角瓶内。装入试管的培养基量，以试管总长的角瓶内。装入试管的培养基量，以试管总长的1/41/41/51/5为好为好( (装入的培养基切勿沾附管口壁装入的培养基切勿沾附管口壁) )。装入三角瓶培养基量，一般不要超过瓶容量的装入三角瓶培养基量，一般不要超过瓶容量的1 13 3每装完一支试管或一个三角瓶随即关闭弹簧每装完一支试管或一个三角瓶随即关闭弹簧夹，并把试管放进小铁丝筐内。夹，并把试管放进小铁丝筐内。 食用菌制种技术57 塞棉塞塞棉塞 培养基分装到试管或三角瓶后，管口或瓶培养基分装到试管或三角瓶后，管口或瓶口要塞上棉塞。棉塞用普通棉花，口要塞上棉塞。棉塞用

27、普通棉花，不要用脱脂棉，因脱不要用脱脂棉，因脱脂棉易吸水变潮，导致杂菌生长。脂棉易吸水变潮，导致杂菌生长。棉塞的作用是过滤空棉塞的作用是过滤空气，避免杂菌污染培养基。气，避免杂菌污染培养基。 棉塞的制作是取适量棉花作成均匀片状，将一边向里棉塞的制作是取适量棉花作成均匀片状，将一边向里折叠再将对面的另一边向里折叠，然后从一毛边开始将折叠再将对面的另一边向里折叠，然后从一毛边开始将棉花卷紧。使之成为两边齐的一柱形，末端的棉絮自然地棉花卷紧。使之成为两边齐的一柱形，末端的棉絮自然地平贴在棉柱上。棉塞长度一般为平贴在棉柱上。棉塞长度一般为4 4、5CM5CM左右；最后将棉塞左右；最后将棉塞塞入试管内，

28、塞入管内长度约为棉塞总长度的塞入试管内，塞入管内长度约为棉塞总长度的2 23 3。 食用菌制种技术58食用菌制种技术59 棉塞塞入试管后要紧贴棉塞塞入试管后要紧贴管壁，不留缝隙，大小、松管壁，不留缝隙，大小、松紧均要合适，既便于通气，紧均要合适，既便于通气，又能防止杂菌侵入。检查松又能防止杂菌侵入。检查松紧的方法是，将棉塞提起，紧的方法是，将棉塞提起，试管跟着被提起而不滑下，试管跟着被提起而不滑下，表明棉塞不表明棉塞不 松，将棉塞拔松，将棉塞拔出，可听到有轻微的声音但出，可听到有轻微的声音但不明显，这表明棉塞不紧。不明显，这表明棉塞不紧。 食用菌制种技术60食用菌制种技术61食用菌制种技术62

29、食用菌制种技术63工艺流程工艺流程设计培养基质设计培养基质配方配方 按比例称量按比例称量各物质各物质 天然材料如棉籽天然材料如棉籽壳、木屑等主料壳、木屑等主料的预处理的预处理 混合混合调节含水调节含水量量 装瓶装袋装瓶装袋 灭菌灭菌冷却使用冷却使用 食用菌制种技术64食用菌制种技术65食用菌制种技术66食用菌制种技术67 除针叶树松、杉、柏和具芳香、异味和有毒的樟、楠木等树种外，除针叶树松、杉、柏和具芳香、异味和有毒的樟、楠木等树种外，一般阔叶树的木屑均可利用。木屑需晒干保存。陈木屑比新鲜木屑好。一般阔叶树的木屑均可利用。木屑需晒干保存。陈木屑比新鲜木屑好。松、杉木屑经陈放或加石灰堆制处理后可

30、与杂木屑搭配用，用量占总量松、杉木屑经陈放或加石灰堆制处理后可与杂木屑搭配用，用量占总量的的1 13 3为宜。麻栎树等鞣酸高的木屑对香菇生长有利，但对其他食用菌为宜。麻栎树等鞣酸高的木屑对香菇生长有利，但对其他食用菌菌丝生长有一定的抑制作用。使用时应加以选择。菌丝生长有一定的抑制作用。使用时应加以选择。 麸皮、米糠要求新鲜，凡久存、变质、结块的麸糠，不再采麸皮、米糠要求新鲜，凡久存、变质、结块的麸糠，不再采用；麸糠的用量一般不低于用；麸糠的用量一般不低于1515，不高于，不高于3030；天冷可多些，天热；天冷可多些，天热宜少些；平菇、凤尾菇可少加些，金针菇应稍多些。香菇培养基中宜少些；平菇、凤

31、尾菇可少加些，金针菇应稍多些。香菇培养基中加米糠更好，而木耳以麸皮为好。加米糠更好，而木耳以麸皮为好。 食用菌制种技术68 碳酸钙应采用轻质碳酸钙，它与石膏可通用，熟石膏与生石膏有碳酸钙应采用轻质碳酸钙，它与石膏可通用，熟石膏与生石膏有效成分相同。效成分相同。 白糖、饴糖、砂糖、甘薯糖等均可用，红糖更好。糖精不是糖，白糖、饴糖、砂糖、甘薯糖等均可用，红糖更好。糖精不是糖，不可代替。不可代替。 水应清洁无油污，每天首次使用的自来水，应先排放掉前面含铁水应清洁无油污，每天首次使用的自来水，应先排放掉前面含铁锈高的一段水，而后再用于拌料。锈高的一段水，而后再用于拌料。配方中各种成分必须正确称取，不可

32、随意增减。配方中各种成分必须正确称取，不可随意增减。 加水拌制，就意味着杂菌开始生长、繁殖。因此，拌加水拌制，就意味着杂菌开始生长、繁殖。因此，拌 料、分装至料、分装至灭菌时间越短越好，特别是夏季，时间拖长，易引起培养基酸败、变灭菌时间越短越好，特别是夏季，时间拖长，易引起培养基酸败、变质。质。 食用菌制种技术69配制方法配制方法 以棉籽壳、木屑为主的干培养料，应将其加水以棉籽壳、木屑为主的干培养料，应将其加水120120-130-130，充分拌和：使其充分吸进水，使混合培养料含水量在，充分拌和：使其充分吸进水，使混合培养料含水量在5555-65-65。其含水量可用手握法简单测定，抓一把培养料

33、。其含水量可用手握法简单测定，抓一把培养料在手掌心，用力握捏，手指缝间有水迹渗出，但不成滴。在手掌心，用力握捏，手指缝间有水迹渗出，但不成滴。 以小麦、玉米；稻谷为主料的，则应先将主料加水浸以小麦、玉米；稻谷为主料的，则应先将主料加水浸泡泡4-6h4-6h，然后加热煮沸，然后加热煮沸15152020分钟，麦粒、玉米不能煮分钟，麦粒、玉米不能煮得过软，以粒心尚有干白部分为度，然后捞出备用。对于得过软，以粒心尚有干白部分为度，然后捞出备用。对于辅料，则加少量水溶解后，与培养料混合即成。辅料，则加少量水溶解后，与培养料混合即成。 食用菌制种技术70 为便于观察和接种，为便于观察和接种，原种容器一般采

34、用透明原种容器一般采用透明的专用菌种瓶；瓶口内的专用菌种瓶；瓶口内径为径为323225MM25MM，瓶径高，瓶径高度为度为40MM40MM，容量为，容量为750ML750ML。也可采用也可采用500ML500ML罐头瓶；罐头瓶；但因其瓶径大，易造成但因其瓶径大，易造成污染和干燥，且瓶颈过污染和干燥，且瓶颈过短，棉塞塞不牢固，易短，棉塞塞不牢固，易脱落。脱落。食用菌制种技术71 一一 、菌种的制作、菌种的制作 装瓶灭菌装瓶灭菌 栽培种容器采用瓶子外，也可用聚丙烯塑料袋，其规栽培种容器采用瓶子外，也可用聚丙烯塑料袋，其规格长格长15CM15CM、宽、宽28CM28CM、厚度、厚度0.06CM0.0

35、6CM，过薄易破裂，感染杂菌。，过薄易破裂，感染杂菌。袋口套上塑料环，其高为袋口套上塑料环，其高为2-3CM2-3CM，直径，直径4CM4CM、采用塑料袋制、采用塑料袋制种可节省掏瓶人工，减少麻烦种可节省掏瓶人工，减少麻烦. . 除谷粒除谷粒( (玉米、麦粒等玉米、麦粒等) )料直接装至瓶肩处外，木屑、料直接装至瓶肩处外，木屑、粪草等料都要松紧适度，过紧则接种后透气不良，菌丝生粪草等料都要松紧适度，过紧则接种后透气不良，菌丝生长缓慢；过松则菌丝生长虽快，但稀疏无力。装料时要压长缓慢；过松则菌丝生长虽快，但稀疏无力。装料时要压实，装料量以袋子的实，装料量以袋子的2/32/3为宜，使上部留有一定空

36、间，有为宜，使上部留有一定空间，有利于菌丝生长。利于菌丝生长。 食用菌制种技术72食用菌制种技术73 物品上存在着的微生物，为培养出食用菌的纯菌体，必须对食用物品上存在着的微生物，为培养出食用菌的纯菌体，必须对食用菌栽培的各环节进行杀菌，这是生产中的一项基本技术。菌栽培的各环节进行杀菌，这是生产中的一项基本技术。 消毒消毒具有杀死致病微生物的作用或方法，称为消毒。就食用具有杀死致病微生物的作用或方法，称为消毒。就食用菌菌种生产而言，消毒是指用物理或化学方法杀灭或消除对食用菌菌菌种生产而言，消毒是指用物理或化学方法杀灭或消除对食用菌生长发育有害的微生物，通常只能消灭物体表面或环境中的一部分生长发

37、育有害的微生物，通常只能消灭物体表面或环境中的一部分微生物，但不能达到消灭所有微生物。微生物，但不能达到消灭所有微生物。 灭菌灭菌指彻底杀菌，用物理或化学等方法，杀死物体上的一切微指彻底杀菌，用物理或化学等方法，杀死物体上的一切微生物，以及它们的芽孢和孢子，使物体成为无菌状态。生物，以及它们的芽孢和孢子，使物体成为无菌状态。 防腐防腐 指防止或抑制微生物的生长繁殖，是一种抑菌作用，指防止或抑制微生物的生长繁殖，是一种抑菌作用，不能杀死微生物群体不能杀死微生物群体 。食用菌制种技术74食用菌制种技术75食用菌制种技术76 通过火焰高温进行的灭菌。通过火焰高温进行的灭菌。适用于耐热的接种工具如接种

38、适用于耐热的接种工具如接种环、接种针、接种铲、接种匙环、接种针、接种铲、接种匙等，以及试管口、玻璃瓶口的等，以及试管口、玻璃瓶口的灭菌等，通过酒精灯几次火焰灭菌等，通过酒精灯几次火焰灼烧，一切微生物和芽孢可全灼烧，一切微生物和芽孢可全部杀死。部杀死。 食用菌制种技术776 6、消毒与灭菌消毒与灭菌 食用菌制种技术78 通过加热的高温空气进行灭菌的通过加热的高温空气进行灭菌的方法。电热干燥箱是干热灭菌的常用方法。电热干燥箱是干热灭菌的常用仪器，它是通过电热丝进行加温，既仪器，它是通过电热丝进行加温，既可灭菌，也可用于器皿的烘干。适用可灭菌，也可用于器皿的烘干。适用于固体材料的灭菌如培养皿、三角瓶

39、、于固体材料的灭菌如培养皿、三角瓶、试管等，通常采用试管等，通常采用160160灭菌灭菌2h2h，待，待温度下降到温度下降到4545以下，方可取出灭菌以下，方可取出灭菌物品，否则玻璃物品会因温度骤然下物品，否则玻璃物品会因温度骤然下降而破裂。降而破裂。 食用菌制种技术79食用菌制种技术80食用菌制种技术81食用菌制种技术82 在使用高压锅时，需注意要将锅内在使用高压锅时，需注意要将锅内的冷空气全部排尽。如果锅内留有冷空的冷空气全部排尽。如果锅内留有冷空气，当加热时，冷空气变热很快膨胀，气，当加热时，冷空气变热很快膨胀，使压力上升，造成灭菌锅内压力与温度使压力上升，造成灭菌锅内压力与温度不一致，

40、产生假性蒸汽压，即假上磅现不一致，产生假性蒸汽压，即假上磅现象。锅内实际温度低于蒸汽压对应的相象。锅内实际温度低于蒸汽压对应的相应温度，致使灭菌不彻底而达不到灭菌应温度，致使灭菌不彻底而达不到灭菌目的。目的。 食用菌制种技术83 一一 、菌种的制作、菌种的制作 食用菌制种技术84食用菌制种技术85食用菌制种技术86 在高压灭菌过程中，其压在高压灭菌过程中，其压力、温度、时间对营养成分有力、温度、时间对营养成分有影响，可采用提高温度、压力影响，可采用提高温度、压力和缩短灭菌时间的办法减少对和缩短灭菌时间的办法减少对营养成分的破坏。虽然温度升营养成分的破坏。虽然温度升高了，破坏增加，但受热时间高了

41、，破坏增加，但受热时间缩短，则总的破坏量减少。缩短，则总的破坏量减少。 食用菌制种技术87 采用自然压力的蒸汽进行灭菌采用自然压力的蒸汽进行灭菌的方法。有蒸笼灭菌、流通蒸汽灭的方法。有蒸笼灭菌、流通蒸汽灭菌灶等。常见的是用钢筋水泥砌成菌灶等。常见的是用钢筋水泥砌成大型的流通蒸汽灭菌灶，一般流通大型的流通蒸汽灭菌灶，一般流通蒸汽温度为蒸汽温度为1OO1OO，杀菌时间为，杀菌时间为6-6-8H8H。其灭菌容量大，可充分杀死微。其灭菌容量大，可充分杀死微生物，有的一次可灭菌几千瓶菌种。生物，有的一次可灭菌几千瓶菌种。食用菌制种技术88 灭菌灶结构灭菌灶结构简单，成本低廉，简单，成本低廉，可自行建造，

42、使可自行建造，使用普遍，但是灭用普遍，但是灭菌时间长，储耗菌时间长，储耗大且常有灭菌不大且常有灭菌不彻底的现象。彻底的现象。 食用菌制种技术89 指间歇一定时间，连续消毒几次而灭指间歇一定时间，连续消毒几次而灭菌的方法，适合于不耐高温的培养基的灭菌的方法，适合于不耐高温的培养基的灭菌，此法是在常压下加热到菌，此法是在常压下加热到100100，保持，保持20-3020-30分钟，以杀死其中的营养体细胞，分钟，以杀死其中的营养体细胞，然后将培养基在常温下或保温箱中然后将培养基在常温下或保温箱中(28(2837)37)培养，使芽孢发芽长成营养体，再培养，使芽孢发芽长成营养体，再用同法杀死新长成的营养

43、体细胞，如此反用同法杀死新长成的营养体细胞，如此反复三次，即可杀死培养基中的全部芽孢和复三次，即可杀死培养基中的全部芽孢和营养体，达到灭菌的目的。营养体，达到灭菌的目的。食用菌制种技术90食用菌制种技术91 将物品在将物品在60-7060-70度的温度下经一度的温度下经一定时间消毒，杀死有害微生物的方定时间消毒，杀死有害微生物的方法。适合于不耐高温的培养基以及法。适合于不耐高温的培养基以及一些食品如牛奶、酒类、饮料的消一些食品如牛奶、酒类、饮料的消毒，既可杀死有害微生物，又不破毒，既可杀死有害微生物，又不破坏营养成分。如在蘑菇培养基的发坏营养成分。如在蘑菇培养基的发酵期间，通常采用酵期间，通常

44、采用60-6260-62度的巴氏度的巴氏消毒法，消毒消毒法，消毒4 47h7h，可杀死培养料，可杀死培养料中的病虫杂菌。中的病虫杂菌。 食用菌制种技术92 利用辐射所产生的能量进行杀菌的方利用辐射所产生的能量进行杀菌的方法，称为法，称为辐射灭菌辐射灭菌。它可分为电离辐射和。它可分为电离辐射和非电离辐射。非电离辐射。a a射线、射线、射线、射线、r r射线、射线、X X射射线等属电离辐射；紫外线等为非电离辐射。线等属电离辐射；紫外线等为非电离辐射。 食用菌制种技术93 在在200200300nm300nm范围内紫外范围内紫外线的杀菌作用最好。紫外线的线的杀菌作用最好。紫外线的杀菌作用是因为它可以

45、被蛋白杀菌作用是因为它可以被蛋白质质( (约约280nm)280nm)和核酸和核酸( (约约260nm)260nm)吸收，造成变性失活吸收，造成变性失活, ,引起致死。引起致死。紫外线的另一杀菌机制是因辐紫外线的另一杀菌机制是因辐射空气产生臭氧，臭氧遇水又射空气产生臭氧，臭氧遇水又化合成双氧水，这两种物质都化合成双氧水，这两种物质都能杀菌。能杀菌。 食用菌制种技术94 无菌室、接种箱、超净工作无菌室、接种箱、超净工作台内安装的紫外线灯管，一般照台内安装的紫外线灯管，一般照射射20-30min20-30min，可杀死空气中的，可杀死空气中的微生物。但紫外线穿透力很弱，微生物。但紫外线穿透力很弱，

46、一层普通玻璃或水均能滤去大量一层普通玻璃或水均能滤去大量的紫外线，它也不能穿过衣物、的紫外线，它也不能穿过衣物、纸张等大多数物体。因此，紫外纸张等大多数物体。因此，紫外线只适用于空气和物体表面的消线只适用于空气和物体表面的消毒。毒。 食用菌制种技术95食用菌制种技术96 将被照射物质的原子核周围的电子击出，使其变为将被照射物质的原子核周围的电子击出，使其变为阳离子，击出的电子可附着在其它原子上，使其变成阴阳离子，击出的电子可附着在其它原子上，使其变成阴离子，也可以再冲击其它原子，引起继发电离。在液体离子，也可以再冲击其它原子，引起继发电离。在液体中，射线使水电离成中，射线使水电离成H H+ +

47、和和OHOH一一 ，可直接作用于微生物细，可直接作用于微生物细胞本身而致死。胞本身而致死。 食用菌制种技术97 微生物浸在微生物浸在O O1 1-0-05 5硝酸银、升汞溶液中，几分钟硝酸银、升汞溶液中，几分钟就会死亡。食用菌组织分离及就会死亡。食用菌组织分离及菇木分离菌种时，常用菇木分离菌种时，常用0 01 1升汞溶液进行表面消毒。升汞溶液进行表面消毒。 食用菌制种技术98 常用于消毒的氧化剂有：常用于消毒的氧化剂有：1 1高锰酸钾、高锰酸钾、1 1过氧化氢、过氧化氢、0 02 2-0-05 5过氧乙酸、过氧乙酸、0 05 51 1漂白粉等。其漂白粉等。其杀菌机制是通过强烈的氧化杀菌机制是通

48、过强烈的氧化作用，破坏微生物的原生质作用，破坏微生物的原生质或酶蛋白质结构。或酶蛋白质结构。 食用菌制种技术99 甲醛是常用的杀菌还原剂。甲醛是常用的杀菌还原剂。市售的福尔马林含市售的福尔马林含3737一一4040的的甲醛溶液。甲醛溶液。5 5的甲醛溶液常用于的甲醛溶液常用于防腐。培养室、无菌室消毒常以防腐。培养室、无菌室消毒常以lOmLlOmLm m3 3福尔马林原液加福尔马林原液加5g5g高锰高锰酸钾氧化熏蒸。甲醛能与微生物酸钾氧化熏蒸。甲醛能与微生物细胞蛋白质的氨基结合，引起蛋细胞蛋白质的氨基结合，引起蛋白质变性，使原生质失去正常活白质变性，使原生质失去正常活动能力。动能力。 食用菌制种

49、技术100 喷雾消毒时甲醛溶液体喷雾消毒时甲醛溶液体积分数为积分数为5 5。甲醛还有防腐。甲醛还有防腐作用，以作用，以1 1：9 9稀释液可浸制稀释液可浸制食用菌标本。但甲醛有毒，食用菌标本。但甲醛有毒，对人的眼睛、呼吸道、皮肤对人的眼睛、呼吸道、皮肤等有强烈刺激，应注意防护。等有强烈刺激，应注意防护。 食用菌制种技术101 表面活性剂主要破坏菌体细表面活性剂主要破坏菌体细胞膜结构，造成胞内物质泄漏；胞膜结构，造成胞内物质泄漏；蛋白变性，菌体死亡。蛋白变性，菌体死亡。0 02525肥皂溶液是一种阴离子表面活性肥皂溶液是一种阴离子表面活性剂，它对链球菌作用比剂，它对链球菌作用比0 01 1升升汞

50、或汞或0 07 7来苏尔还要强。常用来苏尔还要强。常用的的0 02525新洁尔灭液用于皮肤新洁尔灭液用于皮肤消毒，它是人工合成的季胺盐阳消毒，它是人工合成的季胺盐阳离子表面活性剂。离子表面活性剂。 食用菌制种技术102 常用的苯酚又称石炭酸，常用的苯酚又称石炭酸，其其0 05 5可用于皮肤消毒，可用于皮肤消毒，2 25%5%可用于器皿消毒，可用于器皿消毒，5 5可可用于空气喷雾消毒。来苏尔是甲用于空气喷雾消毒。来苏尔是甲酚与肥皂的混合液，常用其酚与肥皂的混合液，常用其3 35%5%消毒皮肤、用具；接种箱消毒皮肤、用具；接种箱表面以及器皿。表面以及器皿。 食用菌制种技术103 醇类可使膜受伤，同

51、时醇类可使膜受伤，同时能使蛋白质变性：通常使用能使蛋白质变性：通常使用乙醇。无水乙醇与菌体接触乙醇。无水乙醇与菌体接触后使细胞迅速脱水、表面蛋后使细胞迅速脱水、表面蛋白凝固，在菌体表面形成保白凝固，在菌体表面形成保护膜，阻止乙醇分子进一步护膜，阻止乙醇分子进一步渗入，影响杀菌力。在实际渗入，影响杀菌力。在实际工作中常使用工作中常使用7575的乙醇，的乙醇，杀菌效果最好。杀菌效果最好。 食用菌制种技术104食用菌制种技术105食用菌制种技术106食用菌制种技术107 将试管中的将试管中的菌种移接至另菌种移接至另外的试管培养外的试管培养基上称为转管基上称为转管 。 将待接的将待接的斜面试管以及一斜

52、面试管以及一级种接种针等放级种接种针等放入已消毒的接种入已消毒的接种箱内。箱内。 食用菌制种技术108食用菌制种技术109食用菌制种技术110食用菌制种技术111 将已将已接种好的试接种好的试管放人恒温管放人恒温培养箱，在培养箱，在24242828下下培养，长满培养，长满试管即可使试管即可使用。用。 食用菌制种技术112食用菌制种技术113食用菌制种技术114食用菌制种技术115食用菌制种技术116 三级种培养料常用耐高温三级种培养料常用耐高温的聚丙烯塑料袋装；也可用瓶的聚丙烯塑料袋装；也可用瓶装。灭菌的接种培养料应移人装。灭菌的接种培养料应移人接种室接种。只需几粒玉米接种室接种。只需几粒玉米

53、( (或麦粒或麦粒) )原种，接人一袋栽培原种，接人一袋栽培种培养料的洞中或料面上。种培养料的洞中或料面上。一一瓶原种可接瓶原种可接30-5030-50瓶瓶( (袋袋) )栽培栽培种，种，已接种的袋已接种的袋( (瓶瓶) )放在适宜放在适宜温度下培养至菌丝长满瓶即可温度下培养至菌丝长满瓶即可用于生产。用于生产。 食用菌制种技术117v 目前食用菌生产中使用的菌种大多为固体目前食用菌生产中使用的菌种大多为固体菌种。如果将母种接入装有液体培养基的菌种。如果将母种接入装有液体培养基的特定容器并给与必要的生长条件，通过振特定容器并给与必要的生长条件，通过振荡搅拌等方式，使之迅速繁殖产生菌丝球，荡搅拌等方式，使之迅速繁殖产生菌丝球，则称为液体菌种。则称为液体菌种。v 其优点有五个方面其优点有五个方面食用菌制种技术118