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1、-Agilent 1200液相色谱仪操作规程 设备组成：G1311A（四元泵）、G1329A（标准型自动进样器）、G1316A（柱温箱）、G1314B（VWD检测器）、G1315D（DAD检测器）。基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机，进入 Windows*P 画面。（IP 地址由 Bootp Service 程序写入）2、打开 1200 LC 各模块电源。3、待各模块自检完成后，双击仪器 1 联机”图标，或（点击屏幕左下角的开始”，选择程序”，选择Agilent Chemstation”，选择仪器 1 联机”）化学工作站自动与 1200LC 通讯，进入的工作站画面如下所示。4、从视图”
2、菜单中选择方法和运行控制”画面,点击系统视图”，样品视图”，使其命令前有”标志，来调用所需的界面。-5、把流动相放入溶剂瓶中。6、手动旋开冲洗阀。7、点击泵”图标，点击设置泵”选项，进入泵编辑画面。8、设流速：3-5ml/min，点击确定”。9、点击泵”图标，点击控制”选项，选中启动”，点击确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。若使用缓冲盐，要加入泵头冲洗（seal-wash），点击泵”图标，点击控制”选项，选择用于泵密封垫清洗的泵”，开启清洗泵前要配制 90%水+10%异丙醇，溶剂不能干涸。10、点击泵”图标，点击控制
3、”选项，选中关闭”，点击确定”关泵，手动旋紧冲洗阀。11、点击泵”图标，点击设置泵选项”，设流速：1.0ml/min。12、点击泵下面的瓶图标，选择溶剂瓶添充量”如下图所示（以四元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击确定”。（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：从方法”菜单中选择编辑完整方法”项，如下图所示选中除数据分析”外的三项，点击确定”，进入下一画面。2、方法信息：在方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。点击 确定”，进入下一画面。-3、泵参数设定：（以四元泵为例）在流速”处输入流量,如1.5ml/min，停止时间：10
4、min。在溶剂 B”处输入70.0,(A=100-B-C-D)，也可插入”一行时间表”，编辑梯度。在压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。点击确定”，进入下一画面。4、自动进样器参数设定:（以标准型G1329A为例）选择合适的进样方式,如图所示，进样体积 1.0ul，洗瓶位置为6号。标准进样”-只能输入进样体积，此方式无洗针功能。洗针进样”-可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。使用进样器程序”-可以点击编辑”按钮进行进样程序编辑。点击确定”，进入下一画面。5、柱温箱参数设定:-在温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。并选中它，点击更多信息”键
5、，如图所示，选中与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。点击确定”，进入下一画面。6、VWD检测器参数设定:在波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm，在峰宽(响应时间)”下方点击下拉式箭头，选择合适的响应时间,如0.1min(2s)。G1314B:最快采样速率13.74HZ。在时间表”中可以插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。点击确定”，进入下一画面。7、DAD检测器参数设定:检测波长:254nm，带宽=4nm，参比波长=360nm，带宽=100nm;检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽：一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近
6、样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。峰宽（响应时间）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。狭缝-狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。10、在 运行时选项表”中，选中 数据采集”，点击确定”。11、从方法”菜单，选中方法另存为”，输入一方法名，如测试”，点击确定”。-12、从视图”菜单中，选中在线信号”，选中信号窗口1”，然后点击改变”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击确定”。(如同时检测二个信号，则重复10，选中信号窗口2”。)13、从运行控制”菜单中，选择样品信息”选项
7、，如下图所示，输入操作者名称，如安装工程师”；在数据文件”中选择手动”或前缀/计数器”。区别:手动-每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。前缀/计数器-前缀”框中输入前缀，在计数器”框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001，vwd数据0002。14、点击确定”，从仪器”菜单选择启动系统”。15、等仪器准备好，基线平稳，从运行控制”菜单中选择运行方法”，进样。(若无自动进样器，则基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。)（三）、数据分析方法编辑:1、从视图”菜单中，点击数据分析”进入数据分析画面。2、从文件”菜单选择调用信号”，选中您的数据文件名，如下
8、图所示。点击 确定”，则数据被调出。3、做谱图优化：从图形”菜单中选择信号选项”，如下图所示。从范围”中选择满量程”或自动量程”及合适的时间范围或选择自定义量程”调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击 确定”。4、积分:从积分”菜单中选择积分事件”选项，如下图所示。选择合-适的斜率灵敏度”，峰宽”，最小峰面积”，最小峰高”。从积分”菜单中选择积分”选项，则数据被积分。如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。点击左边”图标，将积分参数存入方法。5、打印报告:从报告”菜单中选择设定报告”选项。点击定量结果”框右侧的黑三角，选中面积百分比”，其它选项不变。点击 确定”。从报告”菜单
9、中选择打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击报告”底部的打印”钮。(五)、关机:1、关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。2、退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机（用shut down关）。3、关闭Agilent 1200各模块电源开关。(六)、Agilent 1200 LC维护保养：1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（乙睛/甲醇适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。2、手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口。3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。4、带seal-wash的 1200，要配制90%水+10%异丙醇，开启seal-wash清洗泵，溶剂不能干涸。
安捷伦1200标准操作规程26223
