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1、专专 题题 整整 合合常见的消毒灭菌方法归纳常见的消毒灭菌方法归纳 方法方法操作过程操作过程应用范围应用范围煮沸煮沸消毒法消毒法100 煮沸煮沸56 min日常生活中广泛使用日常生活中广泛使用巴氏巴氏消毒法消毒法在在7075 煮煮30 min或在或在80 煮煮15 min牛奶、啤酒、果酒和酱油等牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温消毒的液体不宜进行高温消毒的液体化学药物化学药物消毒法消毒法用体积分数为用体积分数为70%75%的乙醇、碘酒涂的乙醇、碘酒涂抹，来苏水喷洒等抹，来苏水喷洒等用于皮肤、伤口、动植物组用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器
2、皿等械、塑料或玻璃器皿等紫外线紫外线消毒法消毒法30 W紫外灯照射紫外灯照射30 min接种室空间消毒接种室空间消毒灼烧灼烧灭菌法灭菌法酒精灯火焰灼烧酒精灯火焰灼烧微生物接种工具如接种环、接微生物接种工具如接种环、接种针或其他金属用具等，接种种针或其他金属用具等，接种过程中试管口或锥形瓶口等过程中试管口或锥形瓶口等干热干热灭菌法灭菌法干热灭菌箱干热灭菌箱160170 加热加热12 h玻璃器皿玻璃器皿(如吸管、培养皿等如吸管、培养皿等)、金属用具等凡不适宜用其他方金属用具等凡不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品法灭菌而又能耐高温的物品高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌法法100 kPa、121 维维持持
3、1530 min培养基及多种器材、物品培养基及多种器材、物品尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定比较鉴定比较 项目项目内容内容尿素分解菌尿素分解菌纤维素分解菌纤维素分解菌条件条件尿素为唯一氮源尿素为唯一氮源纤维素为唯一碳源纤维素为唯一碳源鉴定方法鉴定方法及现象及现象培养基中加入酚红指培养基中加入酚红指示剂，变红色示剂，变红色在培养基上应用刚果红染色在培养基上应用刚果红染色法，出现透明圈法，出现透明圈鉴定原理鉴定原理细菌等微生物生成脲细菌等微生物生成脲酶，使尿素中肽键断酶，使尿素中肽键断裂产生裂产生NH3，使，使pH升升高，加入酚红变红色高，加入酚红变红色微生物产
4、生纤维素酶，将纤维微生物产生纤维素酶，将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素使纤维素刚果红复合物降解刚果红复合物降解而出现透明圈而出现透明圈步骤差异步骤差异土壤取样土壤取样制备制备培养基培养基样品梯样品梯度稀释度稀释涂布平涂布平板板培养观察培养观察土壤取样土壤取样制备培养基制备培养基选择选择培养培养梯度稀释梯度稀释涂布培养涂布培养刚果红染色刚果红染色挑取菌落挑取菌落进一进一步鉴定步鉴定自养微生物和异养微生物的营养比较自养微生物和异养微生物的营养比较 微生物微生物营养型营养型碳源碳源氮源氮源生长因子生长因子举例举例自养型自养型微生物微生物CO2、NaHCO3NH3、铵
5、盐硝、铵盐硝酸盐等酸盐等一般需要一般需要不不硝化细菌硝化细菌异养型异养型微生物微生物糖类、脂肪酸等糖类、脂肪酸等铵盐、硝酸铵盐、硝酸盐、蛋白质等盐、蛋白质等有些种类有些种类需要需要乳酸菌乳酸菌【典例典例1】 下表下表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是()。A.此培养基可用来培养自养型生物此培养基可用来培养自养型生物B此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C若除去若除去，此培养基可培养圆褐固氮菌，此培养基可培养圆褐固氮菌D培养基若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源和生长因子培养基若加入氨基酸，则它可
6、充当碳源、氮源和生长因子编号编号成分成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量含量/g0.44.00.50.5100 mL解析解析由题知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含由题知，该培养基成分中含有水、无机盐、氮源，但不含含碳有机物，可用来培养自养型微生物，选项含碳有机物，可用来培养自养型微生物，选项A、B均对；圆褐固均对；圆褐固氮菌同化类型为异养型，培养基中必须含含碳有机物，所以该培氮菌同化类型为异养型，培养基中必须含含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌，养基不能用来培养圆褐固氮菌，C错。错。答案答案C区分选择培养基与鉴别培养基区分选择培养基与鉴别培养
7、基 概念概念用途用途实例实例选择选择培养培养基基培养基中加入某种培养基中加入某种化学物质，以抑制化学物质，以抑制不需要的微生物的不需要的微生物的生长，促进所需要生长，促进所需要的微生物的生长的微生物的生长培养、分离培养、分离出特定的微出特定的微生物生物培养酵母菌和霉菌，可培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入菌，可在培养基中加入高浓度的食盐高浓度的食盐鉴别鉴别培养培养基基根据微生物的代谢根据微生物的代谢特点，在培养基中特点，在培养基中加入某种指示剂或加入某种指示剂或化学药品化学药品鉴别不同种鉴别不同种类的微生物类的微
8、生物用伊红用伊红美蓝培养基鉴别美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌有大肠杆菌(若有，菌落若有，菌落呈深紫色，并带有金属呈深紫色，并带有金属光泽光泽)【典例典例2】 (2011郑州质检郑州质检)请请回答下列与大肠杆菌有关的问回答下列与大肠杆菌有关的问题。题。(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_，它的同化作用类型是它的同化作用类型是_。(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。方。成分成分含量含量/g蛋白胨蛋白胨10.0乳糖乳糖5.0蔗糖蔗糖5.0K2HPO42.0显
9、色剂显色剂0.2琼脂琼脂12.0溶质溶解后，用蒸馏水定容到溶质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL根据用途划分该培养基属于根据用途划分该培养基属于_(选择、鉴别选择、鉴别)培养基。该培养基。该培养基中的碳源是培养基中的碳源是_。(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行养皿进行_(消毒、灭菌消毒、灭菌)，操作者的双手需要进行清洗和，操作者的双手需要进行清洗和_。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能外线能使蛋白质变性，还能_。通常，对获得的纯
10、。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。解析解析(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于分解者，其同化从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于分解者，其同化作用
11、类型是异养型。作用类型是异养型。(2)由于该培养基中含有显色剂，属于鉴别培由于该培养基中含有显色剂，属于鉴别培养基；该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖、蛋白胨。养基；该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖、蛋白胨。(3)注意灭菌和注意灭菌和消毒的区别，在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对消毒的区别，在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌，操作者的双手需要进行清洗和消毒；培养基和培养皿进行灭菌，操作者的双手需要进行清洗和消毒；紫外线不仅能使蛋白质变性，还能损伤紫外线不仅能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构；对获得的纯的结构；对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对
12、细菌进行初步的菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定鉴定(分类分类)；对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培；对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生；使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，产生；使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。以防止培养物的扩散。答案答案(1)分分解者解者异养型异养型(2)鉴别鉴别乳糖、蔗糖、蛋白胨乳糖、蔗糖、蛋白胨(3)灭菌灭菌消毒消毒损伤损伤DNA的结构的结构鉴定鉴定(分类
13、分类)将未接种的培养将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生生灭菌灭菌 【例例1】 (2011重庆理综重庆理综)下下列有关细菌培养的叙述，正确的列有关细菌培养的叙述，正确的是是()A在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动在半固体培养基中
14、接种细菌培养后可以观察其运动解析解析单个菌落中只含有一种细菌；青霉素能抑制细菌生单个菌落中只含有一种细菌；青霉素能抑制细菌生长，而对真菌没有影响；破伤风杆菌是厌氧型细菌，通入氧长，而对真菌没有影响；破伤风杆菌是厌氧型细菌，通入氧气会抑制其生长。气会抑制其生长。答案答案D【例例2】 (2011课标全国理综，课标全国理综，39)有有些细菌可分解原油，从些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀
15、释液接种于以在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_培养基。培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和和_。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、灼烧灭菌、_和
16、和_。无菌技术要求实验操作应在。无菌技术要求实验操作应在酒精灯酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。解析解析(1)要获得分解原油的细菌，只有在以原油为唯一碳源的培要获得分解原油的细菌，只有在以原油为唯一碳源的培养基中，这种细菌可以大量繁殖，而其他细菌不能生存。此种培养基中，这种细菌可以大量繁殖，而其他细菌不能生存。此种培养基属于选择培养基。养基属于选择培养基。(2)纯化菌种常用平板划线法和稀释涂布平板法。纯化菌种常用平板划线法和稀释涂布平板法。(3)在以原油为唯一碳源的培养基上，在菌落周围的原油被分解而在以原油为唯一碳源的培养基上，在菌落周围的
17、原油被分解而形成分解圈，分解圈越大，说明该菌株降解能力越强。形成分解圈，分解圈越大，说明该菌株降解能力越强。(4)实验室灭菌有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，实验操作实验室灭菌有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，实验操作要在酒精灯火焰附近的无菌区进行。要在酒精灯火焰附近的无菌区进行。答案答案(1)原油原油选择选择(2)平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法(3)强强(4)干热灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌火焰火焰考情分析：考情分析：微生物的利用在生物技术实践中占有比较重要的地位，微生物的利用在生物技术实践中占有比较重要的地位，包括微生物的分离和培养技术、特定微生物的数量的测定、培养包括微生物的分离和培养技术、特定微生物的数量的测定、培养基对微生物的选择作用和微生物的实验室培养等内容。基对微生物的选择作用和微生物的实验室培养等内容。近年课标试题中，对微生物的纯化培养操作与应用考查最为突出，近年课标试题中，对微生物的纯化培养操作与应用考查最为突出，共出现共出现8次，如次，如2011课标卷课标卷39题、题、2010山东理综山东理综34题等。题等。
高中生物 专题整合2配套课件 新人教版选修1
