诊断学课件：临床常用免疫学检查

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1、临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查温州医科大学附属一院实验诊断中心温州医科大学附属一院实验诊断中心石石 亮亮概述：概述：n免疫学免疫学(Immunology)是研究免疫系统的结构与功能，是研究免疫系统的结构与功能，并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究，探讨有效的免疫措施，实现以防病、损伤机制的研究，探讨有效的免疫措施，实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。治病为目的的一门现代医学学科。临床免疫学检查临床免疫学检查常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等疾

2、病的诊断与疗变态反应性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等疾病的诊断与疗效监测。效监测。一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白（IgIg）的检测的检测v包括：包括：IgGIgG、A A、M M、D D、E E vIgIg的产生、结构与功能的产生、结构与功能 IgIg通常是指通常是指一组一组具有具有抗体活性抗体活性或或化学结构与抗体相似化学结构与抗体相似的球蛋白，由的球蛋白，由浆细胞浆细胞合成和分泌合成和分泌，有特异性识别，有特异性识别抗原的功能，但必须与抗原结合形抗原的功能，但必须与抗原结合形成免疫复合物后才能启动效应功能。成免疫复合物后才能启动效应功能。（一）（一）IgGIgGn含量含量：7.0-16.6g/L,

3、7.0-16.6g/L,占占70-8070-80(含量最多含量最多）n特点特点：再次免疫应答抗体再次免疫应答抗体、具抗菌、抗病毒活性，、具抗菌、抗病毒活性，能通过胎盘能通过胎盘n意义意义：感染（病毒、细菌）多克隆：感染（病毒、细菌）多克隆 免疫增殖免疫增殖病病、MMMM单克隆单克隆 减低：免疫缺陷、重链病、轻链病、肾病减低：免疫缺陷、重链病、轻链病、肾病（二）（二）IgAIgAn含量含量：0.7-3.5g/L0.7-3.5g/L，占，占10-1510-15n特点特点：分泌型（：分泌型（SIgASIgA)，局部粘膜抗感染功能局部粘膜抗感染功能 可存在于各种分泌物中可存在于各种分泌物中（初乳）血清

4、型（血清型（为单体，免疫作用弱）为单体，免疫作用弱）n意义意义：IgAIgA型型MMMM，SLESLE，类风关等，类风关等 反复呼吸道感染，非反复呼吸道感染，非IgAIgA免疫增殖病免疫增殖病(三）三）IgMIgMn含量含量：0.5-2.6g/L,0.5-2.6g/L,占占5-105-10n特点特点：为为五聚体五聚体，分子量最大的分子量最大的IgIg 如天然凝集素抗如天然凝集素抗A A、抗、抗B Bn意义意义：早期抗体，出现早早期抗体，出现早，消失快。，消失快。（四）（四）IgDIgD、IgEIgEnIgDIgD:含量低、作用不很明确含量低、作用不很明确 测定较难，测定较难，ELISAELIS

5、A法测定法测定nIgEIgE：含量最少，：含量最少，ELISAELISA法测定为法测定为0.1-0.9mg/L0.1-0.9mg/L 与变态反应、寄生虫病、皮肤过敏有关与变态反应、寄生虫病、皮肤过敏有关 二、补体二、补体（ComplementComplement，C C）的测定的测定n补体是存在血清及组织液中的一组补体是存在血清及组织液中的一组具有酶原活性具有酶原活性的糖蛋白，的糖蛋白，可溶解细胞，灭活病原体，清除免疫复合物可溶解细胞，灭活病原体，清除免疫复合物1.1.总补体活性总补体活性CH50CH50测定测定(complement hemolysis(complement hemolysi

6、s 50%50%）溶血素（抗体）致敏绵羊红细胞溶血素（抗体）致敏绵羊红细胞 补体补体 溶血溶血 溶血程度与补体正相关，为溶血程度与补体正相关，为S S形曲线。形曲线。正常参考值：正常参考值：50-100kU/L50-100kU/L意义：意义：减低常见于各种免疫复合物性疾病减低常见于各种免疫复合物性疾病溶血程度与补体含量的关系溶血程度与补体含量的关系2.2.补体补体C3C3与与C4C4测定测定n补体系统有补体系统有C1C1、2 2、C9C9及其它成分组成及其它成分组成nC3C3含量最高含量最高，是传统和旁路途径激活的关键，是传统和旁路途径激活的关键 含量含量:C3:0.8-1.5g/L:C3:0

7、.8-1.5g/L C4:0.2-0.6g/L C4:0.2-0.6g/L 补体测定的意义：补体测定的意义：炎症、肿瘤等：炎症、肿瘤等 ：肾炎、自身免疫病等：肾炎、自身免疫病等三、细胞免疫的测定三、细胞免疫的测定 T T细胞亚群的检测细胞亚群的检测 1.E1.E玫瑰花结形成试验（玫瑰花结形成试验（ERFT)ERFT)：检测：检测T T细胞数量细胞数量 原理：原理：T T细胞表面具细胞表面具SRBCSRBC受体受体 正常正常 58-7258-72左右左右 意义：意义：见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等 见于免疫缺陷性疾病等。见于免疫缺陷性疾病等。2.2.

8、淋巴细胞转化试验（淋巴细胞转化试验（LCT):LCT):检测检测T T细胞的生物学功能细胞的生物学功能 原理：淋原理：淋T T PHA PHA 淋母细胞淋母细胞 意义：意义：转化率降低，见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。转化率降低，见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。淋巴细胞亚群的分化抗原测定淋巴细胞亚群的分化抗原测定 (cluster differentiation CD)(cluster differentiation CD)T T细胞：细胞：CDCD3 3-总总T T标志标志 CDCD4 4-T-TH H标志标志(help T cell)(help T cell)CD CD8

9、8-Ts-Ts标志标志(suppressor T cell)(suppressor T cell)CDCD4 4/CD/CD8:8:T TH H/Ts/Ts，降低常见于，降低常见于AIDSAIDS。B B细胞：细胞：CDCD1919、CDCD2020、CDCD2222等等三、细胞免疫的测定三、细胞免疫的测定 细胞因子细胞因子(Cytokine,CK)(Cytokine,CK)测定测定 活化的免疫细胞分泌产生的免疫调节性小分子多肽。活化的免疫细胞分泌产生的免疫调节性小分子多肽。1.1.白介素白介素2 2（IL-2)IL-2)和和IL-2RIL-2R：白细胞介素白细胞介素（IL）多种细胞多种细胞产

10、生的能介导免疫细胞间的相互作用。产生的能介导免疫细胞间的相互作用。IL-2IL-2是由活化是由活化T T细胞产生，细胞产生，具有多向性作用的细胞因子具有多向性作用的细胞因子 2.2.肿瘤坏死因子（肿瘤坏死因子（TNF)TNF)：引起肿瘤组织出血、坏死和杀引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用。伤作用。3.3.干扰素（干扰素（IFN)IFN)：抗病毒、抗肿瘤作用抗病毒、抗肿瘤作用三、细胞免疫的测定三、细胞免疫的测定四、肿瘤标志物检测四、肿瘤标志物检测n肿瘤标志物肿瘤标志物（tumor marker)tumor marker)是指在肿瘤发是指在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或者是生和增殖

11、过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。包括蛋白由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。包括蛋白质类、糖类和酶类肿瘤标志物。质类、糖类和酶类肿瘤标志物。n肿瘤标志物检测的意义是：肿瘤标志物检测的意义是：高危人群的筛查、高危人群的筛查、辅助诊断、观察疗效和肿瘤复发检测以及判断预后。辅助诊断、观察疗效和肿瘤复发检测以及判断预后。肿瘤标志物介绍以下肿瘤标志物介绍以下6种种甲胎蛋白（甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（癌胚抗原（CEA）前列腺特异抗原（前列腺特异抗原（PSA）糖链抗原糖链抗原199（CA199）癌抗原癌抗原125（CA125）癌抗原癌抗原15-3（CA15-3

12、）1.1.甲胎蛋白（甲胎蛋白（-fetoprotein，AFP）n AFP是胎儿发育早期合成的一种糖蛋白是胎儿发育早期合成的一种糖蛋白(1球蛋白球蛋白)，分子量，分子量70kD，胎儿出生后不久即，胎儿出生后不久即逐渐消失。逐渐消失。n 参考值参考值：血清：血清25g/L300g/L，但有部分患者，但有部分患者AFP始终始终不升高；不升高；n 病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度可有不同程度的增高，但一般在的增高，但一般在300g/L以下；以下；n 生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤等升生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤等升高；高；n 妊

13、娠三个月后，血清妊娠三个月后，血清AFP含量开始升高，分娩后三周含量开始升高，分娩后三周恢复正常。若孕妇血清中恢复正常。若孕妇血清中AFP异常升高，应考虑有胎儿异常升高，应考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。神经管缺损畸形的可能性。参考值参考值：血清血清5.0g/L5.0g/L 临床意义临床意义：结肠癌结肠癌、直肠癌直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，转移性、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，转移性 恶性肿瘤也有不同程度的阳性率；在恶性肿瘤的随访，恶性肿瘤也有不同程度的阳性率；在恶性肿瘤的随访，病情监测，疗效评价等方面有重要价值。病情监测，疗效评价等方面有重要价值。肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝

14、炎、胰腺炎和肺肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺 部疾病也可有不同程度的升高；部疾病也可有不同程度的升高；吸烟者中有部分人吸烟者中有部分人CEACEA5g/L5g/L。2.2.癌胚抗原癌胚抗原（carcino-embryonic antigencarcino-embryonic antigen，CEACEA）3.3.前列腺特异抗原（前列腺特异抗原（PSAPSA）PSAPSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。在血清是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。在血清中中PSAPSA以两种生化形式存在以两种生化形式存在：一部分一部分(20%)(20%)是以低分子量是以低分子量(33

15、kD)(33kD)的的 游离游离PSAPSA（f-PSAf-PSA）形式存在；）形式存在；大部分大部分(80%)(80%)是以是以PSAPSA和和11抗糜蛋白酶、抗糜蛋白酶、2-2-巨球蛋白等结合的形式存在，巨球蛋白等结合的形式存在，称复合称复合PSA(cPSA(c-PSA)-PSA)。总总PSAPSA（t-PSAt-PSA）,包括血清中包括血清中f-PSAf-PSA和和c-PSAc-PSA。参考值：血清参考值：血清 t-PSA 4.0 g/L，f-PSA 0.25PSA 临床意义临床意义血清血清PSAPSA升高升高 前列腺癌患者前列腺癌患者升高，但大约升高，但大约25%25%患者，其患者，其

16、PSAPSA水平正常；而水平正常；而大约有大约有50%50%的良性前列腺疾病患者的良性前列腺疾病患者PSAPSA水平增高。为增加水平增高。为增加PSAPSA对对前列腺癌检测的敏感性和特异性，可使用前列腺癌检测的敏感性和特异性，可使用PSAPSA年龄特异性参考年龄特异性参考范围，范围，PSAPSA密度、密度、PSAPSA速率、速率、f-PSA/t-PSAf-PSA/t-PSA比值等；比值等；前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病，也可见血前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病，也可见血清清PSAPSA水平升高，故当水平升高，故当PSAPSA在在4.0g/L4.0g/L10.0g/L10.0g

17、/L的灰区时，的灰区时，须进行须进行f-PSAf-PSA和和 f-PSA/t-PSAf-PSA/t-PSA比值的测定。比值的测定。【注意事项】在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩，【注意事项】在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩，导尿等，将会导致血清导尿等，将会导致血清PSAPSA升高，应注意避免。升高，应注意避免。(二二)、糖脂类肿瘤标志物检测：、糖脂类肿瘤标志物检测：（1 1）糖链抗原）糖链抗原19-9(CA19-9)（3 3）糖链抗原）糖链抗原15-3(CA 15-3)（2 2）糖链抗原糖链抗原125 (CA 125)（1 1）糖链抗原）糖链抗原19-9(CA19-9)C

18、A19-9CA19-9是一种与胰腺癌，胆囊癌，是一种与胰腺癌，胆囊癌，结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物，又结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物，又称胃肠癌相关抗原。称胃肠癌相关抗原。参考值：血清参考值：血清CA199 37 kUCA199 37 kU/L/L 胰腺癌胰腺癌首选指标首选指标，血清，血清CA19-9CA19-9水平明显升高，尤其是胰腺水平明显升高，尤其是胰腺 癌晚期病人，血清癌晚期病人，血清CA 19-9CA 19-9浓度可达浓度可达4040万万kU/LkU/L，是重要的辅助诊，是重要的辅助诊 断指标；断指标；胆囊癌、胆管壶腹癌、胃癌、结肠癌时，血清胆囊癌、胆管壶腹癌、胃癌、结肠癌时，血清CA

19、19-9CA19-9水平明显升高。水平明显升高。胆囊癌、胆管壶腹癌阳性率约为胆囊癌、胆管壶腹癌阳性率约为85%85%，胃癌、结肠癌阳性率约为，胃癌、结肠癌阳性率约为40%40%；急性胰腺炎，胆囊炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，肝炎等急性胰腺炎，胆囊炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，肝炎等 疾病，疾病，CA 19-9CA 19-9也有不同程度的升高，注意与恶性肿瘤的鉴别。也有不同程度的升高，注意与恶性肿瘤的鉴别。（2 2）糖链抗原糖链抗原125 (CA 125)CA125CA125是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于卵是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内，对诊断巢肿瘤的上皮细胞内，对诊

20、断卵巢癌卵巢癌有较大临床有较大临床价值。价值。参考值参考值 ：血清：血清CA 125 CA 125 35kU/L35kU/L 卵巢癌卵巢癌，阳性率可达阳性率可达5090%。手术和化疗有效者。手术和化疗有效者CA 125CA 125水平很快水平很快 下降，若有复发，下降，若有复发，CA 125CA 125升高可先于临床症状出现之前。升高可先于临床症状出现之前。其他恶性肿瘤，如乳腺癌、胰腺癌、胃癌其他恶性肿瘤，如乳腺癌、胰腺癌、胃癌47%47%、肺癌、结肠直肠癌、肺癌、结肠直肠癌、其他妇科肿瘤等也有一定的阳性反应。其他妇科肿瘤等也有一定的阳性反应。非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎，卵巢囊肿，胰

21、腺炎，肝炎，非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎，卵巢囊肿，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也有不同程度升高。肝硬化等疾病也有不同程度升高。妊娠早期，妊娠早期，CA 125CA 125有升高。有升高。（3 3）糖链抗原）糖链抗原15-3(CA 15-3)CA15-3CA15-3是一种乳腺癌相关抗原，属糖蛋白，分子是一种乳腺癌相关抗原，属糖蛋白，分子量超过量超过400kD400kD，对，对乳腺癌乳腺癌有重要的辅助诊断作用。有重要的辅助诊断作用。参考值：血清参考值：血清CA15-3 25kU/LCA15-3 25kU/L 乳腺癌乳腺癌，但在乳腺癌的早期阳性率较低约为，但在乳腺癌的早期阳性率较低约为30%

22、30%，转移性，转移性 乳腺癌阳性率可达乳腺癌阳性率可达80%80%；其他恶性肿瘤，如肺癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢癌，子宫其他恶性肿瘤，如肺癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢癌，子宫 颈癌，原发性肝癌等，也有不同程度的阳性率；颈癌，原发性肝癌等，也有不同程度的阳性率；肝脏，胃肠道，肺，乳腺，卵巢等非恶性肿瘤疾病，阳性肝脏，胃肠道，肺，乳腺，卵巢等非恶性肿瘤疾病，阳性 率一般低于率一般低于10%10%。(三三)、肿瘤标志物的选择、肿瘤标志物的选择n选择特异性的肿瘤标志物或最佳组合选择特异性的肿瘤标志物或最佳组合n动态检测动态检测常用肿瘤标志物联合检测的临床应用常用肿瘤标志物联合检测的临床应用 肿瘤肿瘤 首选

23、标志物首选标志物 补充标志物补充标志物肺癌肺癌 NSE、CYFRA21-1 CEA、TPA、SCC、ACTH、降钙素、降钙素肝癌肝癌 AFP AFU、GT、CEA、ALP乳腺癌乳腺癌 CA15-3、CA549 CEA、hCG、降钙素、铁蛋白、降钙素、铁蛋白 胃癌胃癌 CA72-4 CEA、CA19-9、CA50前列腺癌前列腺癌 PSA f-PSA、c-PSA、PAP结肠直肠癌结肠直肠癌 CEA CA19-9、CA50 胰腺癌胰腺癌 CA19-9 CA50、CEA、CA125 卵巢癌卵巢癌 CA125 CEA、hCG、CA72-4 睾丸肿瘤睾丸肿瘤 AFP、hCG宫颈癌宫颈癌 SCC CEA、C

24、A125、TPA 膀胱癌膀胱癌 无无 TPA、CEA 骨髓瘤骨髓瘤 2-M、本周蛋白、本周蛋白 五、自身抗体检测五、自身抗体检测-自身免疫病自身免疫病是指免疫系统对自身成分的免疫耐是指免疫系统对自身成分的免疫耐受性减低或破坏，产生自身抗体损伤含有相应受性减低或破坏，产生自身抗体损伤含有相应自身抗原的组织器官而造成的疾病。自身抗原的组织器官而造成的疾病。是是变性变性IgGIgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中。主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中。主要为为IgM型。型。临床意义临床意义：类风湿性疾病时，类风湿性疾病时

25、，RFRF，阳性率，阳性率达达70-9070-90;其他自身免疫性疾病，其他自身免疫性疾病，RFRF亦亦 （一）类风湿因子（一）类风湿因子(rheumatoid factor，RF)1.ANA(antinuclear antibody):1.ANA(antinuclear antibody):指抗各种细胞核成分指抗各种细胞核成分的自身抗体，是血清中存在的一类和自身组织细胞的细胞核的自身抗体，是血清中存在的一类和自身组织细胞的细胞核发生反应的自身抗体的总称。发生反应的自身抗体的总称。无器官和种属特异性无器官和种属特异性 临床意义临床意义：SLESLE(未治疗的未治疗的)，阳性率达，阳性率达808

26、0一一100100，亦可见于其他自身免疫性疾病。，亦可见于其他自身免疫性疾病。（二）抗核抗体检测抗核抗体检测方法：抗核抗体检测方法：间接免疫荧光法（间接免疫荧光法（IIFIIF）均质型均质型核膜型核膜型颗粒型颗粒型核点型核点型抗着丝点型抗着丝点型 ENAENA抗体谱包括抗体谱包括抗抗SmSm、抗核糖体、抗、抗核糖体、抗ScL70ScL70、抗、抗JoJo1 1、抗抗SSBSSB、抗、抗SSASSA和抗和抗nRNPnRNP等的抗体。等的抗体。临床意义临床意义 抗抗SmSm抗体抗体：SLESLE的特异性标志之一的特异性标志之一 ，抗抗dsDNAdsDNA和抗和抗SmSm 抗体同时检测，可提高抗体同

27、时检测，可提高SLESLE的诊断率。的诊断率。抗抗SSASSA、SSBSSB抗体干燥综合征抗体干燥综合征 抗抗nRNPnRNP抗体抗体-混合性结缔组织病混合性结缔组织病 2.2.可提取性核抗原（可提取性核抗原（ENAENA）抗体谱的检测）抗体谱的检测2.2.抗双链抗双链DNADNA（double stranded-DNA,ds-DNA）抗体抗体n抗抗dsDNAdsDNA抗体靶抗原是细胞核中抗体靶抗原是细胞核中DNADNA的双螺旋的双螺旋结构。结构。n抗抗dsDNAdsDNA抗体是抗体是SLESLE患者的患者的特征性标志抗体特征性标志抗体。其抗体滴度与疾病的活动程度有相关性，抗其抗体滴度与疾病的

28、活动程度有相关性，抗体滴度的动态测定为监控治疗提供了有效的体滴度的动态测定为监控治疗提供了有效的实验室手段。实验室手段。n抗抗dsDNAdsDNA抗体诊断抗体诊断SLESLE的特异性可达的特异性可达95%95%100%100%，但其敏感性仅为，但其敏感性仅为30%30%50%50%，因此抗，因此抗dsDNAdsDNA抗体阴性不能排除抗体阴性不能排除SLESLE的诊断。的诊断。抗抗dsDNA抗体抗体SLESLE特异性抗体，与病情活动度相关。特异性抗体，与病情活动度相关。六、感染的免疫学检查（六、感染的免疫学检查（434434）(一一)、抗链球菌溶血素、抗链球菌溶血素“O”O”抗体（抗体（ASOA

29、SO）测定）测定 A A群溶血性链球菌群溶血性链球菌 意义：风湿、风湿性关节炎、风湿性心脏病、意义：风湿、风湿性关节炎、风湿性心脏病、急性肾小球肾炎时急性肾小球肾炎时 是利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人是利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验。伤寒血清中有无相应抗体的一种凝集试验。伤寒第三周第三周后阳性后阳性率达率达80%80%，初期阴性，初期阴性n 参考值参考值：H1:160H1:160，O1:80O1:80，副伤寒甲、乙、丙，副伤寒甲、乙、丙1:801:80n 临床意义临床意义：O O、H H均升高：伤寒均升高：伤寒 O O不高、不高、H H升

30、高：预防接种或回忆性反应升高：预防接种或回忆性反应 O O升高、升高、H H不高：感染早期或交叉反应不高：感染早期或交叉反应（二）、肥达氏反应（二）、肥达氏反应七、病毒性肝炎检测七、病毒性肝炎检测（P452)P452)（一）（一）甲型肝炎病毒甲型肝炎病毒标志物检测标志物检测 （二）（二）乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒病毒标志物检测病毒标志物检测（三）（三）丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒标志物检标志物检测测（四四）丁型肝炎病毒标志物检丁型肝炎病毒标志物检测测（五五）戊型肝炎病毒标志物检戊型肝炎病毒标志物检测测 （一）（一）甲型肝炎病毒甲型肝炎病毒标志物检测标志物检测 免疫学检测免疫学检测 特异性抗体检测特异

31、性抗体检测 IgMIgM抗体抗体 IgGIgG抗体抗体 HAVHAV抗原检测抗原检测 病原学检测病原学检测 病毒分离病毒分离 RT-PCR （二）（二）乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒病毒标志物检测病毒标志物检测乙型肝炎表面抗原（乙型肝炎表面抗原（HBsAgHBsAg）乙肝病毒前乙肝病毒前S1S1抗原抗原抗乙肝病毒前抗乙肝病毒前S1S1抗体抗体乙肝病毒前乙肝病毒前S2S2抗原抗原抗乙肝病毒前抗乙肝病毒前S2S2抗体抗体 乙型肝炎核心抗原（乙型肝炎核心抗原（HBcAgHBcAg）乙肝核心抗体乙肝核心抗体-IgM-IgM乙肝核心抗体乙肝核心抗体-IgG-IgG 乙型肝炎表面抗体（抗乙型肝炎表面抗体（抗-H

32、Bs-HBs）乙型肝炎乙型肝炎e e抗原（抗原（HBeAgHBeAg）乙型肝炎乙型肝炎e e抗体（抗抗体（抗-HBe-HBe）n1.1.最常用的检测项目最常用的检测项目 两对半两对半 测定方法：测定方法：ELISAELISA、放射免疫法（、放射免疫法（RIARIA）、发）、发光免疫法光免疫法 （二）（二）乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒病毒标志物检测病毒标志物检测2.2.乙肝乙肝DNADNA定量定量PCRPCR检测：检测：病毒复制的指标病毒复制的指标 （1）乙型肝炎的诊断乙型肝炎的诊断:急性急性HBV感染的诊断感染的诊断 提供直接证据提供直接证据 （2 2）抗病毒治疗方法及疗效评价：拉米夫定）抗病毒治

33、疗方法及疗效评价：拉米夫定(贺普丁）、干扰贺普丁）、干扰素治疗效果的主要指标。素治疗效果的主要指标。（3 3）分泌物传染性判断（乳汁等）分泌物传染性判断（乳汁等）（二）（二）乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒病毒标志物检测病毒标志物检测阴性：阴性：最低检测灵敏度最低检测灵敏度 拷贝拷贝/ml/ml（如（如:500500拷贝拷贝/ml/ml）阳性：阳性：具体数据拷贝具体数据拷贝/ml/ml（如：（如：5.0E+65.0E+6拷贝拷贝/ml)/ml)参考值：参考值：最低检测灵敏度最低检测灵敏度 拷贝拷贝/ml/ml结果的报告结果的报告（三）（三）丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒感染感染分子生物学检测分子生物学检测

34、RT-PCR：有助于早有助于早期诊断期诊断 免疫学检测免疫学检测 特异性抗体检测特异性抗体检测 抗抗HCV-IgMHCV-IgM抗体抗体 抗抗HCV-IgGHCV-IgG抗体抗体 （四）（四）丁型肝炎病毒丁型肝炎病毒感染感染（五）（五）戊型肝炎病毒戊型肝炎病毒感染感染HDV为缺陷病毒，需有为缺陷病毒，需有HBV的存在方能复制和传播的存在方能复制和传播实验室检查 病毒分离病毒分离 免疫学检查免疫学检查 分子生物学检测分子生物学检测Thank You Thank You for for Your AttentionYour Attention 两对半:nHBsAgHBsAg（表面抗原）：（表面抗原

35、）：存在于存在于DaneDane颗粒的表面的糖蛋白。颗粒的表面的糖蛋白。判断判断HBVHBV感染的指标之一感染的指标之一。n抗抗-HBs-HBs（表面抗体）：是一种（表面抗体）：是一种保护性抗体保护性抗体。是机体感染或接种乙。是机体感染或接种乙肝疫苗的标志。肝疫苗的标志。nHBeAgHBeAg（e e抗原）：抗原）：其阳性是乙型肝炎的重要标志，病情活动性其阳性是乙型肝炎的重要标志，病情活动性较强，传染性较大。较强，传染性较大。n抗抗-HBe-HBe（e e抗体）：抗抗体）：抗-HBe-HBe的出现意味着大部分的出现意味着大部分HBVHBV被消除，复制被消除，复制减少，传染性降低。减少，传染性降

36、低。n抗抗-HBc-HBc（核心抗体）：阳性者代表正在感染或以往感染过乙肝病（核心抗体）：阳性者代表正在感染或以往感染过乙肝病毒。毒。nHBcAg(核心抗原)：是乙肝病毒存在的直接标是乙肝病毒存在的直接标志，与志，与HBV复制呈正相关。存在于肝细胞内，血中检复制呈正相关。存在于肝细胞内，血中检测不出。测不出。n当肝细胞破坏当肝细胞破坏,HBcAg释放出来释放出来,被酶水解成被酶水解成HBeAg,所所以以HBeAg提示肝细胞损伤提示肝细胞损伤.HBeAg阳性标志着较强的阳性标志着较强的感染和传染性感染和传染性9种常见模式 1-过去和现在未感染过过去和现在未感染过HBVHBV。2-+(1)(1)既

37、往感染未能测出抗既往感染未能测出抗-HBs-HBs；(2)(2)恢复期恢复期HBsAgHBsAg已已消，消，抗抗-HBs-HBs尚未出现；尚未出现；3-+(1)(1)既往感染过既往感染过HBVHBV；(2)(2)急性急性HBVHBV感染恢复期；感染恢复期；(3)(3)抗抗HBsHBs出现前的窗口期出现前的窗口期 4-+-(1)(1)注射过乙肝疫苗有免疫；注射过乙肝疫苗有免疫；(2)(2)既往感染既往感染 5-+-+急性急性HBVHBV感染后康复。感染后康复。6+-+(1)(1)急性急性HBVHBV感染；感染；(2)(2)慢性慢性HBsAgHBsAg携带者；携带者；(3)(3)传染性弱。传染性弱

38、。7-+-+既往感染，仍有免疫力。既往感染，仍有免疫力。HBVHBV感染，恢复期。感染，恢复期。8+-+(1)(1)急性急性HBVHBV感染趋向恢复；感染趋向恢复；(2)(2)慢性慢性HBsAgHBsAg携带者；携带者；(3)(3)传染性弱。即俗称的传染性弱。即俗称的“小三阳小三阳”。9+-+-+急性或慢性乙型肝炎感染。提示急性或慢性乙型肝炎感染。提示HBVHBV复制，复制，传染强。传染强。即俗称的即俗称的“大三阳大三阳”。9种常见模式16种少见模式10+-(1)(1)急性急性HBVHBV感染早期感染早期,急性急性HBVHBV感染潜伏期；感染潜伏期；(2)(2)慢性慢性HBVHBV携带者，传染

39、性弱。携带者，传染性弱。11+-+-(1)(1)慢性慢性HBsAgHBsAg携带者易转阴；携带者易转阴；(2)(2)急性急性HBVHBV感染趋感染趋向恢复。向恢复。12+-+-急性急性HBVHBV感染早期或慢性携带者，传染性强。感染早期或慢性携带者，传染性强。13+-+(1)(1)急性急性HBVHBV感染趋向恢复；感染趋向恢复；(2)(2)慢性携带者。慢性携带者。14+-(1)(1)亚临床型亚临床型HBVHBV感染早期；感染早期；(2)(2)不同亚型不同亚型HBVHBV二次二次感染。感染。15+-+(1)(1)亚临床型亚临床型HBVHBV感染早期；感染早期；(2)(2)不同亚型不同亚型HBVH

40、BV二次二次感染。感染。16+-+-亚临床型或非典型性感染。亚临床型或非典型性感染。17+-+亚临床型或非典型性感染。亚临床型或非典型性感染。18+-+亚临床型或非典型性感染早期。亚临床型或非典型性感染早期。HBsAg免疫复免疫复合物，新的不同亚型感染。合物，新的不同亚型感染。19-+-(1)非典型性急性感染；非典型性急性感染；(2)见于抗见于抗-HBc出现之前出现之前的的 感染早期。感染早期。20-+-+非典型性急性感染。非典型性急性感染。16种少见模式 21-+急性急性HBV感染中期。感染中期。22-+-+-HBV感染后已恢复。感染后已恢复。23-+-非典型性或亚临床型非典型性或亚临床型HBV感染。感染。24-+-+非典型性或亚临床型非典型性或亚临床型HBV感染。感染。25-+-急性急性HBV感染趋向恢复。感染趋向恢复。16种少见模式n生产后13天内分泌的乳汁，叫做初乳 n初乳含有许多的免疫物质，其中具有抗病能力的免疫球蛋白含量比成熟乳高2040倍。