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1、内镜组织检查快速制片和诊断的体会【关键词】 内窥镜 活检 快速制片 在病理诊断日常工作中，各种内窥镜活组织检查日渐增多。为了适应现代临床快速诊断的需求，我们采用组织在温箱中固定、脱水、透明的方法，缩短了制片时间，保证了当天发出报告的工作效率，也方便了远途就诊的患者；同时加强改进了包埋、切片、染色等关键环节，使制片质量也能完全符合诊断的需求。1 材料与方法1.1 材料恒温干燥箱设定温度60,胃、肠镜等钳取的小块组织。1.2 方法1.2.1 恒温箱内标本处理程序将组织及编号一起放入盛有5 ml 95%酒精的小瓶中,并滴加少许伊红，置于温箱中的10 min，依次更换5 ml无水乙醇10 min、二甲
2、苯10 min、浸蜡20 min。1.2.2 包理按需观察的组织面朝下、先大块后小块地与切片刀平行一字水平排开包埋。待蜡块凝固后，修去组织周围的多余蜡，使之呈小的凸字形，以便使玻片上的切面更多些。1.2.3 切片采取多层面切片后，常规HE染色。2 结果 整个制片过程只需3 h左右，处理后的蜡块硬度适中，切片薄而完整，无皱折、挤压现象，组织结构清晰，染色效果良好，制片质量完全可与常规石蜡制片相媲美。3 讨论3.1 可操作性内镜活检组织脆嫩、体积又小，可在温箱中做快速石蜡切片之用，95%酒精同时具备固定和脱水作用，相应缩短了制片时间。该方法无需增加特殊设备，完全适宜于基层单位普及应用，也适用于宫颈
3、活检、鼻咽部活检等小组织检查。3.2 包埋首先，应辨认组织剖面方向，使黏膜面垂直于切片方向包埋，否则，可能无法看到上皮病变和病变全貌，而造成诊断困难。两种方法可协助识别黏膜面方向：附有黏膜肌层的长条状组织，经固定脱水后，平滑肌收缩明显，而使组织呈C字形，口朝黏膜肌方向。当组织呈较大的圆形时，一侧灰白，一侧灰暗，其中灰白光滑侧为黏膜面。必要时可辅以放大镜观察；其次，按先大后小的顺序包埋，是利用包埋框内的熔蜡逐渐凝固的特点，从而保证大小不等的组织块最大切面在同一平面上；平行切片刀一字水平排开包埋，更有利于切片时调整蜡块倾斜方向，避免了若成堆包埋时部分组织切不到或切不全的现象发生。3.3 切片因小块
4、组织每个切面所反映的病变信息相对较少，而具诊断意义的病变常出现在几个切面上，所以不同深度地多层切面十分重要，尤其当病灶微小、偏于一侧或病变不典型时，常能提高诊断的准确性，避免了重切增加工作量和对诊断的延误。3.4 染色优良的HE切片，是正确病理诊断的保证。工作中常遇到一些所谓疑难病例，大多数是由制片质量差而难以辩认病变性质所致。首先，应注意不要用吹风机代替烤片，以免造成组织受热不均脱片或灼伤使组织变性染色不均；其次，脱腊要充分，尤其在每年冬季，气候寒冷的11月份2月份，脱蜡时间要增加至5 min10 min，必要时加温处理；分化更需由操作者的经验来控制，难以用具体的时间长短来说明，着色过深，则
5、轮廓不清，着色过淡，则又模糊不清。因此，经验不足时，应随时以显微镜观察控制，使其着染适度，分化鲜明。3.5 诊断在日常诊断工作中，应注意以下几个问题：全面地观察切片。对于切片中所有组织，甚至一小堆细胞都不要遗漏观察，因为有的诊断线索就在这些微小的组织中。加强与临床的联系。遇到病理诊断与临床不一致时，首先要主动检查自己技术及诊断上有无差错，不要轻易否定临床意见。例如弥漫浸润型皮革胃，活检时因钳取不到浸润在黏膜下层的癌组织而出现假阴性，这时应结合内镜诊断印象，提出建议重取的必要性。严格控制恶性肿瘤的诊断标准。如在食管活检，尤其贲门齿状线附近炎症时，仅依靠鳞状上皮角的增生下延，忽视了细胞形态的无异型
6、性，诊断过激，误诊为原位癌而给患者带来不必要的治疗。不典型增生病变时，黏膜固有层内常有不同程度的淋巴细胞浸润，并随不典型增生程度的增加而增多，这是机体对肿瘤组织的免疫反应，常能起到提示作用。特别需指出的是，在结肠癌、直肠癌活检时，对未突破黏膜肌层的黏膜内癌可视为原位癌，理由是虽其固有膜中存在淋巴组织，但不会发生淋巴转移，其生物学行为等同于其他部位的原位癌，临床可采用内窥镜下肿瘤切除等保守的治疗3。【参考文献】 1王爱忠，金夏祥.胃镜活检组织制片程序的改良J.诊断病理学杂志，2004,11（6）：440.2王吾如.病理科主治医生734问M.北京：中国协和医科大学出版社，2000:6567.3虞积耀，丁华野.结肠、直肠癌活检病理诊断的探讨J.诊断病理学杂志，2005,12（1）：810.
内镜组织检查快速制片和诊断的体会
