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1、总黄酮含量的测定、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、 粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、lOOmL烧瓶、10mL离心管 10个、试管架2个二、药品芦丁标准品40mg、无水乙醇lOOOmL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g三、实验步骤（一）、标准曲线绘制1. 芦丁标准品40mg置于称量瓶中80C烘干至恒重，取烘干后的20mg芦丁标准 品用水定容至lOOmL,得200pg/mL芦丁标准贮备液，精确量取上述浓度芦丁标 准贮备溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL分别置于10 mL具塞试管 中。2
2、. 向具塞试管中分别加60乙醇5、 4.8、 4.6、 4.2、 3.8、 3.4、 3.0 mL。3. 然后加5%亚硝酸钠0.3 mL,摇匀，静置6 min。4. 再加10%硝酸铝0.3 mL,摇匀，静置6 min。5. 加4%氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为横坐标，以吸光度为纵 坐标，绘制标准曲线。研究表明芦丁标准品含量在00.5mg范围内与吸光度具 有良好的线性关系。（二）、样品处理及总黄酮的提取 （以 60%乙醇提取为例）1. 将样品在80C烘干24 h,粉碎后过80目筛置于干燥器中备用。
3、2. 称取5002 mg样品于25 mL具塞三角瓶中，使样品位于三角瓶底部（重复 3 次）。3. 每瓶加4 mL 60%乙醇，放超声波提取器提取2 h。提取液转至10 mL具塞离 心管中。4. 再向具塞三角瓶中加4mL的60%乙醇，放超声波提取器提取1 h,提取液转 至相应10 mL具塞离心管中，6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应的10 mL具塞试管中。60%乙醇定容至10 mL，待测。（三）、样品提取液总黄酮含量的测定准确吸取总黄酮提取液（稀释适当倍数）2.0 mL 于 10 mL 具塞试管中，加入60%乙醇3.0 mL,然后按步骤一中（3,4,5,6）的方法测定吸光
4、度，试剂空白 为参比（提取溶剂代替提取液），将吸光度代入标准曲线计算样液的总黄酮含量。总酚含量的测定一、仪器紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、 超声波提取器、回流装置、10 mL具塞试管、25 mL具塞三角瓶、250 mL容量瓶二、药品没食子酸标准品lOOmg、无水碳酸钠500g、福林酚试剂100 mL三、实验步骤（一）、标准曲线绘制精确称量没食子酸标准品25 mg，用水溶解后定容于250 mL容量瓶中，得到 0.1 mg/mL的标准贮备溶液。分别移取没食子酸标准储备溶液0.00、0.25、0.50、 0.75、1.00、1.25、1.50 mL置于10
5、mL具塞试管中，分别加入福林-酚试剂1 mL， 摇匀后再分别加入质量分数12% Na CO溶液2 mL，用水定容至10 mL，摇匀。平行23三组。室温下避光反应1 h后，在765 nm波长下测定吸光度。以没食子酸标准溶 液的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，制作标准曲线，研究表明，没食子酸含 量在20120 ug范围内与吸光度具有良好的线性关系。（二）、样品总酚的提取以及样品总酚含量的测定 （以 60%乙醇提取为例）称取0.5g粉碎的样品于25 mL具塞三角瓶中，加入10 mL体积分数60%的 乙醇溶液，搅拌均匀，在超声波提取器中75C提取50 min。提取液以3000 r/min 离心20 min，取上清液，量取提取液体积，采用福林-酚比色法测定样品提取 液的总多酚浓度。吸取1.00 mL总多酚提取液（稀释适当倍数）于10 mL具塞试管中，分别加 入福林-酚试剂1 mL及质量分数为12%的碳酸钠溶液2 mL并用60%乙醇定容至刻 度，在室温下避光反应1 h,在765 nm波长处测定样品的吸光度，试剂空白为 参比（提取溶剂代替提取液），并根据工作曲线来计算提取液中总多酚含量。欢迎您的下载，资料仅供参考!致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习课件等等打造全网一站式需求
总黄酮、多酚含量的测定
