高考生物二轮复习第一部分专题六生物科技系统教师用书

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1、【最新】精选高考生物二轮复习第一部分专项六生物科技系统教师用书第1讲基因工程与克隆技术考点一基因工程与蛋白质工程1.(武汉调研)镰刀型细胞贫血症是一种单基因遗传病，患者的血红蛋白分子肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬氨酸替代,导致功能异常。回答问题：（1）异常血红蛋白的氨基酸序列变化的主线因素是编码血红蛋白基因的_序列发生变化。(2)将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白达到治疗的目的。此操作_（填“属于”或“不属于”）蛋白质工程,理由是该操作_。(3)用基因工程措施制备血红蛋白时，可先提取初期红细胞中的_，以其作为模板，在_酶的作用下反转录合成cDN。DNA与载体需在

2、_酶的作用下,拼接构建基因体现载体，导入受体菌后进行体现。(4)检测受体菌与否已合成血红蛋白，可从受体菌中提取_,用相应的抗体进行_杂交，若浮现杂交带,则表白该受体菌已合成血红蛋白。解析:(1)基因是具有遗传效应的DN片段,遗传信息储存在基因碱基对的排列顺序中。(2）蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成，对既有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求,故题中所述不属于蛋白质工程。（3）运用逆转录法获取目的基因时,需先提取mRNA，在逆转录酶的作用下逆转录合成cDNA。cDA与载体需要在限制酶和DNA连接酶的作用下拼接构建成基因体现载体,才可导入受体菌。（4)检测目的基

3、因与否翻译成蛋白质,需要从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原抗体杂交。答案：（1)碱基对（2）不属于没有对既有的蛋白质进行改造 （3）mN 逆转录 限制酶和DNA连接 （4）蛋白质 抗原抗体2下图是科学家运用大肠杆菌生产人胰岛素的部分过程。请结合有关知识回答问题:（1)除图示措施获得目的基因(人胰岛素基因）外，还可通过_的措施获得目的基因。(2)图示所获得的人胰岛素基因在大肠杆菌中不能体现,需要质粒为其提供_等调控因子；质粒具有一种或多种_切割位点,供目的基因插入其中；质粒上还具有_,供重组NA的鉴定和选择。(3)图中切割人胰岛素基因和质粒的酶(酶A)相似,其目的是_。将重组NA分子

4、导入大肠杆菌前，常需用_解决大肠杆菌，使其成为感受态细胞。（4)由于大肠杆菌中没有_等构造，其内合成的人胰岛素没有活性，需要通过再加工。解析：(1)获得目的基因的措施除题图所示措施外,尚有人工合成法。(2)图示所获得的人胰岛素基因由于不含启动子和终结子，因此需要载体质粒提供。质粒上还应具有一种或多种限制酶切割位点，供目的基因插入其中;质粒上还具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。()用同一种限制酶切割目的基因和质粒,以便获得相似的末端。将重组DNA分子导入大肠杆菌前，需用C+解决大肠杆菌，使其成为感受态细胞。()由于大肠杆菌中没有内质网、高尔基体等构造，其内合成的人胰岛素没有活性，需要通过再

5、加工。答案：（)人工合成 (2)启动子、终结子限制酶 标记基因(3）获得相似的末端Ca+(4)内质网、高尔基体3(天津高考）人血清白蛋白(A）具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组SA(rHSA）的两条途径。（1)为获取HSA基因,一方面需采集人的血液,提取_合成总cDNA,然后以cDNA为模板，使用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表达一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。()启动子一般具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异体现rHSA的载体，需要选择的启动子是_（填写字母,单选)。A人血细胞启动子 B.水稻

6、胚乳细胞启动子C大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子（3)运用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质，其目的是_。()人体合成的初始HSA多肽，需要通过膜系统加工形成对的空间构造才有活性。与途径相比,选择途径获取rHA的优势是_。（5)为证明rHA具有医用价值,须确认rHSA与_的生物学功能一致。解析：(1）要想合成总cDNA,需要采集人的血液获得总NA。由于DNA的复制只能从脱氧核苷酸单链的端向端延伸，因而引物均应结合在NA单链的3端，而N的两条链反向平行,由此可以拟定引物在另一条脱氧核苷酸单链的位置和方向。（2)若要从水稻胚乳细胞内获得目的产物，需要控制该目的基因只在水稻胚乳细胞内体现

7、。由题干中的信息“启动子一般具有物种及组织特异性”可知，此处需要选择水稻胚乳细胞启动子。（）酚类物质能吸引农杆菌，因此在水稻受体细胞中添加该类物质,能吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有助于目的基因的成功转化。(4)途径和的重要区别是途径的受体细胞是真核细胞,途径的受体细胞是原核细胞。由于人体合成的初始HSA多肽需要经膜系统加工形成对的的空间构造才有生物活性,因此选择途径获取rHSA更具有优势。(5)HS是基因工程的产物，其与否具有医用价值，还需要在个体水平上进一步确认其与的生物学功能与否一致。答案：(）总RNA（或mRNA)(2)B ()吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有助于目的基因成功转化 （4)水

8、稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工(5)HA4.(江苏高考)下表是几种限制酶辨认序列及其切割位点，图1、图2中标注了有关限制酶的酶切位点,其中切割位点相似的酶不反复标注。请回答问题：限制酶BamHBcSau3AHnd辨认序列及切割位点图1图2()用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处在_态的大肠杆菌。(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定,所用的引物构成为图2中_。(3)若Bm酶切的DA末端与l酶切的D

9、NA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为_，对于该部位,这两种酶_（填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。(4)若用Sa3A切图1质粒最多也许获得_种大小不同的DNA片段。解析：()基因工程中选择合适的限制酶切割质粒和目的基因时,应保存目的基因和至少一种标记基因构造的完整性，即遵循“目的基因切两侧,标记基因留一种”的基本原则，最佳选择切割产生不同末端的两种限制酶同步切割质粒和目的基因，以避免目的基因的反向插入带来的不正常体现，因此据图分析应选择的限制酶为Bcl和Hnd,切割后质粒上保存的四环素抗性基因作为标记基因。酶切后的载体和目的基因通过DNA连接酶的作用形成重组质粒,重组质粒需要导入

10、Ca+解决后的处在感受态的大肠杆菌（处在感受态的大肠杆菌细胞膜的通透性大大增长，便于重组质粒进入)。()由上述分析可知，为了筛选出导入重组质粒的大肠杆菌,应先配制含四环素的选择培养基,平板上长出的菌落为导入一般质粒或重组质粒的大肠杆菌菌落,进一步鉴定出导入重组质粒的大肠杆菌，可运用PCR扩增的方式,结合电泳技术来分析解决。DN的两条链是反向平行的，在PC过程中,当引物与DN母链通过碱基互补配对结合后，NA聚合酶只能从引物的3端延伸DN链,因此应选择引物甲和引物丙。(3)由于Bc和BaH酶切产生的黏性末端相似，因此可以被DNA连接酶连接,连接部位的6个碱基对序列为,但是连接后形成的NA中不再具有

11、Bcl和BaH的辨认序列,连接部位不能被这两种酶切开。(4)由图可知,能被限制酶Bcl和BamH切割的序列也能被Sa3A辨认并切割,因此图中质粒上存在3个au3A的切割位点，若将3个切割位点之间的DNA片段分别编号为a、b和c,则完全酶切（3个切割位点均被切割)会产生3种大小的DNA片段,即为、b和c；考虑只切个切割位点,有三种状况，都产生一种大小的NA片段,即大小均为abc;考虑切2个切割位点，则会产生a、c、ac、b、b+c、a几种不同大小的DNA片段。综上所述,若用S3A辨认并切割图中质粒,最多可获得7种大小的DNA片段,即为+、ab、ac、b+c、b、c。答案：(1)Bcl和Hid连接

12、 感受（2)四环素 引物甲和引物丙(3)都不能 ()5.多聚半乳糖醛酸酶()能降解果胶,使细胞壁破损。成熟的番茄果实G的合成量明显增长，能使果实变红变软,但不利于保鲜。运用基因工程的措施减少P基因的体现，可延长番茄的保质期。科学家将PG基因接到T质粒上，导入番茄细胞中,得到转基因番茄。请回答问题：(1)转基因番茄的哺育过程中波及的工程手段所根据的生物学原理是_。对该农产品进行销售时需进行标注，以维护消费者对转基因产品的_和_。某些消费者紧张转基因番茄的安全性，重要表目前_(至少答出一点。)（2)将G基因接到T质粒上,属于基因工程操作流程中的_。(3）将具有目的基因的番茄细胞哺育成转基因番茄植株

13、，需通过_和_的过程。若想获得转基因番茄的人工种子,需以植物组织培养得到的_等为材料，通过人工薄膜包装而得到。解析:(1)转基因番茄的培养过程用到的工程手段有基因工程和植物细胞工程,应用的原理分别是基因重组和植物细胞的全能性;国内的基因工程安全管理措施是为了维护消费者对转基因产品的知情权和选择权。某些消费者觉得不能对转基因食品的安全性掉以轻心，重要表目前紧张浮现滞后效应、紧张浮现新的过敏原、紧张营养成分的变化等。(2)将G基因接到i质粒上，属于基因工程的核心环节,即基因体现载体的构建。(3)植物组织培养过程需通过脱分化和再分化过程。所谓人工种子，就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋

14、芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子。答案:(1）基因重组和植物细胞的全能性知情权选择权紧张浮现滞后效应(或紧张浮现新的过敏原、紧张营养成分变化等）(2)基因体现载体的构建(3)脱分化再分化胚状体、不定芽、顶芽和腋芽考点二克隆技术6.研究小组用土壤农杆菌与陆地棉叶肉细胞原生质体共同培养获得了转基因陆地棉,过程如下。请回答问题：(1)图a表达从已经消毒的叶片中剪取部分植物组织细胞，图b表达制备原生质体，培养皿中要加纤维素酶和果胶酶,其因素是_。 (2)图c表达用培养基培养原生质体，培养基中加入了合适浓度的蔗糖,其重要作用是_和_。培养一段时间后,将其与土壤农杆菌混合培养，使重组Ti质粒进入_,

15、重组Ti质粒上_段携带了目的基因,可以整合到植物细胞的 _上。然后通过离心(图d）的措施，除去多余的土壤农杆菌。(3)图e表达将原生质体培养成愈伤组织，然后将其转移到具有一定抗生素的培养基中进行培养（图）,抗生素的作用是_。(4)将愈伤组织转移培养基继续培养(图)，同步注意调节植物生长调节剂的种类和含量，其因素是_,最后获得完整的植株(图)。解析：图示是通过土壤农杆菌与植物细胞原生质体共培养的措施获得转基因植物的过程。a为获取植物细胞；为清除细胞壁获取原生质体的过程;c为用培养基培养原生质体；d为土壤农杆菌与植物细胞原生质体共培养;表达脱分化过程；表达用选择培养基进行筛选培养；g表达再分化过程

16、；h表达转基因植物幼苗。（)图b表达用纤维素酶和果胶酶两种酶来制备原生质体，因素是植物细胞壁的重要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可除去细胞壁。(2)图c表达用培养基培养原生质体,培养基中加入了合适浓度的蔗糖,其重要作用是为原生质体提供碳源和能源和调节渗入压维持原生质体的形态,将其与土壤农杆菌共同培养，使携带目的基因的Ti质粒的TA进入植物细胞,整合到植物细胞的染色体(染色体NA)上，然后通过离心的措施,除去多余的土壤农杆菌。(3)图表达将原生质体培养成愈伤组织，然后将其转移到具有一定抗生素的培养基中进行培养(图f)，抗生素的作用是筛选出含目的基因的植物细胞。(4）植物生长调节剂的种类和含

17、量会影响愈伤组织的分化，故将愈伤组织转移培养基继续培养（图g)，同步注意调节植物生长调节剂的种类和含量。答案：（1)植物细胞壁的重要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可除去细胞壁()为原生质体提供碳源和能源 调节渗入压维持原生质体的形状 原生质体(植物细胞)TNA染色体(染色体NA) (3)筛选出含目的基因的植物细胞()植物生长调节剂的种类和含量会影响愈伤组织的分化7(永州三校联考)下图为单克隆抗体制备流程示意图。（1)图中过程是_。对动物细胞来说，过程独有的措施是_。过程的目的是_。过程的目的是获得_。(2)在培养过程中为避免杂菌感染,应向培养液中添加_；其体外培养需用C培养箱，其中C的重

18、要作用是_。(3）若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_中使其增殖。(4）单克隆抗体与老式抗体相比，其长处是_。解析：过程表达诱导浆细胞与骨髓瘤细胞融合,动物细胞特有的诱导融合措施是用灭活的病毒解决。单克隆抗体制备过程中需两步筛选:是运用选择培养基筛选杂交瘤细胞,过程是运用克隆化培养和抗体检测筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。动物细胞培养需要提供无菌、无毒条件,还需要一定的气体环境。杂交瘤细胞可在小鼠腹水中进行体内培养。答案：（1)向老鼠体中注射特定抗原灭活的病毒解决筛选杂交瘤细胞能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 (2)抗生素维持培养液的(3)腹水(4)特异性强，敏捷度高

19、,可大量制备8下图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖状况的变化曲线(图中B、两点表达经筛选后继续培养)，请据图回答下面的问题:()OA段的培养称为_培养，AB段也许发生了_现象，需要用_酶解决，以使组织细胞分散开来。（)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行_,不同的是植物细胞还要进行_。（3)为制备单克隆抗体,需将_注射到小鼠体内，以此获取_细胞，同步可选用图中_点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选用细胞的细胞膜上的_比正常细胞明显减少。为筛选出可以产生单克隆抗体的杂交细胞，可用_培养基达到目的。解析：据图中不同阶段细胞的增殖代数可知,AB段细胞不再

20、增殖,但此时细胞仍有增殖能力,因此此时也许发生了接触克制，故段为原代培养；D点细胞增殖代数达到了6次以上，故此时细胞发生了癌变，获得了无限增殖的能力。答案:(1)原代 接触克制 胰蛋白(2）增殖(或分裂) 脱分化和再分化(3)抗原浆D 糖蛋白 选择9.D对脑神经发育至关重要。以A、两种单细胞真核藻为亲本，运用细胞融合技术选育高产DHA融合藻。两种藻特性如下表。亲本藻优势代谢类型生长速率/(d）固体培养基上藻落直径DA含量()A藻自养.6小.7B藻异养.4大无据表回答:(1)选育的融合藻应具有A藻_与藻_的长处。（2）诱导融合前需用纤维素酶解决两种藻,其目的是获得_。()通过如下三步筛选融合藻，

21、环节_可裁减藻,环节_可裁减生长速率较慢的藻落，再通过环节_获取生产所需的融合藻。环节a:观测藻落的大小；环节b:用不具有机碳源的培养基进行光照培养；环节c：测定含量。(4)以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组实验,成果如下图。甲组条件下，融合藻产生H的细胞器是_;丙组条件下产生ATP的细胞器是_。与甲、丙两组相比，乙组融合藻生长速率较快,因素是在该培养条件下_。甲、乙两组DHA产量均较高,但实际生产中往往采用甲组的培养条件,其因素是_。解析：()据表可知，A藻具有自养和能产生DHA的长处,B藻具有能迅速生长的长处，故选育的融合藻应同步具有两者长处。(2)植物细胞具有细胞壁，用纤维素酶解决可

22、以清除细胞壁获得原生质体。()B藻为异养型,在不具有机碳源的培养基上无法生存;藻落的大小和生长速率成正比；选育的融合藻除了自养、生长迅速的长处外，还要能产生DHA。(4)甲组融合藻有光照,既可进行细胞呼吸也可进行光合伙用,因此叶绿体和线粒体中均可以产生H；丙组黑暗解决，融合藻不能进行光合伙用，因此产生ATP的细胞器只有线粒体。解答本题时应注意细胞质基质中也能产生ATP，但是不属于细胞器。融合藻同步具有A藻和B藻的特点,因此既能自养又能异养,在乙组条件下，融合藻可同步进行自养和异养，故生长速率较快。在实际生产中应考虑成本,相比甲组，乙组消耗葡萄糖,提高了成本，培养液中富含葡萄糖还易引起杂菌生长。

23、答案：(1）产生HA,自养特性迅速生长 (2）原生质体(3)ba c()线粒体、叶绿体 线粒体融合藻既能光能自养又能异养融合藻运用光能和简朴的无机物即能生长，不需添加葡萄糖,可减少成本,也可避免杂菌生长在本讲内容的复习中,应注意如下几点:(1)用列表比较法理解限制酶、连接酶和载体的作用。(2）用实例分析法理解基因工程的原理与过程。(3）用列表比较法理解两个不同点：植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。(）用图解法理解单克隆抗体的制备过程。 考点一明考向不走弯路 以图表、材料、流程图等形式,综合考察基因工程与细胞工程的原理、操作过程及应用是高考常考形式。基因工程中

24、限制酶和NA连接酶的作用特点及在构建基因体现载体中的应用是难点，也是易错点，如课前诊断卷T4。联知识简洁串记比较记忆基因工程的三种工具(填表)限制酶DNA 连接酶载体作用切割目的基因和载体拼接DNA 片段,形成重组DNA携带目的基因进入受体细胞作用部位两个核苷酸之间的磷酸二酯键作用特点(条件)辨认双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列在特定位点上切割Eo DNA 连接酶只能连接黏性末端 NA 连接酶能连接黏性末端和平末端能在宿主细胞内稳定存在并大量复制有一种至多种限制酶切割位点具有特殊的标记基因常用类型co 限制酶 Sa 限制酶Ecoi DNA 连接酶、4 DNA连接酶质粒、噬菌体的衍生物、动植

25、物病毒等.熟记基因工程的四个操作环节（填空)(1)目的基因的获取途径：措施具体操作直接分离从自然界已有的物种中分离,如从基因文库中获取人工合成化学合成已知核苷酸序列的较小基因，直接运用DA合成仪用化学措施合成,不需要模板逆转录法以RN为模板,在逆转录酶作用下人工合成PCR技术扩增原理：D复制条件:模板DNA、引物、脱氧核苷酸、热稳定的DN聚合酶()基因体现载体的构建重组质粒的构建：基因体现载体的构成：构建过程：（)将目的基因导入受体细胞:植物细胞动物细胞微生物细胞常用措施农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法（用Ca解决)受体细胞受精卵、体细胞受精卵原核细胞(4)目的基因

26、的检测与鉴定:3图解记忆蛋白质工程(填图）防易错无障通关.判断有关基因工程论述的正误（）切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地辨认6个核苷酸序列()(2)载体质粒一般采用抗生素合成基因作为筛选标记基因()(3)抗虫基因虽然成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常体现()（4)设计扩增目的基因的引物时不必考虑体现载体的序列()(5)用PC措施扩增目的基因时不必懂得基因的所有序列(）（6)P体系中一定要添加从受体细胞中提取的A聚合酶()（7）外源DA必须位于重组质粒的启动子和终结子之间才干进行复制(）(8)每个质粒至少含一种限制性核酸内切酶辨认位点（)(9)将aa(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET

27、8b导入大肠杆菌并成功体现腺苷酸脱氨酶。每个限制性核酸内切酶辨认位点至少插入一种da(）(10)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶()(11)Eoli NA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端()(12)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法()(1)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接使用(）(14)为哺育抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体()(15)检测目的基因与否导入受体细胞可用抗原抗体杂交技术()2判断有关蛋白质工程论述的正误(1）蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质()(2)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接

28、进行操作,定向变化分子的构造（)(3）蛋白质工程可以合成自然界中不存在的蛋白质（）考点二 明考向不走弯路 植物体细胞杂交、动物细胞培养、核移植及单克隆抗体制备的过程及应用是高考命题的重点。常以材料或流程图形式，结合基因工程和胚胎工程进行考察。联知识简洁串记1.比较记忆植物组织培养与动物细胞培养(填表)项目植物组织培养动物细胞培养取材植物幼嫩部位动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程成果获得植株个体,可以体现全能性新的细胞，不形成个体，不体现全能性条件无菌营养合适条件无菌、无毒营养，血清等温度和Ph气体环境:、O2应用植株迅速繁殖脱毒植株的培养人工种子生产药物、杀虫剂等转基因植物的哺育蛋白

29、质生物制品的生产皮肤移植材料的哺育检测有毒物质生理、病理、药理学的研究2理清克隆动物哺育流程（填图).比较记忆植物体细胞杂交与动物细胞融合（填表)项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性过程有关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶融合措施物理法：离心、电激、振动;化学法:聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外还可以用灭活的病毒诱导成果杂种植株杂交细胞 意义克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株突破了有性杂交措施的局限，使远缘杂交成为也许4.精确记忆单克隆抗体的一过程两特点(填空)(1)制备过程：(2)单克隆抗体的特点:特异性强、敏捷度高。防易错无障通关判断下

30、列有关植物细胞工程论述的正误(1)在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞()(2)经植物组织培养得到的胚状体用人工薄膜包装后可得到人工种子（)（3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化（)(4)培养草莓脱毒苗所采用的重要技术是细胞杂交()()棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞全能性()(6）植物的每个细胞在植物体内和体外都能体现出细胞的全能性(）(7)愈伤组织是外植体脱分化和再分化后形成的()()再生出细胞壁是植物体细胞原生质体融合成功的标志（)2判断下列有关动物细胞工程论述的正误(1)在25 的实验条件下可顺利完毕大鼠神经细胞的培养(）（2)动

31、物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶()()动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒(）(）体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体()(5)动物细胞培养技术可用于转基因动物的哺育()(6)培养保存接触克制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞()（7)克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生变化()()二倍体细胞的传代培养次数一般是无限的(）(9)动物细胞核移植的受体细胞必须是卵细胞()(0)克隆动物的性状与供体动物完全相似()一、练全国卷高考真题预测知考察重点.(全国甲卷)下图表达通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体）的流程。回答问题:（1)图中A表达正

32、常细胞核，染色体数为2n,则其性染色体的构成可为_。过程表达清除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至合适时期再进行,去核时常采用_的措施。代表的过程是_。(2）通过多次传代后，供体细胞中_的稳定性会减少。因此,选材时必须关注传代次数。()若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相似,从遗传物质的角度分析其因素是_。(4)与克隆羊“多莉(利)”哺育成功同样，其她克隆动物的成功获得也证明了_。解析：（）哺乳动物的正常细胞核中性染色体的构成为XX(雌性)或XY(雄性)。卵母细胞在培养至减数第二次分裂的中期时,常采用显微操作法清除细胞核。过程是将初期胚胎移植到代孕个体的子宫中,即代表的是胚胎移植。(2)一

33、般来说,动物细胞在传代培养到100代时，部分细胞的细胞核型也许会发生变化，即遗传物质的稳定性会减少。因此，选材时一般选0代以内的细胞,以保证细胞正常的二倍体核型。（3)获得的克隆动物性状与供体动物基本相似,但不完全相似，从遗传物质的角度分析，性状不完全相似的因素是：克隆动物细胞质中的遗传物质来自去核卵母细胞的细胞质，细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响。(4)高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，但其细胞核的全能性在卵母细胞细胞质中的物质的作用下仍能得以体现。故克隆羊“多莉（利)”以及其她克隆动物的哺育成功,证明了高度分化的动物体细胞的细胞核仍具有全能性。答案:(1)X或XY 显微操作

34、 胚胎移植(2)遗传物质 (3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响（)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性2.(全国乙卷)某一质粒载体如图所示,外源D插入到mpr或Tetr中会导致相应的基因失活(Apr表达氨苄青霉素抗性基因,Te表达四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用Ba酶切后，与用amH酶切获得的目的基因混合,加入DN连接酶进行连接反映，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。成果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是具有环状目的基因、具有质粒载体、具有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答问题:（1)质粒载体作为基因工程的工具，应具有的基本条件有_(

35、答出两点即可）,而作为基因体现载体,除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终结子。（2)如果用品有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能辨别的,其因素是_；并且_和_的细胞也是不能辨别的，其因素是_。在上述筛选的基本上,若要筛选具有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用品有_的固体培养基。(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_。解析:(1）质粒作为载体,应具有的基本条件有:有一种至多种限制酶切割位点，供外源NA片段（基因)插入其中；在受体细胞中能自我复制,或能整合到染色体NA上,随染色

36、体DNA进行同步复制；有特殊的标记基因,供重组DNA的鉴定和选择等。(）在培养基中加入氨苄青霉素进行筛选，其中未被转化的大肠杆菌和仅含环状目的基因的大肠杆菌，因不含氨苄青霉素抗性基因而都不能在此培养基上存活，两者不能辨别。具有质粒载体的大肠杆菌和具有插入了目的基因的质粒的大肠杆菌中都具有氨苄青霉素抗性基因，都能在此培养基上存活,两者也不能辨别。若要将具有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌进一步筛选出来，还需要使用品有四环素的固体培养基。（3)某些噬菌体经改造后可作为载体，导入受体细胞后，其A复制所需的原料来自于受体细胞。答案:（1)能自我复制、具有标记基因（答出两点即可)（2)两者均不具有氨苄

37、青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长具有质粒载体具有插入了目的基因的重组质粒(或答具有重组质粒）两者均具有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长四环素 （3)受体细胞3(全国丙卷）图(a)中的三个DN片段上依次表达出了EoR、H和Su3A三种限制性内切酶的辨认序列与切割位点,图(b）为某种体现载体的示意图(载体上的EcoR、SauA的切点是唯一的）。 ATC ATCACCTTAGCCAGGC 图(a)图(b）根据基因工程的有关知识，回答问题：(1)经Bam酶切后得到的目的基因可以与上述体现载体被_酶切后的产物连接,理由是_。（2)若某人运用图（b)所示的体现载体获得了甲、乙、丙三种具有目的基

38、因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中体现目的基因产物的有_，不能体现的因素是_。图（c)(3)DA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常用的有_和_，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。解析:(1)由题图可知，B和au3A两种限制性核酸内切酶的共同辨认序列是，两者切割可以形成相似的黏性末端,因此经BH酶切得到的目的基因可以与图(b）所示体现载体被SauA酶切后的产物连接。(2)在基因体现载体中,启动子应位于目的基因的首端，终结子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才干顺利地转录，再完毕翻译过程，即顺利体现。图中甲所示的目的基因插入在启动子的上游，丙所示目的基因插入

39、在终结子的下游,两者的目的基因均不能被转录,因此目的基因不能体现。(3)常用的DNA连接酶有N连接酶和T4DNA连接酶,其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。答案:（1）Sau3A两种酶切割后产生的片段具有相似的黏性末端（2)甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终结子的下游，两者的目的基因均不能被转录 (）EcoliDA连接酶 T4DA连接酶 T4DN连接酶4.(全国卷)HV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答问题：(1)用基因工程措施制备HV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HI中的_，以其作为模板,在_的作用下合成_，获取该目的蛋白的基因，构建重组体现载

40、体,随后导入受体细胞。()从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是_，该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的,检测的原理是_。（)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的主线因素是HIV重要感染和破坏了患者的部分_细胞，减少了患者免疫系统的防卫功能。()人的免疫系统有_癌细胞的功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。解析:（1)HIV的遗传物质是NA,因此要想获得相应的目的蛋白基因，应以IV的RA为模板,在逆转录酶的作用下合成cA(或DN)。(2)目的蛋白注入机体后相称于抗原。在抗原的刺激

41、下，机体进行体液免疫,由浆细胞产生相应抗体（分泌蛋白)，由于该抗体能与目的蛋白(抗原)发生特异性结合,因此可通过抗体检测有无目的蛋白,从而拟定体内有无HIV。(3)IV重要袭击人体的T(或T淋巴)细胞,从而减少机体免疫系统的防卫功能。()癌细胞在机体中属于抗原，人体的免疫系统可以监控和清除癌细胞。答案:(1)逆转录酶 cDNA(或D)()抗体抗原抗体特异性结合(3)T(或淋巴) (4)监控和清除.（全国卷)已知生物体内有一种蛋白质(P）,该蛋白质是一种转运蛋白,由0个氨基酸构成。如果将分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,变化后的蛋白质(P1)不仅保存P的功能,并且

42、具有了酶的催化活性。回答问题:(1)从上述资料可知，若要变化蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的_进行改造。(2)以P基因序列为基本,获得P1基因的途径有修饰_基因或合成_基因。所获得的基因体现时是遵循中心法则的，中心法则的所有内容涉及_的复制,以及遗传信息在不同分子之间的流动,即:_。(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_和_，进而拟定相相应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因,再经体现、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。解析：(1)从题中所述资料可知，将P分子中18位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸后,该蛋白质的功能发生了

43、变化，此过程是通过对构成蛋白质的氨基酸的排列顺序进行改造,进而变化了蛋白质的构造，从而变化了蛋白质的功能。(2)在蛋白质工程中,目的基因可以以P基因序列为基本，对生物体内原有P基因进行修饰，也可以通过人工合成法合成新的P1基因。中心法则的内容如下图所示：由图可知,中心法则的所有内容涉及:DNA以自身为模板进行的复制，NA通过转录将遗传信息传递给N,最后RA通过翻译将遗传信息体现成蛋白质；在有些病毒中RN可自我复制（如烟草花叶病毒等），在某些病毒中能以RN为模板逆转录合成DNA(如HIV),这是对中心法则的补充。（3)蛋白质工程的基本途径是预期蛋白质功能设计预期的蛋白质构造推测应有的氨基酸序列合

44、成DN体现出蛋白质,通过该过程得到的蛋白质,需要对其生物功能进行鉴定,以保证其发挥正常作用。答案：(1)氨基酸序列（或构造）(其她合理答案也可)(2)P P1 NA和RA(或遗传物质)DARNA、ADNA、RN蛋白质(或转录、逆转录、翻译)（3）设计蛋白质的构造 推测氨基酸序列 功能6.（全国卷）某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠（X、Y和)，每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反映的血清最大稀释倍数）,成果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的淋巴细胞(染色体数目4条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目6条)按一定比例加入

45、试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答问题:(1)制备融合所需的淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到6 0以上，则小鼠至少需要通过_次免疫后才干有符合规定的。达到规定后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最合用于制备B淋巴细胞的是_小鼠,理由是_。(2)细胞融合实验完毕后，融合体系中除具有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,也许尚有_,体系中浮现多种类型细胞的因素是_。(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核，染色体数目最多是_条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，因素是_。解析:()由图可知，小鼠至少通过4次免疫后，免疫小鼠的血清抗

46、体效价可达到1 00以上,其中小鼠的血清抗体效价最高。(2）由于细胞融合是随机的,且并不是所有细胞都能参与融合，融合体系中具有五种细胞：未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞互相融合形成的细胞、淋巴细胞互相融合形成的细胞。(3)两个细胞的细胞核融合成一种细胞核标志着融合的完毕,杂交瘤细胞中有一种细胞核;细胞融合过程中染色体会发生丢失,因此染色体数量最多为两者之和，即00条。(4)未融合的B淋巴细胞不能无限增殖，经多次传代培养后都不能存活。答案：(1)4 Y Y小鼠的血清抗体效价最高(2)B淋巴细胞互相融合形成的细胞、骨髓瘤细胞互相融合形成的细胞 细胞融合是随机的，且融合

47、率达不到100% ()1100(4)（经免疫的B淋巴细胞是高度分化的细胞)不能无限增殖二、练各地市调研试题知命题热点1.下列是用生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。(）过程得到的Y细胞称为_。得到的单克隆抗体最重要的长处是_。(2)过程需要_酶，过程需要用_解决受体细胞。(3)若抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相似,两者的空间构造与否相似？_为什么?_。()如果想用棉花生产该种抗体,则过程的受体细胞一般选用_,通过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过_技术获得能产抗体的转基因棉花植株。解析：分析图形可知，图中是动物细胞融合,是动物细胞培养,是分离提取mRNA，是逆转录形成目的基因,是构建重组

48、质粒,是将重组质粒导入大肠杆菌。(1)过程将经免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合得到Y细胞,即杂交瘤细胞,杂交瘤细胞产生的单克隆抗体最重要的长处是特异性强、敏捷度高、并可大量制备。(2)过程是逆转录形成目的基因,过程是将重组质粒导入大肠杆菌,需要用Ca2+(或aCl）解决受体细胞,使其处在感受态,易于吸取外源A。()抗体2形成过程没有通过内质网和高尔基体的加工，抗体1形成过程通过内质网和高尔基体的加工，因此若抗体与抗体2的氨基酸排列顺序虽然相似,但两者的空间构造不同。(4）如果想用棉花生产该种抗体，则运用农杆菌转化法，即过程的受体细胞一般选用农杆菌,通过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过植物组织

49、培养技术获得能产抗体的转基因棉花植株。答案:(1)杂交瘤细胞 特异性强、敏捷度高、并可大量制备(2)逆转录 C+（或CaCl2)()不同 抗体形成过程没有通过内质网和高尔基体的加工，抗体1形成过程通过了内质网和高尔基体的加工 (4)农杆菌 植物组织培养在青蒿中,青蒿素的含量很低，且受地区性种植的影响较大。研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿酸的合成途径(如图中的实线框内所示)。研究发现，酵母细胞也可以产生青蒿酸合成的中间产物FP(如图中的虚线框“内所示）。请回答问题：（1)在FP合成酶基因的体现过程中，完毕过程中需要_酶催化。（2)为了提高青蒿素的产量,需要对青蒿细胞进行植物组织培养,用青蒿细胞培

50、养到薄壁细胞的过程叫做_，由薄壁细胞大量增殖的细胞分裂方式是_。()根据图示的代谢过程,若科学家用基因工程技术哺育能产生青蒿酸的酵母细胞,需要向酵母细胞中导入_、_等。在基因工程的操作过程中,为了目的基因在受体细胞中能稳定存在、复制和体现，使其发挥作用,需要构建_。()实验发现,改造后的酵母菌细胞的基因能正常体现，但酵母菌合成的青蒿酸仍很少，根据图解分析，其因素也许是_。(5）运用酵母细胞生产青蒿酸的明显优势有_(答对一种要点即可）。答案：（)RN聚合()脱分化有丝分裂(3)ADS酶基因 YP71A酶基因 基因体现载体（4)酵母细胞中FP部分用于合成固醇（或FRG9酶容易体现）（5)细胞繁殖快(或生理代谢旺盛或易培养或成本低或能克服地区性种植的限制)3CR是将RNA逆转录（T)和cDA的聚合酶链式扩增反映相结合的技术，具体过程如图所示：(1)过程需要加入缓冲液、原料、_、_和引物等。()过程一方面要将反映体系的温度升高到 ，其目的是_