水样中总DNA得提取

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1、水样中总 DNA 得提取1、抽滤浓缩的菌体样品在室温下解冻，用蒸馏水重悬，再离心（可重复多次，有助于去除 细胞表面或者细胞外膜的酸碱物质）。2、配制 30mg/ml 的溶菌酶溶液（buffer： 20mM Tris-HCI, pH8.0； 2mM EDTA,pH8.0;1.2%Triton）。3、 视菌体多少加入适量的配制好的溶菌酶溶液和适量的RNA酶溶液，37C孵育30min或 者更长时间。4、加入等体积的2*蛋白酶K反应缓冲液，混匀后加入蛋白酶K至终浓度50-200ug/ml, 65-70C 反应 30min 或者更长时间（每隔数分钟混匀液体,观察反应液至澄清即可）。5、加入与第四步离心管

2、液体等体积的酚：氯仿：异戊醇=25:24:1，混匀（动作轻柔，以免 打断DNA，也可以轻微震荡混匀）。6、微量离心机最大转速离心5-10min,转移上层水相至一干净的离心管。7、重复第六步（可选）。8、 加入1/10体积的第六步或者第七步3M NaAC （pH5.2），混匀后再加入2-2.5倍体积冰预 冷的无水乙醇，混匀置-20C 2h或者-80C 30min。9、取出离心管，最大转数离心，弃上清，用冰预冷的70%的乙醇洗涤一次，弃上清，置室 温至乙醇完全挥发。10、加入50-200ul的TE buffer。如果是不用保存很长时间的样品，建议用10mM Tris-HCl （pH8.0）溶解 DNA。