2018浙江选考生物选修复习

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1、精选优质文档-倾情为你奉上1、限定选修内容（选修1、选修3）知识提纲2、拓展知识3、必修+选修易错知识点专心-专注-专业浙江省普通高校招生选考科目考试（生物学科）考试形式及试卷结构(一)考试形式与时间 生物考试采用纸笔测试方式包括必考题和加试题两部分。必考题的答题时间为60分钟，试卷分值为70分。加试题答题时间为30分钟，试卷分值为30分。(二)试卷结构1考查内容比重试题范围及比例必考(满分 70 分)加试(满分 30 分)必修 1305必修 2335555必修 3375选修 1选修 34552考试要求分布试题层次及比例必考(满分 70 分)加试(满分 30 分)了解505理解305555应用

2、2054553题型及分值分布 客观题(选择题)、主观题(填空题和简答题等)。试题题型及分值比例必考(满分 70 分)加试(满分 30 分)客观题705205主观题305805第一部分：知识梳理选修 1生物技术实践考纲标准：考试属性及要求章知识内容加试1大肠杆菌的培养和分离2分离以尿素为氮源的微生物3果汁中的果胶和果胶酶4-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测5果酒及果醋的制作6泡菜的腌制和亚硝酸的测定7植物的组织培养一、微生物的利用掌握 程度参 考本考试 标准中 的： 二、(二)3实验与 探究能力二、酶的应用三、生物技术在食品加工中的应用四、浅尝现代生物技术一、大肠杆菌1大肠杆菌的培养和分离细菌

3、是 原核 生物。与真核细胞相比，细菌 没有核膜包被的 的细胞核，其细胞壁由 肽聚 糖 组成。大肠杆菌是 革兰氏阴性、异养兼性厌氧 的肠道杆菌。大肠杆菌在基因工程技术中被 广泛的应用，它的 质粒 是最常用的运载体，它也是基因工程中常用的 受体细胞 。二、培养基配置1、微生物的生命活动需要 五大营养要素： 水、无机盐、碳源、氮源、生长因子 。有的化 合物既是碳源又是氮源，如 蛋白质 。 生长因子 是微生物生长不可缺少的微量有机物；（“细 菌喜荤，霉菌喜素”，细菌的培养基：蛋白胨、酵母提取物、一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；霉菌的培养基：一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可；生长环境：细菌中性

4、偏碱，霉菌中性 偏酸）固氮细菌的培养基中不需添加 氮 源，因为它可以利用空气中的氮气；硝化细菌的培养基中不需添加 碳 源，因为它可以利用空气中的二氧化碳合成有机物。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要适宜的 pH、温度以及特殊营养物质，以 满足微生物生长对的要求。2、培养基的种类及作用：标准培养基种类特点用途工业生产、扩大培养（如：大肠 杆菌的培养）运动、保藏菌种 分离、鉴定、计数 工业生产液体培养基不加凝固剂物理性质分半固体培养基固体培养基 天然培养基加凝固剂，如琼脂化学成分是天然物质将所需化学成分按需要和比例 配制而成 抑制不需要的微生物生长，促 进所需微生物生长 加入某种化学

5、物质或显色剂， 鉴别不同种类的微生物成分来源分合成培养基分类、鉴定选择培养基如尿素固体培养基用途分鉴定培养基我们一般用 LB 液体培养基 来扩大培养大肠杆菌，用 LB 固体培养基 来分离大肠杆菌。3、培养基配置步骤：1）称量：蛋白胨，酵母提取物，氯化钠，2）溶化3）调 pH：用 1mol/L NaOH 溶液调节 pH 至偏碱性4）灭菌：高压蒸汽灭菌5）倒平板4、倒过来放置的目的是 防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面，以免污染培养基 或不能分离出单菌落 。三、灭菌和消毒（重点内容）1无菌技术 ；2消毒方法3灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用 灼烧灭菌法 ；培养基、无菌水等使用 高

6、压蒸汽灭菌法 ，所用器械是高压蒸汽灭菌锅；对不能受潮的实验器具使用 干热灭菌法 。（1）、如果培养基中含有葡萄糖，为防止葡萄糖碳化，应降低温度在 500g/cm2，90以上灭菌 30 min；有些不能加热的化合物，遇热会分解，如尿素，只能用 G6 玻璃砂漏斗过滤（2）、玻璃砂漏斗使用方法：试用前也要用高压蒸汽灭菌，玻璃砂漏斗有 6 种，即 G1-G6，G6 孔 径最小，细菌不能滤过，在使用后需要用 1mol/L 的 HCl 浸泡，并抽滤去酸，再用蒸馏水洗至洗出 液至中性，干燥后保存。4注意事项：实验中用的棉花不能用脱脂棉，因脱脂棉易吸水，吸水后容易造成污染。灭菌 后，通常在 6080烘箱中除去

7、灭菌时的水分；物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排 气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是有利于锅内温度升高，随后关闭排气阀继续加热，加热结 束切断热源后，要使温度自然降低，气压务必降至零时打开锅盖，其目的是防止容器中的液体暴沸；在用任何器皿转接时，瓶塞和封口膜只能夹在手上，不许放在台面上，接种时要在酒精灯火焰旁 操作；培养基一定不能 沾在三角瓶口、试管管口和培养皿壁上，否则容易污染；接种时要胆大 心细，动作快捷，这是减少污染的关键；接种后，培养皿必须 倒放（盖在下方）在恒温培养箱中， 如正放则水蒸气在盖上凝成水滴，滴到接种后的培养基表面，水流扩散会使菌落扩散，就很难形成 单菌落了。第 3

8、 页 共 27 页四、细菌的分离1划线分离法：用接种环蘸菌液后在含有 固体培养基 的培养皿平板上划线，在划线过程中菌 液逐渐减少，细菌也逐渐减少。划线到最后，可使细菌间的距离加大。在培养 1020h 后，可由一 个细菌产生单 菌落，菌落不会重叠。如果再将每个菌落分别接种至含有固体培养基的试管斜面上， 在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个细菌产生的后代。其操作步骤是：将培养皿底部用拇指和无名指固定成倾斜状态，在火焰旁将培养皿稍微打开。在此同时，用环状接种针在火焰旁取少 许菌悬液，迅速送入培养皿内，在平板培养基的一边，作 第 1 次平行划线 35 条，转动培养皿约 70角，用烧过冷却的接种针，

9、通过第 1 次划线部分作第 2 次平行划线，然后再用同样方法，通过第二次平行划线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行 划线。划线时，接种针应与平板表面成 30角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘，也不要将培养基划破。划线完毕后，盖上皿盖，倒置于 恒温箱培养。取菌种前，灼烧接种环的目：消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目：消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的：防止细菌污染环境和操作者。2涂布分离法：先将培养的菌液稀释，通常稀释到 105 107 之间，然后取 0.1ml 不同稀释

10、度 的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用 玻璃刮刀 涂布在培养基平面上进行培养，在适当的 稀释度下，可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿有 20 个以内 的单菌落最为适合。划线分离法，方法简单；涂布分离法， 单菌落更易分开 ，但操作复杂些。细菌的两种分离法各有优点,都可采用。五、微生物的计数方法（不做要求，可作为拓展知识了解） 显微镜直接计数血细胞计数板计数法实验 2：分离以尿素为氮源的微生物1.土壤环境中有一些细菌含有 脲酶 ，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。尿素分解的 化学方程式为：。灭菌2.流程：涂布接种3.配制固体培养基时要添加 适量琼脂糖 ，而不使用琼脂，是因为琼脂中含有 一

11、定量的氮 元 素，这样可以排除琼脂中氮元素对实验结果的干扰。4.培养基的灭菌，压力应该控制在 500g/cm2，温度在 90 以上。而尿素溶液需用 G6 玻璃砂 漏斗 过滤，后再加入已经灭菌冷却的培养基中。.5.本实验需设置对照，即以 全营养 LB 固体培养基 为对照组；以 尿素 唯一氮源、其它营 养条件与对照组相同的 尿素固体培养基 为实验组。6.本实验尿素培养基中还加入了 酚红 作指示剂，因为尿素被尿酶分解后产生的氨与该指示剂 显 红 色。可根据细菌菌落周围 着色环带的大小 判断细菌分解尿素能力的大小。7.本实验用 涂布分离法 分离细菌。取0.1ml 菌液滴到平板上，要用 70%酒精处理过

12、的 且 经灼烧并冷却的玻璃刮刀 进行接种。（系列梯度稀释法）8.实验结果：实验组的菌落数目 小于 对照组的菌落数目。计数时为防止误差，每个浓度的水样 至少要做 3 个培养皿，求平均值。实验 4：果汁中的果胶和果胶酶1果胶是植物 细胞壁 的主要成分，由 半乳糖醛酸 和 半乳糖醛酸甲酯 组成。2果胶不溶于 乙醇 ，这是鉴别果胶的一种简易方法；添加乙醇可以使果胶析出。3果胶可被 果胶酶 和果胶甲酯酶 水解；（注意：果胶酶不是一种，而是一类）果胶水解 的最终产物是 半乳糖醛酸 和 半乳糖醛酸甲酯 .4制作果汁时使用果胶酶 使果汁变澄清，提高出汁率。5一般用于生产果胶酶的微生物有 黑曲霉 和苹果青霉 。

13、6.实验操作及结果烧杯号处理试管处理加入酒精前现象分层十分明显，沉淀被浓缩 成一小团 分层十分明显，沉淀比 1 号 试管要大液体混浊，比 4 号稍有澄清 液体混浊加入的乙醇 4ml5g 水果匀浆+10ml 黑曲霉提 取液1加热果汁被稀释A2不加热果汁被稀释加热不加热产生絮状沉淀产生大量絮状沉淀5g 水果匀浆+10ml 水34B实验 6：-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1固定化酶就是 将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质由，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂 。固定化酶具有 储存、运输和可重复利用 等等多种优点。 固定化的方法有吸附法 、 共价偶联法 、 交联法 、 包埋法 等。2淀

14、粉酶是 一类 能水解淀粉的复合酶。3常用的淀粉指示剂是 KI-I2 溶液 ，淀粉的水解产物不同，显色也不同。完成下列填空：葡萄糖不显色麦芽糖不显色糊精红蓝4.实验操作流程a-淀粉酶固定化装柱洗涤检测是否洗净滴加淀粉溶液(控制流速)重复使用冷藏洗涤本实验固定淀粉酶的方法是 吸附法 ，载体是 石英砂 。第一次洗涤的目的是 除去未吸附的游离淀粉酶 （流速为 0.3ml/min ），如何证明洗涤固定化 酶柱的流出液中没有淀粉酶？ 取 2 支洁净的试管，编号为 A、B，各加入 1ml 可溶泌淀粉溶液。A 试管中加入 5 滴淀粉酶柱的流出液，B 试管中加入等量的蒸馏水，混合后 60水浴保温 5min。取出

15、 2 支试管，各滴加 2 滴 KII2 指示剂，观察溶液颜色变化。若 AB 试管溶液均为蓝色且颜色 相同，则流出液中同有淀粉酶。 滴加淀粉溶液时，控制流速为 0.3ml/min，为什么要如此缓慢？ 保证酶和底物反应所需时间 第二次洗涤的目的是洗去残留的淀粉。一、果酒的制作实验 8：果酒及果醋的制作1与酒制作有关的微生物是 酵母菌 ，菌种的不同，所产生的酒的风味也不同。2酵母菌在 厌氧 条件下，进行酒精发酵，其为反应方程式 C6H12O62CO2+2C2H5OH， 当培养液中酒精浓度超过 16% 时，酵母菌就会死亡。实验流程：上 清 液即 为 葡 萄酒取 滤 液静置挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵过滤（

16、补充内容：清洗葡萄时，应先清洗后去残枝；在不加酵母菌的情况下，不能多次清洗，防止 菌种流失）3本实验葡萄的消毒用 高锰酸钾 溶液。葡萄皮上本来已经有野生酵母存在，但为 了加快发酵速度，还要另外添加干酵母。4酒精发酵装置中使用了液封的弯曲玻璃管，其作用有：隔绝空气，保持无氧环 境，避免杂菌进入使产生的二氧化碳气体排出容器，保持压强平衡。5发酵瓶中的溶液量不能超过容积的 2/3 。装得太满则发酵过程中溶液易溢出。 发酵温度应在 25-30 为宜。当装置中 停止出现气泡 ，则发酵停止。6用纯葡萄制作的葡萄酒不含糖，酒精含量也低。若要制作酒精含量和糖含量都较 高的果酒，则发酵液中应该加入一定的 蔗糖

17、。发酵开始时，酵母菌进行 需氧 呼吸，由于其 细胞呼吸底物不是葡萄糖，消耗的氧气多，产生的二氧化碳少，发酵瓶会出现负压。 二、果醋的制作1与醋制作有关的微生物是 醋化醋杆菌 ，菌种的不同，所产生的醋 的风味也不同。2醋杆菌只有在 有氧 条件下，才能将 乙醇 氧化为醋酸。用醋杆 菌发酵，培养液中醋酸含量可以达到 13% 。醋酸发酵的反应式： C2H5OH+O2CH3COOH+H2O 3.流程连接发酵装置加入醋化醋杆菌发酵并检测 pH 值调节活塞 控制流量测定 pH,监控发酵情况4因为是 需氧发酵 ，因此在发酵过程中，必须不断向装置中的 乙 瓶通入无菌空气，通气的玻璃管塞上脱脂棉，可以 过滤空气。

18、5发酵过程中，甲瓶流入乙瓶的液体流量应当 等于 乙瓶流入丙瓶的液体流量，流速大约是 每 5min 1 滴 。随着发酵的进行，流出液的 PH 值会 下降 ，当流出液的PH 值 不再减少 时或甲瓶中的液体全部流入乙瓶中，停止实验。实验 10：泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定一、泡菜的腌制1泡菜腌制过程中起作用的微生物主要是 乳酸菌 和 假丝酵母菌 。发酵的产物有 有机酸 和 醇类 等物质，但也含有一定量的对人体有害的致癌物质 亚硝酸盐 。2制作泡菜需要 无氧 环境，市场上有专用于制作泡菜的容器，它的口有一凹槽，对凹槽加 水后再加盖，可造成无氧环境。3.流程各种菜洗净、切块泡菜坛洗净消毒将各种菜及调料装坛

19、密封1 周后可食用4.装坛时，往往加入一些白酒，目的是 消毒 调节风味。5.要缩短发酵时间，可采用 将要腌制的蔬菜用开水浸 1min 加入已经腌制过的泡菜汁 等措施。6.有的人家里的泡菜坛长时间不管理，会在泡菜水上出现一层白膜，这是因为坛沿水槽的水 干了，氧气进入泡菜坛，假丝酵母大量繁殖形成的菌膜。二、亚硝酸盐的定量测定1亚硝酸盐与 对氨基苯磺酸 发生重氮化反应，这一产物再与 N-1萘基乙二胺 偶联形 成 紫红色产物。可用 光电比色法 定量 2.流程：样品处理测定样品的光密度值分别测量不同体积标准溶液的光密度值，绘制标准曲线根据曲线所得数据，计算每公斤样品中亚硝酸盐的含量。 3.样品或标准溶液

20、的实际光密度值=测量值的平均值 空白 测量值标准曲线的横坐标为 亚硝酸盐质量 ，纵坐标为 光密度值（OD 值）。4.计算公式： 其中， X1 = 泡菜样品中亚硝酸盐含量，单位 mg/kg V2 =测定样品液体积 (10mL)V1 =样品处理液总体积 (500mL)m2 = 通过标准曲线得到的亚硝酸盐的质量，单位 ug/m1 = 样品质量(25g)实验 11：植物的组织培养1植物组织培养过程：离体器官、组织或细胞脱分化再分化愈伤组织根、芽植物体2两种类型的植物组织培养比较：比较项目材料属性 生殖方式 理论依据影响因素菊花茎的组织培养体细胞 无性生殖月季的花药培养花药（生殖细胞） 有性生殖植物细胞

21、的全能性材料、营养、激素、pH、温度、光照、无菌条件等3本实验需要配制三种培养基，即： MS 培养基(主要成分 大量元素、微量元素和有机成分 )、发芽培养基、生根培养基。（1）MS 培养基为 液 体培养基。（2）发芽培养基就是在 MS 培养基的基础上添加了 萘乙酸（NAA） (用 0.1mol/LNaOH 溶液溶解)、苄基腺嘌呤（BA） (用0.1mol/LHCl 溶解)两类植物生长调节剂、蔗糖和琼脂等 物质，是 固 体培养基；（3）生根培养基则是在 MS 培养基的基础上添加了 萘乙酸（NAA） 一类植物生长调节剂、蔗 糖和琼脂等物质，也是 固 体培养基。4培养过程：制备 MS 培养基母液制

22、备 发 芽 培 养 基 和 生根培养基、灭菌生芽培养外植体消毒接种定植移栽、锻炼生根培养外植体消毒依次用到 70%乙醇、5%次氯酸钠溶液（2 次）、无菌水等试剂。先用 生芽 培养基培养出较多的丛状苗，然后将丛状苗分株，再移入 生根 培养基中， 使其 生根 。温度控制在 18-25 ，光照 不少于 14.5 h/d。（先发芽后生根）炼苗：生根后，将苗移至草炭土或蛭石中，在一定条件下进行锻炼。定植：待苗健壮后再移至土中培养。5本实验中用到的激素都是人工合成的，如类似生长素作用的 萘乙酸（NAA） ，类似 细胞分裂素作用的 苄基腺嘌呤（BA） 。人工合成的激素作用时间比天然的植物激素作用时间 长，是

23、因为 植物缺少分解人工合成激素的酶 。（不使用天然植物激素的原因是：天然植物激素 易分解）考纲标准：选修 3现代生物技术专题考试属性及要求加试章知识内容1工具酶的发现和基因工程的诞生2基因工程的原理和技术3基因工程的应用4活动：提出生活中的疑难问题，设计用基因工程技术解 决的方案5植物的克隆6动物的克隆7从受精卵谈起8胚胎工程9生态工程的主要类型10生态工程在农业中的应用11活动：庭院生态系统的经济效益分析a b aC一、基因工程b a a a a aa二、克隆技术三、胚胎工程五、生态工程第一章：基因工程1.工具酶的发现和基因工程的诞生（1）基因工程的概念：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染

24、色体脱氧核糖核酸等）移到另一 种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。（2）基因工程的核心是构建重组 DNA 分子，其变异原理是基因重组。（3）基因工程诞生的理论基础：DNA 是遗传物质的发现过程、DNA 双螺旋结构的确立、遗传信 息传递方式的认定。2.基因工程的基本工具技术基础：限制性核酸内切酶、DNA 连接酶和质粒载体的发现与应用，又为基因工程的创建提 供了技术上的保障。（1）限制性核酸内切酶：主要是从原核生物中分离纯化出来的。功能：能够识别和切割 DNA 分 子内一小段特殊核苷酸序列，因此具有专一性。如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是 GAATTC,能在 G

25、 和 A 之间切割 DNA，如下图所示。结果：断开脱氧核苷酸链上的磷酸二酯键，形成能碱基互补配对的粘性末端。（2）DNA 连接酶：将具有末端碱基互补的 2 个 DNA 片段连接在一起（连接磷酸二酯键），所形 成的 DNA 分子称为重组 DNA 分子。 因此，可以将外源基因和载体 DNA 连接在一起。（3）载体：质粒是能够自主复制的双链环状 DNA 分子，在细菌中以独立于拟核之外的方式存在， 最常用的是大肠杆菌的质粒。 其他载体有噬菌体、动物病毒和植物病毒。3.基因工程的基本操作步骤 第一步：获得目的基因：即获得我们所需要的基因，如人的胰岛素原基因。 获得目的基因的两种方法：目的基因的序列已知：

26、用化学方法合成目的基因或用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因；目的基因的序列未知：建立一个包括目的基因在内的基因文库，从基因 文库中获取。第二步：形成重组 DNA 分子（核心步骤）：通常是用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因 和载体 DNA（如质粒），就会在目的基因和载体 DNA 的两端形成相同的黏性末端，然后用 DNA连接酶将目的基因和载体 DNA 连接在一起，形成重组 DNA 分子。第三步：将重组 DNA 分子导入受体细胞：用适当的方法将形成的重组 DNA 分子转移到合适的受体 细胞中。常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。如用质粒作载体，宿主 细胞应选择大肠杆菌

27、，用氯化钙处理大肠杆菌，增加大肠杆菌细胞壁的通透性（感受态细胞），使 含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。 第四步：筛选含有目的基因的受体细胞：并不是所有细胞都接纳了重组 DNA 分子，因此需要筛选 含有目的基因的受体细胞。例如，质粒上有抗生素如四环素的抗性基因，所以含有这种重组质粒的 受体细胞就能够在有四环素的培养基中生长，而没有接纳重组质粒的细胞在这种培养基中不能生长。 这样就能筛选出含有重组 DNA 分子的受体细胞。 第五步：目的基因的表达：目的基因在宿主细胞中表达，能产生人们需要的功能物质。1.植物的克隆：第二章：克隆技术（1）植物克隆（1）理论基础：植物细胞的全能性（2）技术

28、基础：植物组织培养（3）主要技术：植物细胞培养；植物器官培养；原生质体培养2.细胞全能性（1）植物细胞全能性基本含义：指植物体的每个活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具有发育 成完整植株的潜能。（2）原因：因为每个植物细胞含有这种植物生长、发育的全套基因。（3）差异：不同植物或同种植物不同基因型个体的细胞全能性有差异。（全能性比较：受精卵早期胚胎细胞生殖细胞体细胞；植物细胞动物细胞）3.植物组织培养程序（1）概念：植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养 在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、生芽，最终形成完整的植 株。（2）过程：离体

29、的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织再分化 根芽 植物体愈伤组织：一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。 脱分化：已经高度分化的植物细胞，经过诱导重新恢复了分裂能力，产生愈伤组织的过程。再分化：脱分化产生的愈伤组织经培养，重新分化根或芽等器官的过程。（3）组织培养具体过程：配制含有适当营养物质和植物生长调节剂的半固体培养基（灭菌）； 从消毒的根、茎或叶上切取一些小组织块； 将组织块放在培养基上培养，获得愈伤组织； 以适当配比的营养物质和生长调节剂诱导愈伤组织，直到再生出新植株（生长素促根，细胞分 裂素促芽）。（4）培养基的成分：营养成分有水、无机盐、碳源（如蔗糖）、含 N 物质（

30、如氨基酸、维生 素）、琼脂（0.7%1%，起支持作用）；植物生长调节剂：细胞分裂素、生长素。4. 植物细胞培养（1）概念：指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。其目的是通过大规模的细胞培养以获得 人类所需的细胞次级代谢产物。（2）采用技术：通过悬浮培养使愈伤组织分散成单细胞，经适宜培养基中成分的诱导，可从单细胞依次到细胞团、球形胚、心形胚 和 胚状体，最后而形成新植株。（顺序：愈伤组织-单细胞-细胞团-球形胚-心形胚-胚状体）5. 器官培养（1）概念：有些植物可以在愈伤组织的基础上直接发育出花器官（2）如何实现器官发生和形态建成：主要通过平衡的植物激素配比进行调控。 诱导芽的分化：细胞分裂素

31、生长素；诱导根的分化：生长素（吲哚乙酸）细胞分裂素6.原生质体培养：（1）概念：用适当方法进行原生质体培养，获得新植株。（2）植物原生质体的获得方法：在 0.50.6mol/L 的甘露醇溶液环境（较高渗透压）下用纤维素酶和果胶酶（去除细胞壁）混 合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞，将细胞壁消化除去，获得球形的原生质体。7. 植物体细胞杂交技术 原生质体融合（体细胞杂交）是指将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并把杂种 细胞培育成新的植物体的方法。克服了远缘杂交不亲和的障碍。8.植物细胞工程 培养植物细胞（包括原生质体），借助基因工程方法，将外源遗传物质（DNA）导入受体细胞（

32、包 括原生质体）中或通过细胞融合、显微注射等将不同来源的遗传物质重新组合，再通过对这些转 基因细胞或重组细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株。（重新组合的 3 种方法：基因工程、 细胞融合、显微注射）9.植物组织培养的应用：试管苗的快速繁殖、无病毒植物的培育、制造人工种子、单倍体育种、细 胞产物的工厂化生产、转基因植物的培育等。第二章：克隆技术（2）动物克隆1.动物细胞、组织培养（1）动物细胞培养：将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或胰酶消化，使其分散成单个细胞；然后，在人工控制的培养条件下，使这些细胞得以生存，并保持生长、分裂乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡等生命活动。（2）动物组织

33、培养：动物组织再体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。动物组织培养过程 中可以伴随着分化。（3）培养方法：悬浮培养法2.动物细胞培养的过程 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散 成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶（卡氏瓶）中进行原代培养贴满瓶壁的细胞重新用胰 蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。（贴壁生长）原代培养：从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。 传代培养：将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。3.细胞系、细胞株（1）细胞系：指可连续传代的细胞。原代培养物在首次传代时就成为细胞系。连续细胞系：能连续

34、培养的细胞系。如异倍体核型细胞 细胞系有限细胞系：不能连续培养的细胞系。如二倍体细胞连续细胞系：遗传物质改变，不死性 有的连续细胞系是恶性细胞系，具有异体致瘤性；有的连续细胞系获得了不死性，但保留接触抑制现象，不致癌。（2）细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞 系。如：单抗细胞株有限细胞株：传代次数有限的细胞株 细胞株 连续细胞株：可连续多次传代的细胞株细胞株一般具有恒定的染色体组型、同工酶类型、病毒敏感性和生化特性等。遗传物质未改变。4.克隆培养法（1）概念：把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫 克隆培养法或细

35、胞克隆。 异质性细胞系 克隆培养 纯系（克隆）（2）特点：遗传性状均一、表现的性状相似，便于研究。（3）细胞克隆的最基本要求：保证所建成的克隆来源于单个细胞。（4）适合于克隆的细胞：对环境有较大适应范围和具有较强独立生存能力的细胞群体细胞 单细胞无限细胞系、转化或肿瘤细胞系原代细胞、有限细胞系（5）提高细胞克隆形成率的措施：选择适宜的培养基、 添加血清 （胎牛血清）、以滋养细胞支 持生长（经射线照射的小鼠成纤维细胞）、激素刺激（胰岛素等）、使用 CO2 培养箱，调节 PH 等。（6）细胞克隆的主要用途之一：从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系。 用于研究 细胞的遗传规律和生理特性。5.

36、细胞融合与细胞杂交（1）细胞融合：指用自然或人工方法,使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。（2）诱导融合的方法：生物法：灭活的仙台病毒诱导融合，是动物细胞融合所特有的化学法：聚乙二醇（PEG）诱导融合；物理法：电融合技术（效率很高）。（3）动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和 生物新品种培育的重要手段。（4）杂交瘤技术和单克隆抗体制备过程和方法用外界抗原刺激动物（如小鼠），使其发生免疫反应，使 B 淋巴细胞产生抗体；利用仙台病毒或聚乙二醇等作介导，使经免疫的动物的 B 淋巴细胞与可以无限传代的骨髓瘤细胞融合；经过筛选、克隆培养，获得来自单一细

37、胞的既能产生特异抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞克隆。获得的杂交瘤细胞经体外或体内培养，最终可提取单克隆抗体。 相关问题：单克隆抗体的制备运用动物细胞培养和动物细胞融合技术；两次筛选的目的：在细胞融 合后选出杂交瘤细胞；对杂交瘤细胞进行培养后选出能产生特定抗体的细胞群，继续培养。 杂交瘤细胞的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。杂交瘤技术制备单克隆抗体的优点：可以从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中获得单抗。特异 性强，灵敏度高。单克隆抗体的作用： 作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、 高效、简易、快速的优点。 用于治疗疾病和运载药物：主要用于

38、治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它 疾病。第三章胚胎工程一、从受精卵谈起: 1、受精作用：成熟的精卵融合成为受精卵的过程。受精大体包括精卵识别、精子附着于卵膜、精卵质膜融合等过 程。同种动物精子、卵细胞表面有特异性相互识别的蛋白，这是同种动物精卵才能结合的原因之一。 2、胚胎发育的过程受精卵 卵裂球（包括包括 2 细胞期、4 细胞期、8 细胞、16 细胞期、32 细胞期） 囊胚期 原 肠胚期 幼体（2）各发育时期的特点： 卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，细胞体积逐渐变小。当卵裂球含 28 个细胞 时，每个细胞都具有全能性，均可以发育成一个完整的个体。囊胚：中空的细胞

39、团，有囊胚腔。囊胚外表有一层扁平细胞，称滋养层，发育成胚胎的附属结构或胚外结构如胚盘。内细胞团的细胞为胚胎干细胞，是一种未分化的细胞，具有发育全能性， 将来发育成动物的各种组织和器官。原肠胚：有外、中、内三个胚层，具有原肠腔。原肠胚的内、中、外三个胚层逐渐分化形成 各种器官原基。二、胚胎工程 1、胚胎工程概念：泛指在动物胚胎发育过程中所进行的各种胚胎操作技术。胚胎工程的研究对象主 要限定于高等脊椎动物，特别是哺乳动物。 研究的重点内容有：体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等。 2、体外受精和胚胎体外培养：（1）体外受精概念：就是采集雌性动物的卵细胞和雄性动物的精子，使其

40、在试管中受精。（2）体外受精步骤： 卵母细胞的采集和培养： 主要方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后用穿刺针吸取卵泡液，取出卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。 精子的采集和获能：在体外受精前，要将成熟的精子放入培养液中培养，使精子达到获能状 态。 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在体外合适的环境下共同培养，完成受精过程。（3）胚胎的体外培养：精子与卵子在体外受精后，需经早期发育培养，才能完成植入或着床。通常 移植的最适宜时期是发育到 8 细胞以上的胚胎，如早期囊胚。 由于胚胎不同发育时期生理代谢的需求不同，进行胚胎体外培养时，必需配置含有一系列不同成分的培养

41、液，用以培养不同发育时期的胚胎。目前尚无从受精卵到新生儿的全体外培养技术。3、胚胎移植（1）概念：也称“借腹怀胎”将经济价值较高、遗传性状优良的母畜，经过激素处理，使其超数排卵后受精，然后将发育的 早期胚胎分别移植到同期发情的代孕母的子宫内，通过代孕母妊娠产仔的技术。 供体：提供胚胎的个体。良种雌性动物受体：接受胚胎的个体。一般品种的雌性动物。（2）胚胎移植的基本程序：对供、受体的选择和处理。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处 理。 配种或人工授精。 对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种后在一定的时间内从生殖器 中（输卵管和子宫角）取出早期胚胎。 对胚胎进行移植。将胚胎

42、移植到与供体同时发情排卵、但 未经配种的母畜（受体）的相应部位（输卵管和子宫角）。胚胎在受体的子宫中着床、并继续生长发育，最后产下供体的后代。（3）胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。4、胚胎分割(1)概念：指借助显微操作技术将早期胚胎（囊胚之前）切割成几等份（如 2 等份、4 等份等），再 移植到代孕母子宫，产生同卵多仔后代的技术。（2）胚胎分割基本过程： 将发育良好的胚胎移入含培养液的培养皿中； 在显微镜下用切割针或切割刀分割胚胎，或用 酶处理将卵裂球中的细胞分开； 分割的胚胎或细胞直接移植给受体，或在体外培养到囊胚阶段再 移植到受体内，着床发育产

43、仔。(3)意义：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。 5、胚胎干细胞（1）概念：（简称 ES 细胞），是早期胚胎（囊胚）的内细胞团的细胞。（2）特点:是一种未分化细胞，具有发育的全能性和二倍体核型，可分化为成年动物体内任何一种 组织细胞。（3）胚胎干细胞的培养： 培养关键：需要一种能促进胚胎干细胞的生长，但抑制其分化的培养体系。 培养过程：1）制备饲养层（滋养细胞）（胚胎成纤维细胞），然后将干细胞接种在饲养层上。2）培养液中培养胚胎到内细胞团突出饲养层；3）酶消化或机械剥离内细胞团；4）酶消化为单个细胞。5）在新的含饲养层的培养液中继续培养。（4）胚胎

44、干细胞核移植： 概念：将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由 受体完成克隆动物的技术。 过程：细胞核移植；胚胎体外培养；胚胎移植。（5）胚胎干细胞的主要用途是： 基因敲除，获得基因敲除动物 培育出人造组织器官，用于器官移植 改良创造动物新品种。第五章 生态工程一、生态工程的主要类型：1、生态工程概念： 是从系统思想出发，按照生态学、经济学和工程学的原理，运用现代科技成就、现代管理手段和专业技术组装起来的，以期获得较高的经济、社会、生态效益的现代生产工艺系统。2、生态工程的原理：整体、协调、循环、再生3、生态工程研究对象：社会经济自然复合生态系统。4、生态工程

45、主要类型：（1）物质循环利用的生态工程（技术核心：物质循环利用技术）（2）节水和废水处理与应用的生态工程（3）山区小流域综合治理与开发的生态工程（4）清洁及可再生能源系统组合利用的生态工程二、生态工程在农业中的应用：1、农业生态工程的概念： 以生态学原理为依据，将种植、养殖、水产、园艺与林业、副业、加工业等进行优化，将农业废弃 物的转化、再生及资源化等综合起来，将节能、应用清洁能源、生态建筑以及人口控制、生物多样 性保护等结合起来。2、农业生态工程的意义： 有效地促进了物质循环、能量流动、信息流动的畅通，人与环境和谐相处，经济、生态环境和社会 效益的同步发展，是实现农业现代化过程中保证农业可持

46、续发展的一种生产方式。 3、农业生产中解决积温不足和充分利用光照的措施：间种（发展生物防治技术）、套种、轮种4、应用实例：（1）庭院生态工程： 在庭院生态系统中，有生产者、消费者、分解者，也存在能量流动和物质循环（2）农业生态工程： 农业主要包括种植业和畜牧业。种植业将太阳能和无机物固定为有机物，并为畜牧业提供物质基础。达到物质的循环利用和能量的多级利用，获得较高的经济、社会、生态效益。5、我国农业生态工程的主要技术：（特别注意）（1）物质的良性循环技术（2）洁净可再生的新能源开发技术（3）种植业和畜牧业合理优化技术（4）此外设计高效可行的间种、套种和轮种制度；设计多种立体养殖技术；发展生物防

47、治技术等。拓展知识部分一、生物学中常见化学元素及作用1. Ca：人体缺之会患骨软化病，血液中 Ca2+含量低会引起抽搐，过高则会引起肌无力。血液中的 Ca2+具有促进血液凝固的作用，如果用柠檬酸钠或草酸钠除掉血液中的 Ca2+，血液就不会发生 凝固。属于植物中不能再得用元素，一旦缺乏，幼嫩的组织会受到伤害。2. Fe：血红蛋白的组成成分，缺乏会患缺铁性贫血。血红蛋白中的 Fe 是二价铁，三价铁是不能利 用的。属于植物中不能再得用元素，一旦缺乏，幼嫩的组织会受到伤害。3.Mg：叶绿体的组成元素。很多酶的激活剂。植物缺镁时老叶易出现叶脉失绿。4.B：促进花粉的萌发和花粉管的伸长，缺乏植物会出现花而

48、不实。5.I：甲状腺激素的成分，缺乏幼儿会患呆小症，成人会患地方性甲状腺肿。6.K：血钾含量过低时，会出现心肌的自动节律异常，并导致心律失常。7. N：N 是构成叶绿素、ATP、蛋白质和核酸的必需元素。N 在植物体内形成的化合物都是不稳定 的或易溶于水的，故 N 在植物体内可以自由移动，缺 N 时，幼叶可向老叶吸收 N 而导致老叶先 黄。N 是一种容易造成水域生态系统富营养化的一种化学元素，在水域生态系统中，过多的 N与 P 配合会造成富营养化，在淡水生态系统中的富营养化称为“水华”，在海洋生态系统中的富营养化称为“赤潮”。动物体内缺 N，实际就是缺少氨基酸，就会影响到动物体的生长发育。8.

49、P：P 是构成磷脂、核酸和 ATP 的必需元素。植物体内缺 P，会影响到 DNA 的复制和 RNA 的 转录，从而影响到植物的生长发育。P 还参与植物光合作用和呼吸作用中的能量传递过程，因 为 ATP 和 ADP 中都含有磷酸。P 也是容易造成水域生态系统富营养化的一种元素。植物缺 P 时老叶易出现茎叶暗绿或呈紫红色，生育期延迟。9.Zn：是某些酶的组成成分，也是酶的活化中心。如催化吲哚和丝氨酸合成色氨酸的酶中含有 Zn， 没有 Zn 就不能合成吲哚乙酸。所以缺 Zn 引起苹果、桃等植物的小叶症和丛叶症，叶子变小， 节间缩短。二、生物学中常用的试剂10. 斐林试剂： 成分：0.1g/ml Na

50、OH（甲液）和 0.05g/ml CuSO4（乙液）。用法：将斐林试剂甲液 和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存 在还原糖，则呈砖红色。11. 班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。12. 双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和 0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待测液中先加 入 2ml 甲液，摇匀，再向其中加入 34 滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。13. 苏丹：用法：取苏丹颗粒溶于 95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹染成红色）。14.

51、 二苯胺：用于鉴定 DNA。DNA 遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。15. 甲基绿：用于鉴定 DNA。DNA 遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。16. 50%的酒精溶液：在脂肪鉴定中，用苏丹染液染色，再用 50%的酒精溶液洗去浮色。17. 75%的酒精溶液：用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度， 酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水， 凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。75的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸 前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。18. 95%的酒精溶液：冷却的体积分数为 95%的酒精可用于凝集 DN

52、A。19. 15%的盐酸：和 95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。20. 龙胆紫溶液：(浓度为 0.01g/ml 或 0.02g/ml)用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色35 分钟。（也可以用醋酸洋红染色）21. 120%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率。（新鲜 的肝脏中含有过氧化氢酶）22. 13%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖 的作用实验。23. 碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。24. 丙酮：用于提取叶绿体中的色素。25. 层析液：（成分：20 份石油醚、2 份丙酮、

53、和 1 份苯混合而成，也可用 93 号汽油）可用于色素 的层析，即将色素在滤纸上分离开。26. 二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。27. 碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。28. 0.3g/mL 的蔗糖溶液：相当于 30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。29. 0.1g/mL 的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防凝血。30. 氯化钠溶液：可用于溶解 DNA。当氯化钠浓度为 2mol/L、 0.015mol/L 时 DNA 的溶解度最 高，在氯化钠浓度为 0.14 mol/L 时，DNA 溶解度最高。浓度

54、为 0.9%时可作为生理盐水。31. 胰蛋白酶：可用来分解蛋白质；可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散。32. 秋水仙素：人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制 正在分裂的细胞纺锤体的形成。33. 氯化钙：增加细菌细胞壁的通透性（用于基因工程的转化，使细胞处于感受态）三、生物学中常见的物理、化学、生物方法及用途34. 致癌因子：物理因子：电离辐射、X 射线、紫外线等。 化学因子：砷、苯、煤焦油 病毒因子：肿瘤病毒或致癌病毒，已发现 150 多种病毒致癌。35. 基因诱变：物理因素：射线、射线、紫外线、激光 化学因素：亚硝酸、硫酸二乙酯36. 细胞融合：物

55、理方法：离心、振动、电刺激 化学方法：PEG（聚乙二醇） 生物方法：灭活病毒（可用于动物细胞融合）四、生物学中常见英文缩写名称及作用37. ATP：三磷酸腺苷，新陈代谢所需能量的直接来源。ATP 的结构简式：APPP，其中：A 代表腺苷，P 代表磷酸基，代表高能磷酸键，代表普通化学键38. ADP ：二磷酸腺苷39. AMP ：一磷酸腺苷40. AIDS：获得性免疫缺陷综合症（艾滋病）41. DNA：脱氧核糖核酸，是主要的遗传物质。42. RNA：核糖核酸，分为 mRNA、tRNA 和 rRNA。43. cDNA：互补 DNA44. Clon：克隆45. ES（EK）：胚胎干细胞46. GPT

56、：谷丙转氨酶，能把谷氨酸上的氨基转移给丙酮酸，它在人的肝脏中含量最多，作为诊断 是否患肝炎的一项指标。47. HIV：人类免疫缺陷病毒。艾滋病是英语“AIDS”中文名称。48. HLA：人类白细胞抗原，器官移植的成败，主要取决于供者与受者的 HLA 是否一致或相近。49. HGP：人类基因组计划50. IAA：吲哚乙酸（生长素）51. CTK：细胞分裂素52. NADP+ ：辅酶53. NADPH（H）：还原型辅酶54. NAD+ ：辅酶55. NADH（H）：还原型辅酶56. PCR：聚合酶链式反应，是生物学家在实验室以少量样品制备大量 DNA 的生物技术，反应系统 中包括微量样品基因、DN

57、A 聚合酶、引物、4 种脱氧核苷酸等。57. PEG：聚乙二醇，诱导细胞融合的诱导剂。58. PEP：磷酸烯醇式丙酮酸，参与 C4 途径。59. SARS 病毒：（SARS 是“非典”学名的英文缩写）五、人体正常生理指标60. 血液 pH：7.357.4561. 血糖含量：80120mg/dl。高血糖：130mg/dl，肾糖阈：160180mg/dl，早期低血糖：5060mg/dl， 晚期低血糖：45mg/dl。62. 体温：37左右。直肠(36.937.9，平均 37.5)；口腔(36.737.7，平均 37.2)；腋窝 (36.037.4，平均 36.8)63. 总胆固醇：110230 m

58、g/dl 血清64. 胆固醇脂：90130 mg/dl 血清（占总胆固醇量的 60%80%）65. 甘油三脂：20110 mg/dl 血清六、高中生物常见化学反应方程式66. ATP 合成反应方程式：ATPADPPi能量67. 光合反应：总反应方程式：6CO212H2OC6H12O66H2O6O2 分步反应：光反应：2H2O4HO2ADPPi能量ATPNADP+2eH+ NADPH碳反应：CO2C5C32C3 C6H12O6C5 68. 呼吸反应：（1）有氧呼吸总反应方程式： C6H12O66H2O6O2 6CO212H2O能量 分步反应：C6H12O6 2 C3H4O34H2ATP（场所：细

59、胞质基质）2 C3H4O36H2O6CO220H2ATP（场所：线粒体基质）24H6 O212H2O34ATP（场所：线粒体内膜）（2）无氧呼吸反应方程式：（场所：细胞质基质）C6H12O6 2 C2H5OH2CO22ATPC6H12O62C3H6O32ATP69. 氨基酸缩合反应：n 氨基酸n 肽（n-1）H2O70. 固氮反应：N2eH+ATPNH3ADPPi七、人类几种遗传病及显隐性关系类别名称隐性白化病、先天性聋哑、苯丙酮尿症常染色体遗传显性多指、并指、短指、软骨发育不全单基因遗传病隐性红绿色盲、血友病、果蝇白眼、进行性肌营养不良性（X）染色体遗传显性抗维生素 D 佝偻病多基因遗传病唇裂、无脑儿、原发性高血压、青少年型糖尿病数目改变21-三体综合症（先天愚型）常染色体病染色体异常遗传病结构改变猫叫综合症性染色体病性腺发育不良八、高中生物学中涉及到的微生物71. 病毒类：无细胞结构，主要