医学实验室的生物安全防护

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1、 动 物 约 有 200种 传 染 病 、 80种 寄 生 虫 病 ，其 中 半 数 可 以 感 染 给 人 动 物 感 染 实 验 ， 有 病 原 体 随 尿 粪 、 唾 液排 出 ， 有 感 染 性 气 溶 胶 扩 散 的 危 险 剖 检 动 物 时 ， 有 接 触 病 原 体 的 危 险 ， 还可 能 被 动 物 咬 伤 或 注 射 器 、 手 术 刀 的 创伤 等 肿 瘤 病 毒 引 起 的 潜 在 致 癌 性 等 生 物 危 害 国 内 外 曾 多 次 发 生 因 饲 养 野 鼠 或 大 白 鼠 而发 生 肾 综 合 征 出 血 热 流 行 1999年 广 州 中 医 药 大 学 博

2、 士 后 张 某 从 事“ 九 五 ” 国 家 攻 关 课 题 “ 补 肾 法 治 疗 老 年性 痴 呆 ” 的 实 验 时 接 触 大 鼠 ， 3个 月 后 感 染流 行 性 出 血 热 ， 2003年 被 诊 断 为 肾 功 能 衰竭 ， 2006年 进 行 肾 移 植 手 术 2002年 ,湖 北 省 药 检 学 校 的 一 名 毕 业 生 在 某药 厂 从 事 动 物 实 验 工 作 ， 由 于 接 触 了 带 出血 热 病 毒 的 实 验 动 物 而 感 染 流 行 性 出 血 热不 治 死 亡 2001年 6月 ， 北 京 发 生 了 因 使 用 质 量 不 合 格 实 验动 物

3、和 动 物 实 验 不 规 范 致 使 鼠 源 性 人 兽 共 患 病流 行 性 出 血 热 感 染 ： 一 名 院 士 死 亡 和 700多 师 生紧 急 预 防 接 种 2006年 ， 东 北 三 省 由 于 个 体 户 养 殖 、 贩 运 不 合格 实 验 动 物 ， 导 致 几 十 名 教 学 科 研 人 员 感 染 流行 性 出 血 热 广 东 省 ， 1990年 和 1997年 分 别 出 现 因 使 用 不 合格 实 验 动 物 而 感 染 人 畜 共 患 病 的 严 重 生 物 安 全事 故 实 验 室 生 物 安 全 防 护 的 内 容 包 括 安 全 设 备 、 个 体 防

4、 护 装置 和 措 施 （ ） ； 实 验 室 的 特 殊 设 计 和 建 设 （ 分区 、 单 向 气 流 ） 要 求 （ ） ； 严 格 的 管 理 制 度 和标 准 化 的 操 作 程 序 及 规 程 （ ） 应 将 每 一 特 定 实 验 室 从 立 项 、 建 设 到 使 用 维 护 的 全 过 程中 有 关 生 物 安 全 防 护 综 合 措 施 的 内 容 编 入 各 实 验 室 的 生物 安 全 手 册 中 。 必 须 设 有 专 职 的 生 物 安 全 负 责 人根 据 不 同 的 微 生 物 和 防 护 要 求 分 为个 生 物 安 全 防 护 级 别 实 验 室 的 工

5、作 人 员 必 须 是 受 过 专 业 教 育 的 技 术 人 员 。在 独 立 工 作 前 须 在 中 高 级 实 验 技 术 人 员 指 导 下 进 行上 岗 培 训 ， 达 到 合 格 标 准 ， 方 可 开 始 工 作 实 验 室 的 工 作 人 员 必 须 被 告 知 实 验 室 工 作 的 潜 在 危险 并 接 受 实 验 室 安 全 教 育 ， 自 愿 从 事 实 验 室 工 作 实 验 室 的 工 作 人 员 必 须 实 验 室 的 所 有 制 度 、 规定 和 操 作 规 程 （ ） （ biosafety cabinet） 是 处理 危 险 性 微 生 物 时 所 用 的

6、箱 型 空 气 净化 安 全 装 置 I级 生 物 安 全 柜（ class I biosafety cabinet） 至 少 装 置 一 个 高 效 空 气 过 滤 器 对 排 气 进行 净 化 ， 外 部 空 气 由 操 作 窗吸进， 而 不可 能 由 操 作 窗 口逸出；100%由 密 接 排 气导 管 排 到 室 外 （ 类 似 于 通 风 厨 ） 工作状态时保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。 现 已 很 少 使 用 至 少 装 置 一 个 高 效 空 气 过 滤 器 对 排 气 进 行 净 化 ，工 作 空 间 为 经 高 效 过 滤 器 净 化 的 无 涡 流 的 单

7、 向 流空 气 。 工 作 时 柜 正 面 玻 璃 推 拉 窗 打 开 一 半 ， 上 部为 观 察 窗 ， 下 部 为 操 作 窗 口 。 外 部 空 气 由 操 作 窗吸 进 ， 而 不 可 能 由 操 作 窗 口 逸 出 工 作 状 态 下 遵 守 操 作 规 程 时 既 保 证 不 受侵 害 ， 又 保 证 及 不 受 污 染 级 生 物 安 全 柜（ class biosafety cabinet） 级 生 物 安 全 柜（ class biosafety cabinet） 全 封 闭 的 、 气 密 结 构 的 通 风 柜 通 过 与 柜 体 联 结 的 橡 胶 手 套 进 行 操

8、 作 ； 柜 内 保 持 至 少 的 负 压 (0.50wg)； 供 气 通 过 HEPA抽 入 内 ； 外 排 的 气 流 经 过 双 层 HEPA过 滤 或 经HEPA后 再 经 燃 烧 处 理 。 隔 离 器 I II III I级 有 是 否 否 否II级 有 是 是 是 否III级 有 是 是 是 是 实 验 室 防 护 服 面 部 防 护 手 套 呼 吸 防 护 生 物 安 全 实 验 室 不 同 于 其 它 普 通 实 验 室 ，是 从 事 对 人 可 能 产 生 危 害 的 生 物 实 验 场 所 尤 其 是 三 级 和 四 级 生 物 安 全 实 验 室 主 要 用于 对 人

9、 、 畜 有 高 度 传 染 性 的 烈 性 传 染 病 的研 究 （ 如 反 恐 ） 和 检 测 （ 如 ） 的 工作 生 物 安 全 实 验 室 的 分 类 分 级 实 验 室 分 类 一 般 生 物 安 全 防 护 实 验 室 (不 使 用 实 验 脊 椎 动 物 和 昆 虫 ) 实 验 脊 椎 动 物 生 物 安 全 防 护 实 验 室 （ A） 实 验 室 生 物 安 全 防 护 分 级 一 级 最 低 ， 四 级 最 高 大 肠 杆 菌 格 鲁 伯 耐 格 里 原 虫 感 染 性 犬 肝 炎 病 毒 枯 草 杆 菌 实 验 室 应 设 洗 手 池 （ 靠 近 出 口 处 ） 实 验

10、 室 围 护 结 构 内 表 面 应 易 于 清 洁 。 地 面 应 防滑 、 无 缝 隙 ， 不 得 铺 设 地 毯 实 验 室 中 的 家 具 应 牢 固 。 应 有 专 门 放 置 生 物 废弃 物 容 器 的 台 （ 架 ） 实 验 台 表 面 应 不 透 水 ， 耐 腐 蚀 、 耐 热 实 验 室 如 有 可 开 启 的 窗 户 ， 应 设 置 纱 窗 工 作 过 程 中 禁 止 非 工 作 人 员 进 入 实 验 室 。 接 触 微 生 物 或 含 有 微 生 物 的 物 品 后 ， 脱 掉 手套 后 和 离 开 实 验 室 前 要 洗 手 禁 止 在 工 作 区 饮 食 、 吸

11、烟 、 处 理 隐 形 眼 镜 、化 妆 及 存 储 食 物标 准 微 生 物 操 作 规 程 安全设施和个体防护 n 实 验 室 结 构 和 设 施 、 安 全 操 作 规 程 、 安 全 设 备 适 用 于 麻 疹 病 毒 沙 门 氏 菌 乙 型 肝 炎 病 毒 HIV 血 清 学 检 测 衣 原 体 志 贺 氏 菌二 级 生 物 安 全 防 护 实 验 室 消 毒 设 施 （ 高 压 灭 菌 锅 、 化 学 消 毒 装 置 等 ） 洗 眼 装 置 可 自 动 关 闭 的 门 锁 门 口 有 发 光 指 示 装 置 换 气 装 置 （ 3-4次 /小 时 ） 满 足 一 级 实 验 室 (

12、标 准 微 生 物 操 作 规 程 ) 各款 要 求 ， 在 此 基 础 上 特 别 注 意 ： 制 定 出 入 制 度 实 验 室 人 口 贴 上 生 物 危 险 标 志 制 定 实 验 室 特 定 的 生 物 安 全 操 作 规 则 每 年 一 次 最 新 培 训 制 度 工 作 人 员 应 接 受 必 要 的 和 检 测 (如 乙 型肝 炎 疫 苗 ， 卡 介 苗 等 )必 要 时 收 集 从 事 危 险 性 工 作 人 员 的 本 底 血 清严 格 执 行 实 验 室 工 作 人 员 年 度 采 血 检 测 HIV 抗体 和 备 案 制 度 。 每 半 年 进 行 一 次 HIV 抗

13、体 检 测 ，并 保 留 样 品对 从 事 艾 滋 病 实 验 室 工 作 的 人 员 ， 因 工 作 中 意 外事 故 造 成 HIV 职 业 暴 露 者 ， 所 在 单 位 应 负 责 解 决抗 病 毒 及 其 它 相 应 治 疗 的 医 疗 费 用 实 验 设 备 在 运 出 修 理 或 维 护 前 必 须 进 行消 毒 人 员 暴 露 于 感 染 性 物 质 时 ， 及 时 向 实 验室 负 责 人 汇 报 ， 并 记 录 事 故 经 过 和 处 理方 案 禁 止 将 无 关 动 物 带 入 实 验 室 处 理 以 下 致 病 微 生 物 时 应 在 生 物 安 全 柜 ( 级 ) 中

14、 进 行 ，包 括 : 高 浓 度 大 容 量 有 喷 溅 可 能 性 上 述 材 料 的 离 心 操 作 如 使 用 密 封 的 离 心 机 转 子 或 安 全 离心 杯 ， 且 只 在 生 物 安 全 柜 中 开 闭 ， 可 在 实 验 室 中 进 行 级 生 物 安 全 柜 必 须 每 年 进 行 一 次 年 度 现 场 检 测安全设施和个体防护 当 微 生 物 的 操 作 不 可 能 在 生 物 安 全 柜 内 进 行 时 ， 须 使用 面 部 保 护 装 置 应 有 相 应 的 SOP 在 实 验 室 中 应 穿 着 工 作 服 或 罩 衫 等 防 护 服 ， 不 得 穿 着外 出

15、。 用 过 的 工 作 服 应 先 在 实 验 室 中 消 毒 ， 然 后 统 一洗 涤 或 丢 弃 当 手 可 能 接 触 感 染 材 料 、 污 染 的 设 备 时 应 戴 手 套 。 如可 能 发 生 感 染 性 材 料 的 溢 出 或 溅 出 ， 宜 戴 两 副 手 套 。 下 列 操 作 必 须 在 P2实 验 室 或 全 排 式生 物 安 全 柜 中 进 行l、 含 漱 液 、 血 清 和 血 液 等 样 品 的 诊 断 检 测2、 溶 解 、 固 定 或 用 其 他 方 法 处 理 灭 活 的 病 毒 和(或 )无 传 染 性 的 病 毒 基 因 片 段 3、 常 规 的 细 菌

16、 和 毒 素 检 查4、 可 能 产 生 气 溶 胶 的 样 品 处 理5、 临 床 样 品 的 包 装 、 分 装6、 离 心 管 和 离 心 机 转 头 的 封 闭 和 开 启 n 包 含 微 生 物 举 例 结 核 分 枝 杆 菌 牛 分 枝 杆 菌 鼠 疫 杆 菌 炭 疽 杆 菌 Q热 病 原 体 HIV (血 清 学 检 测 除 外 ) 澳 大 利 亚 立 克 次 氏 体 加 拿 大 立 克 次 氏 体 下 列 操 作 必 须 在 P3实 验 室 中 进 行l、 用 细 胞 培 养 的 方 法 分 离 病 毒2、 收 集 或 浓 缩 病 毒 或 其 培 养 产 物 3、 用 活 病

17、毒 或 病 毒 的 全 基 因 接 种 动 物4、 咽 拭 子 样 品 的 诊 断 检 测 P3实 验 室 示 意 图 n 实 验 室 结 构 和 设 施 、 安 全 操 作 规 程 、 安 全 设 备 适 用 于对 人 体 具 有 ， 通 过 气 溶 胶 途 径 传 播 或 传播 途 径 不 明 ， 目 前 尚 无 有 效 的 疫 苗 或 治 疗 方 法 的 致 病微 生 物 及 其 毒 素n 与 上 述 情 况 类 似 的 ， 也 必 须 在 生 物 安全 防 护 实 验 室 中 进 行 ， 带 有 充 分 数 据 后 再 决 定 此 种 微生 物 或 毒 素 应 在 四 级 还 是 在

18、较 低 级 别 的 实 验 室 中 处 理 黄 病 毒 埃 博 拉 病 毒 中 欧 蜱 传 脑 炎 病 毒 美 国 国 立 卫 生 研究 所 美 国 疾 病 控 制中 心 病 源 操 作 一 级 屏 障 二 级 屏 障P1 BSL1 不 会 经 常 引 发 健 康成 人 疾 病 标 准 的 微 生 物 操 作 不 要 求 开 放 实 验 台 、 洗 手池P2 BSL2 人 类 病 源 菌 ， 因 皮肤 伤 口 、 吸 入 、 黏膜 曝 露 而 发 生 危 险 BSL1操 作 外 加 ： 1、 限制 进 入 2、 有 生 物 危 险 警告 标 志 3、 “ 锐 器 ” 安 全措 施 4、 生 物

19、 安 全 手 册 ，其 中 规 定 废 物 消 毒 和 医 疗观 察 1级 、 2级 生 物 安 全柜 实 验 服 、 手 套 、若 需 要 则 采 取 面 部保 护 措 施 BSL-1外 加 ： 高 压 灭菌 锅P3 BSL3 内 源 性 和 外 源 性 病源 ， 可 通 过 气 溶 胶 传 播 ， 能 导 致 严 重后 果 或 生 命 危 险 BSL-3 BSL-2操 作 外 加 ： 1、控 制 进 入 2、 所 有 废 物 消毒 3、 洗 涤 前 ， 实 验 服 消毒 4、 有 基 础 血 清 1级 、 2级 生 物 安 全柜 保 护 性 实 验 服 、手 套 、 若 需 要 则 采取

20、呼 吸 保 护 措 施 BSL-2外 加 ： 1、 和进 入 走 廊 隔 开 2、 双门 进 入 ， 门 自 动 关闭 3、 排 出 的 空 气 不循 环 4、 实 验 室 内 负压P4 BSL4 对 生 命 有 高 度 危 险的 危 险 性 病 源 或 外源 性 病 源 ： 致 命 、通 过 气 溶 胶 而 致 实验 室 感 染 ： 或 未 知传 播 风 险 的 有 关 病源 BSL3操 作 外 加 ： 1、 进 入前 换 衣 服 2、 出 实 验 室 前淋 浴 3、 带 出 设 施 的 所 有材 料 消 毒 3级 生 物 安 全 柜 或 1级 、 2级 生 物 安 全柜 加 全 身 的 、

21、 供 应空 气 的 正 压 防 护 服 BSL3外 加 ： 1、 单 独建 筑 或 隔 离 区 域 2、有 供 气 系 统 、 排 气系 统 、 真 空 系 统 、消 毒 系 统 3、 其 他 有关 要 样 品 从 一 个 实 验 室 转 送 到 另 外 一 个 实 验 室 ， 必 须 是 血 清 或 血 浆 ，除 特 殊 需 要 外 ， 一 般 不 能 用 全 血 且 需 置 于 带 有 盖 帽 的 试 管 内 ， 防 止 样 品 流 出 ， 试 管 上 应 有 明 显的 标 记 。 清 楚 地 标 记 为 感 染 性 材 料 感 染 性 材 料 必 须 放 在 密 闭 的 管 子 中 ，

22、再 放 入 含 有 足 够 吸 水 材 料的 生 物 危 险 管 中 ， 以 防 泄 漏 。 将 试 管 放 入 专 门 带 盖 的 容 器 内 ，容 器 的 材 料 要 易 于 消 毒 处 理 ， 在 所 放 试 剂 管 周 围 上 下 均 垫 有 软性 物 质 ， 以 免 破 碎 ， 容 器 外 表 有 HIV检 测 专 用 字 样 。 如 果 路 程 较远 或 者 气 候 炎 热 时 ， 盛 有 样 本 的 容 器 应 至 于 4 以 下 转 运生物危险 级 实验室的生物安全防护 职业暴露是 指 实 验 室 、 医 护 、 预 防 保 健 人 员 以 及 有 关的 监 管 工 作 人 员

23、 ， 在 从 事 艾 滋 病 防 治 工 作 及 相 关 工 作的 过 程 中 意 外 被 艾 滋 病 毒 感 染 者 或 艾 滋 病 患 者 的 血 液 、体 液 污 染 了 破 损 的 皮 肤 或 非 胃 肠 道 粘 膜 ， 或 被 含 有 艾滋 病 病 毒 的 血 液 、 体 液 污 染 了 的 针 头 及 其 它 锐 器 刺 破皮 肤 ， 而 具 有 被 艾 滋 病 病 毒 感 染 的 可 能 性 的 情 况 影 响 针 头 刺 伤 后 的 危险 性 因 素 包 括 伤 口 的 深 度 有 可 见 的 血 液 从 伤 口 溢 出 针 头 刺 破 了 静 脉 或 动 脉 污 染 源 来

24、自 于 晚 期 艾 滋 病 病 毒 感 染 者 (病毒 载 量 高 ) 皮 肤 针 刺 伤 或 切 割 伤 ： 立 即 用 肥 皂 和 大 量 流水 冲 洗 ， 尽 可 能 挤 出 损 伤 出 的 血 液 ， 用 70%乙醇 或 其 它 消 毒 剂 消 毒 伤 口 皮 肤 污 染 ： 用 水 和 肥 皂 冲 洗 污 染 部 位 ， 并 用适 当 的 消 毒 剂 浸 泡 ， 如 70%乙 醇 或 其 它 皮 肤 消毒 剂 粘 膜 污 染 ： 用 大 量 流 水 或 生 理 盐 水 彻 底 冲 洗污 染 部 位 衣 物 污 染 ： 尽 快 脱 掉 污 染 的 衣 物 ， 进 行 消 毒处 理 污

25、染 物 泼 溅 ： 发 生 小 范 围 污 染 物 泼 溅 事 故 时 ， 应 立 即 进 行消 毒 处 理 ； 发 生 大 范 围 污 染 物 泼 溅 事 故 时 ， 应 立 即 通 知实 验 室 主 管 领 导 和 安 全 负 责 人 到 达 事 故 现 场查 清 情 况 ， 确 定 消 毒 的 程 序 HIV职 业 暴 露 后 的 预 防 对 感 染 可 能 性 很 大 的 医 护 、 检 验 人 员 可 使 用预 防 性 治 疗 药 物 ， 治 疗 方 案 须 根 据 暴 露 情 况由 专 家 决 定 。 对 于 感 染 危 险 性 很 小 的 ， 建 议不 使 用 药 物 预 防 对

26、 可 能 有 危 险 的 人 ， 是 否 用 药 治 疗 ， 应 权 衡较 低 的 感 染 危 险 性 与 使 用 药 物 的 效 力 和 药 物毒 、 副 反 应 以 及 坚 持 用 药 的 依 从 性 等 利 弊 基 本 用 药 程 序 ： 两 种 逆 转 录 酶 抑 制 剂 ， 使 用 常规 治 疗 剂 量 ， 连 续 服 用 28天 。 如 双 汰 芝 （ AZT与3TC联 合 制 剂 ） 300 mg/次 ， 每 日 2次 ， 用 药 时间 为 连 续 服 用 28天 。 或 参 考 抗 病 毒 治 疗 指 导 方案 。 本 程 序 适 用 于 轻 度 低 危 暴 露 强 化 用 药

27、 程 序 ： 基 本 用 药 程 序 加 一 种 蛋 白 酶 抑制 剂 ， 如 佳 息 患 或 利 托 那 韦 。 均 使 用 常 规 治 疗剂 量 ， 连 续 服 用 28天 。 本 程 序 适 用 于 严 重 暴 露 职 业 暴 露 后 ， 存 在 感 染 艾 滋 病 毒 的 危 险 性 ，但 实 际 感 染 艾 滋 病 毒 的 是 的 。 研 究 资 料 表 明 ， 医 务 工 作 者 被 艾 滋 病 病 毒 污染 的 后 ， 发 生 艾 滋 病 病 毒 感 染 的 机率 为 0.33 （ 20/6135） ， 的感 染 艾 滋 病 病 毒 的 机 率 为 0.09 （ 1/1143） 最 主 要 的 职 业 是 和 除 三 名 实 验 室 人 员 是 暴 露 于 艾 滋 病 病 毒 培 养以 外 ， 其 余 全 部 是 由 于 污 染 血 液 或 体 液 到 1997年 为 止 ， 外 科 医 生 和 被 缝 合 针 刺 伤 的暴 露 者 中 没 有 发 生 肯 定 的 艾 滋 病 病 毒 感 染分 析 美 国 发 生 的 52名 职 业 暴 露 后 艾 滋 病 病 毒感 染 者 ， 发 现 ：