病理解剖实验课总结

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1、病理解剖实验课总结班级:动检 102学号:21姓名:刘林病理剖解及其切片制作体会一鸡的尸体剖检活鸡,先检查外观与症状,尤其头爪部是否有异常和外寄生虫。 用水浸泡尸体,打湿鸡毛后再进行剖检。剪开一侧嘴角,检查口腔,注意舌,咽,喉,上腭裂和口腔黏膜病变从嘴侧切口沿颈部纵轴切开颈部皮肤,检查胸腺,食管和气管外观以及两侧 迷走神经纵行切开食管,嗉囊,咽喉和气管,注意内容物性状,气味,色泽和黏膜病 变在眼与鼻孔之间用骨剪横断上啄,检查鼻腔,暴露眶下窦开口前端用灭菌 剪刀沿开口作侧面纵向剪开窦外壁,检查窦内容物切开大腿与腹部之间皮肤,将大腿向外侧转动,使髋关节脱臼从腿内侧切 开皮肤,并加以剥离,暴露腿内侧

2、肌群与膝关节横切腹部皮肤与两侧切口相连,腹部皮肤往后翻开,再沿龙骨嵴切开胸部皮 肤,向两侧剥离翻开,暴露并检查腹肌与胸肌体腔剖开:胸骨后端至泄殖孔纵行切开腹壁,注意腹水情况沿肋弓切开腹 壁,注意腹气囊 的检查然后,在胸骨两侧与肋软骨连接处,自后向前剪 断肋骨,再用骨剪剪断乌啄骨和锁骨,手握龙骨向前上方拉,揭开胸骨,割 离肝,心与胸骨联系即可暴露胸腔注意胸气囊的检查10.在不触及的情况下,先原位检查内胀11.检查胰腺后,在腺胃前沿剪断食管切断肠系膜,将整个胃肠道往后翻拉,横切直肠,取下胃肠道,用剪纵向切开肠检查剥离心,肝,脾并作相应检查 剥离卵巢和输卵管,纵向切开检查 肾和输尿管一般作原位检查肺

3、从肋骨间翻向外侧,再进行检查在第一肋骨基部与最后颈椎间检查臂神经丛,在腿部剥离内收肌后检查坐骨神经,用钝剥离法在骨盆腔内去除肾中叶表层部分即可检查腰荐神经丛17.用骨刀纵切股骨检查骨髓,切开胫骨近端骨骺,检查软骨骨化情况18.剥离头部皮肤,在头顶骨中线作十字切开,用骨剪去除顶骨,分离脑与周围 联系,取出脑检查,注意脑膜与实质病变19.法氏囊位于泄殖腔背侧将直肠后拉即可见圆形法氏囊,可原位切开检查二1.2.3.4.5.6.7.8.9.12.13.14.15.16.尸体剖检过程中器官检查要点:1体表注意营养状况,皮肤上有否外伤,痘诊,脓痂和可视黏膜色彩等.2食管内注意黏膜型禽痘,霉菌斑和其他病变.

4、3食管内注意是否有异物,黏膜创伤和微小的结节等.4纵切气管检查黏膜状况,是否有出血,黏液和干酪样物等.5切开嗉囊,注意内容物是否硬实阻塞或异常气味,轻轻冲洗后检查是否有 霉菌病变6剖开体腔(胸腔,腹腔和心包腔)时注意是否有积液,器官的位置是否正常,并及时检查气囊壁是否透明,有病变是常常呈现混浊增厚7检查心,肝脾,肺和支气管,是否有明显异常病变,如结节,小点坏死, 出血等8检查肠道有无结节,肿块,肠腔内有无出血,寄生虫,黏膜溃疡和肠内容 物性状等9注意盲肠内容物性状,是否出血和肠壁上有无小结节,肿块以及寄生虫 等10切开腺胃检查黏膜是否出血和肿物生长,切开肌胃注意肌组织是否有坏 死和黏膜糜烂11

5、. 检查卵巢是否有卵泡变性,出血,肿物,输卵管,肾胀等有无异常注 意鸡白痢杆菌病,传染性支气管炎,卵巢炎等病变12 .检查腰荐神经丛是否有肿大增粗等病变注意鸡马立克氏病.13.检查胸腺,盲肠扁桃体和法氏囊等免疫器官,注意其发育状况和病变. 14检查腿部长骨和关节,是否有骨骼生长障碍和关节炎等病变.15.剖开颅腔,取出大脑,小脑,注意是否有出血和液化坏死等 三组织切片制作方法及注意事项;石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、 脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻 片标本需要数日,但标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。 1石蜡切

6、片制作各步骤的注意事项11取材 应根据要求选取材料来源及部位。 取材不当易造成人为挤压组 织以至组织成分难辨,因此取材要避开脂肪组织、坏死组织或血块;取材时应 用锋利的刀、剪,刀刃宜薄而长。切取组织时一般从刀的根部开始向后拉动切 开组织,避免用钝刀前后拉动或用力挤压组织。用镊子夹取组织时动作应轻柔, 不宜过度用力,应避免使用有齿 镊,否则会挫伤或挤压组织,引起组织结构 的挤压变形和损伤。 12 固定 用适当的化学药液固定液浸渍切成 小块的新鲜材料,迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切 代谢过程、防止细胞自溶或组织变化,尽可能保持其活体时的结构。固定能使 组织硬化,有利于切片的进

7、行,而且也有媒浸作用,有利于组织着色。 固定 操作要求:固定液量:为标本总体积的15倍;固定时间:小标本如小鼠、大 鼠等动物的组织器官比较柔软细嫩,应将整个内脏器官投入固定液中整体固定 4_6h,待组织稍硬化后再取材;其它动物脏器离体后可立刻取材,取好的 组织立刻投入固定液中固定组织6一121组织块取材大小以5mmx5m mx3m m为宜。固定时要注意组织在固定液中的位置,并且随时翻动组织, 使其充分固定。 组织固定过程中如果固定液变为深棕色或红色应更换固定 液。13洗涤与脱水 固定后的组织材料需除去留在组织内的 固定液及其结晶 沉淀,否则会影响以后的染色效果。多数用流水冲洗;使用含有苦味酸的

8、固定 液固定的则需用酒精多次浸洗;如果组织经酒精或酒精混合液固定,则不必洗 涤,可直接进行脱水。脱水容易出现的问题主要是脱水不净和过度硬化,要控 制过度硬化只需调整好各步骤的脱水时间。若组织脱水不净时,造成随后的透 明和浸蜡过程中二甲苯和石蜡液无法渗入组织,所以应保证脱水液的浓度,并 经常更换新液。脱水时间长短应根据组织厚度,组织较薄或小,组织厚度大时相对要求时间长些。透明要求在肉眼观察组织呈棕黄色或暗红色透明状(琥珀 样)即可。14透明 纯酒精不能与石蜡相溶,还需用能与酒精和石蜡相溶的媒浸液, 替换出组织内的酒精。材料块在这类媒浸液中浸渍,出现透明状态,此液即称 透明剂,透明剂浸渍过程称透明

9、。透明时要注意:要保证最后一级纯酒的浓 度,使组织彻底脱水,否则在二甲苯内就不能得到完全透明。切片从纯酒取 出后进入二甲苯时,在空气中停留的时间不宜过长,特别是在阴天,空气湿度 较大时,因纯酒吸水性较强,致使切片进入二甲苯时其表面出现雾状而使切片 透明不良。15浸蜡与包埋 用石蜡取代透明剂,使石蜡浸入组织而起支 持作用。浸蜡要求掌握时间,过短石蜡没有完全渗入组织中,会出现组织过软, 切片困难。过长会造成组织硬脆,切片也难。组织包埋时要掌握好标本切面, 选择较完整平坦面为切面,切面朝下。小标本包埋速度应快,否则易造成组织 块与周围石蜡的脱裂,包埋好的蜡块放置6C冰箱中过夜,便于切片。16切片包埋

10、好的蜡块用刀片修成规整的方形或长方形,以少许热蜡液将 其底部迅速贴附于小木块上,夹在轮转式切片机的蜡块钳内,使蜡块切面与切 片刀刃平行,旋紧。切片刀不锋利和切片机性能较差会严重影响切片质量。切 片刀要求锋利且无缺口,切片自行卷起多由切片刀不锋利所致。刀有缺口时, 易造成断裂、破碎和不完整。切片时组织块固定不牢时,切片上常形成横纹及 切片厚薄不均。在夏季切片时,为保持蜡块硬度,可把蜡块放于冰箱中,切时 取出,组织 蜡块四周在切片前应修齐。轮转式切片机切取组织时是由下向上 切,为得到完整的切片,防止组织出现刀纹、裂缝,应将组织硬脆难切的部分 放在上端如皮肤组织应将表皮部分向上而胃肠组织浆膜面朝上)

11、,保证切片的完 整性。对于组织结构致密的组织如淋巴结等应适当薄切以防细胞成分叠加,影 响观察效果。遇到硬化过度的肝、脾、脑等组织时应轻轻切削,以防组织由于 震动产生空洞现象。切片过程中的常见问题和处理方法:(1)切片不成带常见原因:切片刀不够锋利。切片刀与蜡块的角度不当。 蜡块四周留蜡边太少。石蜡硬度过大,黏度不够。解决方法:重新磨刀。 调整切片刀的角度。可重新包埋或将蜡块四周熔化,再放人包埋框中补蜡, 修理蜡块时组织块周围保留的石蜡以2mm左右为宜。蜡块过硬可适当加些 蜂蜡,或更换熔 点较低的石蜡重新包埋。将蜡块放入冰箱内延长 冰冻时 间,然后迅速切片。(2)切片弯曲常见原因:组织成分及形状

12、不规则。蜡块上下或左右两边不 平行。蜡块与切片刀刀口不平行。切片刀各处的锋利程度不一致。解决方 法:修整组织块时,注意修切整齐,切成方形或矩形,尽量不要切成三角形。 将蜡块四边反复修平对称。调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。移动 切片刀,更换刀口位置。(3)切片上出现裂纹常见原因:切片刀上有小缺口,或刀口不平 整。 刀口上粘附有细微纤维(如毛发、纸或布丝等物)。组织过硬变脆(如凝血块、 胶冻样物质、囊腺瘤、甲状腺、腺瘤等)。组织中可能含有较硬之物质,如固 定液之结晶石灰质。裱片的水温 太高。包埋时石蜡冻结太慢。解决方法: 切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整, 可

13、先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀。擦净刀口。适 当减少脱水、透明、浸蜡时间。组织中硬性物质太多,则不宜用。裱片的水温以4 5C左右为宜。包埋时待蜡块周围凝结一层,即放入冷水中。(4) 切片厚薄不均常见原因:脱水、透明、浸蜡过度、时间过长、温度过高。蜡块太大,过硬,转动时刀刃受震动。切片微动部分失灵,齿轮跳 格。解决方法:调整脱水、透明、浸蜡时间和温度。如蜡块过大,以后取材时注意取材的大小。蜡块组织过硬,可返回水中浸泡,再重新脱水和包埋。 修理切片机失灵的部分,调整螺旋,加机油润滑零件,必要时需请专业技 术人员调整切片机。(5) 切片皱褶常见原因:石蜡太软或室温过高。切片刀上粘有

14、残余的石 蜡,刀口不干净。组织浸蜡时间不够,或脱水、透明不够。切片刀不锋利。 裱片的水温过高或过低。解决方法:可将蜡块放人冰箱中冰冻后切片,并 在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如室温过高,可开空调降低室温。 切片刀不干净,可用棉花沾少许二甲苯将刀口拭干净。重复浸蜡过程或延 长脱水、透明时间。将切片刀磨锐利再行切片。裱片的水温以4 5C为宜。 组织蜡带先放入35%的漂片酒精中,再捞出放人温水中可预防皱褶。(6) 切片粘刀常见原因:切片时有静电作用,产生静电吸引,在冬季或气候 干燥时常出现这种情况。解决方法:可用加湿器,以增加空气中的水分,而 减少静电作用。把卫生纸用凉水浸湿后围在切片机操作

15、台,可以在切片机台 周围形成静电屏蔽。把展片时所用毛笔在湿纸上进行蜡屑清理。(7) 切片脱落常见原因:取材太厚或组织含血成分多、脂肪多。组织固 定不佳,脱水、透明不彻底,致使石蜡无法浸入组织内。组织脱水透明过度, 浸蜡时间过长或温度过高,引起组织收缩硬脆。载玻片清洗得不洁净。用 急水冲洗或震荡过于剧烈。染液或试剂的酸碱度不适宜或停留时间较久。 烤片时间过短、温度过低或时间长、温度过高。石蜡、二甲苯使用时间过久。 解决方法:取材不能太厚,厚薄适中。按组织大小厚薄选择固定、脱水、 透明时间。或者在不影响诊断的原则下将组织重新脱水。先用温水润泽,再 用冰硬化,然后再切片。彻底清洁载玻片,使之成中性。

16、1.7贴片与烤片 用粘附剂将展平的蜡片牢附于载玻片上,以免在以后的脱 蜡、水化及染色等步骤中二者滑脱开。粘附剂是蛋白甘油。 首先在洁净的载 玻片上涂抹薄层蛋白甘油,再将一定长度蜡带中展平后,捞至玻片上铺正,或 直接滴两滴蒸馏水于载玻片上,再把蜡片放于水滴上,略加温使蜡片铺展,最 后用滤纸吸除多余水分。18切片脱蜡及水化干燥后的切片需脱蜡及水化才能在水溶性染液中进行 染色。 用二甲苯脱蜡,再逐级经纯酒精及梯度酒精直至蒸馏水。如果染料配 制于酒精中,则将切片移至与酒精近似浓度时,即可染色。19染色 染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观 察。未经染色的细胞组织其折光率相似,不易辨

17、认。经染色可显示细胞内不同 的细胞器及内含物以及不同类型的细胞组织。染色时要注意三点,(1)染色时最好用显微镜观察,以便及时纠正。(2)酸 酒分化要掌握好时间,过短,核着色过深,过长,核着色发灰。返蓝时最好不 用弱碱水,而用温水返蓝510m in即可,这样可避免切片褪色,以利于切片长久保存。(3) 切片染色时要彻底脱蜡,冬季室温较低,一定要延长脱蜡时 间,以 免出现组织灶状着色不良。1.10切片脱水、透明和封片 染色后的切片尚不能在显微镜下观察,需经 梯度酒精脱水,在9 5%及纯酒精中的时间可 适当加长以保证脱水彻底;如 染液为酒精配制,则应缩短在酒精中的时间,以免脱色。二甲苯透明后,迅速 擦去材料周围 多余液体,滴加适量中性树胶,再将洁净盖玻片倾斜放下,以 免出现气泡,封片后即制成永久性玻片标本,在光镜下可长期反复观察。切片 封固不良,易出现色素颗粒、气泡、云雾状物等。其原因大致为:封固时二甲 苯已挥发完毕;封固剂过稀;切片厚薄不匀;切片未展开;封固方法不当;组 织脱水不净等。故在封固前,当二甲苯挥发后应重新放人到二甲苯中透明,封 固 剂浓度要适当,封固时先将盖玻片一侧放置于滴有树胶的组织切片上,然 后缓慢放下将空气完全排除避免产生气泡。

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