新836版实验动物学复习题.pdf
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本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 一、 名词解释 1. 人类疾病动物模型 : 是指生物医学研究过程 中所建立起来的具有人类疾病模 拟表现的动物实验对象及相关实验材料。 2. 实验性动物模型 :是指研究者通过使用物理的、化学和生物的致病因素作用 于动物,造成动物组织、器官或全身一定的损害,出现某些类似人类疾病时 的功能、代谢或 毒使动物患相应的传染病,又如用化学致癌剂、放射线、致 癌病毒诱发动物的肿瘤等 。 3. 实验动物 : 是指经人工培育,对其携带的微生物实行控制;遗传背景明确或 来源清楚的,用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物 。 4. 实验用动物 :是指 所有 应 用于科学实验 的动物 , 包括实验动物 、 野生动物 、 经济动物 和 观赏动物 。 5. 近交系动物 : 又叫纯系动物。是采用同胞兄妹或亲子交配,连续繁殖 20 代以 上所培育出来的,遗传上达到高度一致的动物群。 6. 3R 原则 : 1 Reduction(减少)指在科学研究中,使用较少量的动物获取同样 多的试验数据或使用 定数量的地动物能获得更多实验数据的科学方法。 2 Replacement(替代)指使用其他方法而不用动物所进行的试验或其他研究 课题,以达到某 试验目的。或是使用没有知觉的试验材料代替以往使 用神 志清醒的活的脊椎动物进行试验的一种科学方法。 3 Refinement(优化)指在符合科学原则的基础上,通过改进条件,善待动 物,提高动物福利:或完善实验程序和改进实验技术,避免或减轻给动物造 成的与实验目的无关的疼痛和紧张不安的科学方法。 7. 无菌 动物 : 应用现有技术,在体内、外检测不出任何活的微生物和寄生虫的 动物。来源于无菌手术剖腹取胎,饲养在无菌隔离器内,人工喂乳或保姆代 养培育而成。 8. SPF 级动物 : 体内不存在特定病原微生物和寄生虫的 动物,简称 SPF 动物。 是指无传染病的健康动物。这 种动物都是来自无菌动物或悉生动物,转移到 屏障系统中饲养 和实验。 9. 隔离系统 : 无菌隔离系统是完全密封的,将药品、生物制品控制、并处理成 无菌状态。一个完整的操作过程可能需要若干个隔离器组成的系统来完成, 从而将整个流程与可能的污染源(如:周围的设备和操作者)彻底分开。 10. 清洁级动物 : 又称最低限度疾病动物 , 体内、外不携带人畜共患的病原体或 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 动物传染病病原的动物,不能带有体外寄生虫和大部分体内寄生虫。 11. 免疫缺陷动物 : 指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系 统组成成分缺陷的动物。 12. 转基因动物 : 将外源重组基因转染并 整合到动物受体细胞基因组中,从而形 成在体表达外源基因的动物,称为转基因动物。 二、 简答 1. 简述大鼠的给药方法(包括给药途径、常用给药量及其注意事项)? 答: 1 大鼠灌胃: a.大鼠灌胃是最常见的给药方法之一。大鼠灌胃是在清醒 状态下进行的,不需要麻醉。 b.大鼠一般灌胃量为 1ml/100g 体重,因此一般 大鼠灌入 2ml 是可以的。 c.大鼠灌胃时,右手持灌胃注射器,左手拇指和食 中二指相对,抓住大鼠颈部皮肤,使大鼠的头部和颈部及躯干呈一直线,不 需要固定大鼠的尾巴,就可以实施灌胃操作了 。 2 大鼠腹腔注射 : a.腹腔注射是常见的给药方式,尤其是在麻醉时。常见的 麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射 b.大鼠腹腔注射的给药容积一般为 5 10ml/kg。 c.腹腔注射时右手持注射器,左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴, 另外三个手指抓住大鼠的颈部,使大鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会 自然倒向胸部,防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻 柔,防止刺伤腹部器官。 3 大鼠尾静脉注射 : a.首先将大鼠固定,然后在注射前首先要让大鼠的血管 充盈。可以采用 75%的酒精棉 球擦拭的方法或者采用温水浸泡的方法。进针 时针头和血管呈 30o,针尖斜面朝上,轻轻挑刺入皮肤后针头立即和血管平行, 一般情况下一次就可以进入血管,可以将针头刺入血管一大半,轻轻回抽针 栓,有明显的回血,则可以推注药液。 b.注射结束后,轻轻拔出针头,可以 干燥的棉球压一下进针点,防止液体回漏。 2. 简述小鼠的给药方法(包括给药途径、常用给药量及其注意事项) ? 答: 1 小鼠灌胃:小鼠灌胃方法比较简单 需要 。需要注意两点: 一是要保持 小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入;二是动作要轻柔,从口角 进 入,防止损失食道。 灌胃容积一般是 0.1 0.2ml/10g,最大 0.35ml/10g,每 只小鼠的灌胃最大容积不超过 0.8ml。 2 小鼠腹腔注射 : a.腹腔注射是常见的给药方式,尤其是在麻醉时。常见的 麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射。 b.腹腔注射时右手持注射器,左手的小指 和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部,使小鼠的头部向 下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部,防止注射器刺入时损伤大肠、小 肠等器官。进针的动作要轻柔,防止刺伤腹部器官。 c.小鼠腹腔注射的给药 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 容积一般为 5 10ml/kg。 3 小鼠静脉注射 : 固定好小鼠 , 注射前首先要让小鼠的血管充盈。可以采用 75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用温水浸泡的方法。待血管充盈后,酒精 棉球擦拭后就可以进针了。针头和血管呈约 30 ,针尖斜面朝上,轻轻挑 刺 入皮肤后针头立即和血管平行,一般情况下一次就可以进入血管。 注射量为 0.05 0.1ml/10g 体重。 4 皮下注射给药: 将药液推入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收进入 血液循环的过程。作皮下注射常选项背或大腿内侧的皮肤。操作时,常规消 毒 注射部位皮肤,然后将皮肤提起,注射针头取一钝角角度刺入皮下,把针 头轻轻向左右摆动,易摆动则表示已刺入皮下,再轻轻抽吸,如无回血,可 缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻,以防止药 物外漏。注射量约为 0.1 0.3ml/10g 体重。 5 皮内注射给药: 将药液注入皮肤的表皮河真皮之间,观察皮肤血管的通透 性变化或皮内反应,接种、过敏实验等一般作皮内注射。先将注射部位的被 毛剪掉,局部常规消毒,左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧,在两指之间, 用结核菌素注射器连接 4.5 针头穿刺, 针头进入皮肤浅层,再向上挑起并梢 刺入,将药液注入皮内。注射后皮肤出现一白色小皮丘,而皮肤上的毛孔极 为明显。注射量为 0.1ml/次。 6 肌肉注射给药 : 小鼠体积小,肌肉少,很少采用肌肉注射。当给小鼠注射 不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时,采用肌肉注射。操作时 固定小 鼠, 用左手抓住小鼠的 1 条后肢,右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈 90 角迅速插入 1/4,注入药液,用药量不超 0.1ml/10g 体重 。 3. 实验动物和实验用动物的主要区别是什么? 答 : a.现代生物学实验中,实验动物是指根据实验 的需要,有目的,有计划 地进行人工饲养,繁殖及科学培育而成,供科学研究、教学,生产,检测等 方面使用的实验对象和材料。实验动物必须有明确的生物学特性和清楚的遗 传背景,并且是在对其身上的携带的微生物,寄生虫严格控制下培育和驯化 出来的。 b.有时我们 也用些野生动物、家禽、家畜和鱼类进行实验, 但由于 它们的遗传背景不清楚,或健康状况有差异,对刺激的酸碱度不同 等,造成 实验结果重复性和可靠性较差,只能称为实验用动物。 c.实验用动物不能与 实验动物等同,实验动物可包括在实验动物中,但在不是十分严格的情况下, 有时二者又互为通用。 4. 试举 3 例说明实验动物编号的方法主要有哪些? 答 : 1 颜料涂染: a.涂红色, 0.5%中性红或品红溶液。 b.涂染黄色, 35%苦 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 味酸溶液 c.黑色,煤焦油的酒精溶液 d.涂染咖啡色, 2%硝酸银溶液 标记时用毛笔或者棉签 蘸取上述溶液,在动物体的不同部位涂上斑点,以示 不同号码。编号的原则是:先左后右,从上到下。 2 烙印法:用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶解在酒精中的 黑墨,在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。 3 针刺法:用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水,在耳部,前后肢以及尾部 等处刺入皮下,在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠,豚鼠等。 在实验动物数量少的情况下,也可适用与家兔,狗等动物。 5. 小鼠、大鼠的最大安全采血量及最小致死采血量分别是多少? 答 : 最大安全采血量:指一次采血不会引起动物死亡或者严重威胁其健康的 采血量上限,通常为血容量的 10%15%,或者体重的 1%。 最小致死采血量 :指一次采血可引起动物死亡的最小采血量,通常为血容量 的 25%以上。 动物品种 最大安全采血量( ml) 最小致死采血量( ml) 小鼠 0.2 0.3 大鼠 1 2 6. 实验动物麻醉过量时,可以采取什么对策? 答 : 麻醉是动物手术中不可或缺的过程,由于动物的生理状态不同,有时会 产生麻醉过量的现象。造成呼吸或循环系统异常情况,此时应根据过量的程 度,采用不同的方式进行处理。 1 如果动物呼吸极慢而不规则,但血压和心搏仍正常时,可施行人工呼吸, 并给予苏醒剂。 2 如果动物呼吸停止,血压下降,但仍有心搏时,应迅速施行人工呼吸,同 时注射 50%的温热葡萄糖溶液, 1:10000 肾上腺素及苏醒 剂。 3 如果动物呼吸停止,而且心搏极弱或刚停止时,应用 5%CO2和 95%的混合 气体人工呼吸,进行心脏按摩,注射温热的生理盐水 。心搏恢复后,注射 50% 葡萄糖及苏醒剂。 7. 家兔消化系统的组成如何?有何结构为家兔独有? 答 : a.消化系统包括:口腔,咽喉,食道,胃,小肠(十二指肠,空肠,回 肠),大肠(盲肠,结肠,直肠),肛门。此外,还有肝脏,脾脏等。消化腺 分泌的消化液也参与消化,家兔的小肠很长,约为体长的八倍。 b.家兔回肠与盲肠相接处膨大形成一厚壁的圆囊,称圆小囊,这是家兔 所独有。 8. 简述 动物术后 的注意事项 ? 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 答 : 1 保温,全身麻醉后的动物体温降低,注意保暖。 2 术后护理,保持呼吸畅通,防窒息,在麻醉恢复期请勿放于高处以防止摔 伤;避免与动物近距离接触,以防止其神志不清时误伤实验人员;若动物术 后不能眨眼,应适当点眼药水,防止角膜干燥。 3 禁食禁水要求,术后应禁食禁水,直至吞咽功能完全恢复,一般至少需 23 个小时。 4 防止感染,术后应保持动物伤口干燥,防止水,尿液等污染伤口。 尽量避 免其舔、咬、抓、挠伤口,影响伤口愈合。 5 加强营养,补充蛋白质、维生素和矿物质等营养物质,以促进机体的恢复 和伤口的愈合。 6 复查,拆线 9. 实验动物分组中设置空白对照组 、假手术组 和 阳性 对照组的 意义 是什么? 答 : a. 空白对照就是对动物不施加任何处理,正常饲养;或者必要时给予蒸 馏水、生理盐水或其它药物的溶剂等。空白对照的设立就是为了突出正常动 物与造成疾病的动物之间有何差别 。 b. 用假手术组的目的是为了说明手术本身(严格来讲,手术本身就是一种创 伤, 也可视为一个干扰因素)不是引起统计学差别产生的原因,如果最后的 统计学结果说明正常组和假手术组有差别,那么我们就不能判定干扰组较于 正常组产生差别的原因是不是由于你的干扰因素引起的了。 c. 阳性对照组通常是 将模型动物给予一定的确实有效的药物加以处理,看看 其治疗效果如何,阳性对照药的目的,就是看在此模型状态下,药物是否对 之有效。 假如阳性对照药都没有效的话,那可能此模型或者给药方式有问题; 而阳性对照药有效,被测试的药物没有效,则说明被测药物不行。另一方面, 被测药物与阳性药物对 照,可看出孰优孰劣。因此,经此对比,可 以突出被 测药物的作用。但 并不是每一个实验都能找到阳性对照药,也不是每一个实 验都需要设置阳性对照组。 10. 家兔开胸后打开心包胸膜暴露心脏进行实验操作时,不需作人工呼吸的原因 是什么? 答 : 胸腔内构造与其他动物不同,胸腔中央由纵膈连于顶壁,底壁及后壁之 间将胸腔分为左右两部互不相通,纵膈由隔胸膜和纵膈胸膜两层纵隔膜组成。 肺被肋胸膜和肺胸膜隔开,心脏又被心包膜隔开。因此,开胸后打开心包胸 膜暴露心脏进行实验操作时,只要不弄破纵隔膜,动物不需要做人工呼吸。 11. 屏障系统用来饲养什么级别的实验动物,并简述实验操作人员 及物品出 入该 系 统的流程及注意事项? 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 答 : 1 屏障系统主要用于 SPF 级动物的饲育,有正压屏障构造,负压屏障构 造。屏障系统设施,要求与外界隔离,空气经三级过滤净化后才进入屏障设 施之内,空气洁净度 10000 级。除生物安全屏障系统为负压以外,通常应保 持为正压,且不低于 2050Pa;出风口没有防空气倒流装置。屏障系统没有 清洁和污染走廊,进入系统的笼具,饲料,饮水,垫料,器械等一切物品都 要经过严格的消毒处理,系统内的人员,物品和空气等采用单向固定的流通 路线,有呼吸系统疾病和皮肤病的人员不能进入系统内。结 构要求和进入系 统内的人,动物和物品的运行等与亚屏障系统基本相同,但要求更加严格。 2 物品: 开启传递窗外门向窗内喷消毒液向所传器材喷消毒液(表面消 毒要全面)放入待消毒器材喷消毒液关闭外门打开紫外线灯进行 15 分钟照射从屏障系统内侧关闭紫外线灯开启内门取出器材,方可在屏障 系统内侧使用。 实验人员进入: 先在入口登记脱掉屏障外区拖鞋一更脱去衣物进入二更 先用消毒清洗机消毒双手表面穿工作裤穿工作上衣带口罩把工作 上衣扎进工作裤内扎好颈口袖口戴手套用消毒清洗机 再次消毒手套表 面进入内缓冲间进入清洁走廊进入实验室工作 实验人员离开: 工作完毕后沿洁净走廊通过缓冲间,经污物走廊通道退出 区一更除去口罩手套,更换衣物穿开放区拖鞋,完成登记内容将工作 服分别放入相应的收集容器中再离开。 3 注意事项: a) 进入每一个区域要随手关门; b)严格遵守穿衣顺序; c)进入更衣间前必须注意个人卫生; d)个人物品要锁好,贵重物品禁止带入。 12. 在做药物毒性实验时选择实验动物应注意的四个要点。 答 : 1 尽量选择急性毒性反 应与人近似的动物 2 易于饲养,实验动物操作方便 3 繁殖生育力强,数目较大,能够保持供应。 4 价格较低,易于获得动物。 三、 问答 13. 请说明根据随机数据表如何将 12 只动物完全随机地分为 3 组 ? 答 : 设有小白鼠 12 只,试用随机数字表把它们分成三组。先将小白鼠按体重依次 编 为 1, 2 12 号,然后在随机数字表内任意确定一个起始点和走向。假定自随机数 字表第五行第一个数字开始,依横的方向抄录,得 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 55 59 56 35 64 38 54 82 46 22 31 62 43 09 90 等 15 个。现令能被 3 整除数归入 A 组,被 3 除余数为 1 的列入 B 组。剩下的列入 C 组 照上面的分配,结果可得 A 组有 1 只、 B 组有 6 只、 C 组有 5 只,而三组数目不均等。 如要使它相等,须把 B 组中两只以及 C 组中一只分配到 A 组中,应把 B 组的哪两只以 及 C 组的哪一只白鼠改变组别呢?一般采用的方法是仍在随机数字表第五行里继续抄 录一个数字 43,此数以 6 除之(因为归入 B 组的动物有 6 只故用 6 除之)得余数为 1, 于是我们把 B 组的第 1 个(即第 1 号白鼠)改归给 A 组,然后继续抄录一个数字 09, 此数除以 5(因为归入 B 组的动物现在剩下有 5 只故用 5 除之)得余数为 4,于是我们 把 B 组的第 4 个(即第 9 号白鼠)改归给 A 组;然后再抄录一个数字得 90,此数除以 5(因为归入 C 组动物有 5 只故用 5 除之)能整除故把 C 组的第 5 个(即第 12 号白鼠) 改归给 A 组经过这样调整以后,三组白鼠编号的分配如下: A 组 7 1 9 12 B 组 5 8 10 11 C 组 2 3 4 6 14. 实验动物标准化的主要研究内容是什么? 答 : 实验动物的标准化是指对实验动物从微生物质量和遗传学质量进行控制 a.按微生物学控制标准,即根据微生物的净 化程度及携带的寄生虫状况,将 实验动物分为四级:一级,普通动物;二级,清洁动物;三级, SPF 动物; 四级,无菌动物。 b.按遗传学控制标准即基因的纯合程度,实验动物分为近 交系、远交系和杂交群。 c.按微生物控制程度分类,实验动物的环境分为开 放系统、屏障系统和隔离系统。 d.对实验动物生产过程中营养进行控制也要 符合标准。 15. 实验动物选择的基本要求如何? 答 : 1 按 3R 原则要求选择实验动物, 3R 规则即减少动物用量、实验要精细、 尽量采用替代物 。 2 从微生物学和寄生虫学 标准去选择实验动物 。按具体实验目的,在普通级、 清洁级、 SPF 级和无菌动物中选择实验动物,尽量排除 干扰 , 有利于实验的 顺利进行和获得可靠的数据。 3 从遗传学的观点 上选择。 它包含了对实验动物遗传学的了解, 选择使用近 交系、突变系、封闭群、杂交系及转基因动物去进行试验。 4 选用与人的机能、代谢、机构和疾病特点相似的动物 。 5 选用解剖、生理特点符合实验目的要求的实验动物 。 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 16. 家兔在生物医学中的应用主要有哪些,它们都分别利用了家兔的哪 些生物生 理学特点? 答 : 1 发热研究及热源试验 。 家兔对热源物质反应灵敏,常规用于制药和药 检部门检查制品的热源。 2 在微生物学、免疫学和生物制品方面的应用 。 a. 家兔对多种微生物都非常 敏感 ,因此可建立天花、脑炎、狂犬病、慢性葡萄球菌骨髓炎和血吸虫、弓形 虫等病的动物模型,用于研究人体相应的疾病。 b. 抗原刺激机体后 ,家兔体液免疫应答反应强烈,被广泛用于制备高效价和特 异性强的免疫血清。 3 心血管疾病及肺心病的研究 。 家兔颈部神 经血管和胸腔很适合做急性心血 管实验;可以复制心血管病和肺心病的动物模型;家兔形成的高脂血症、主 动脉粥样硬化斑块、冠状动脉粥样硬化等病变与人类的病变极其相似 。 4 生殖生理及胚胎学研究 。 家兔属刺激性排卵,雄兔的交配动作或注射绒毛 膜促性腺激素 80100 单位均可诱发排卵,可准确判定排卵时间并容易取得 同期胚胎材料 ,也可用于避孕药研究中 ,观察药物对排卵的影响。 5 在其他方面的应用 。 a. 家兔的眼球大,便于进行手术操作和观察,是眼科 研究中最常用的动物。颈部颌 部血管分布类似人类,为观察牙髓 Arthus 反应 的敏感动物,可做口腔粘膜病、牙周病及整形材料毒性试验和唇裂、腭裂等 畸型的研究。 b. 常选用家兔进行化妆品对皮肤影响的研究;各种人用和畜用生物制品中的 毒素、类毒素等皮肤反应试验。 c. 家兔是复制糖尿病模型、快速性心律失常模型等人类疾病模型的常用实验 动物。 17. 比较 SPF 级与无菌实验动物在生物学特 点、饲养管理等方面的异同 ? 答 : 根据对实验动物所带生物体控制范围的不同,我国将实验动物群体分为 普通动物、清洁动物、 SPF 动物和无菌动物 四个等级。 SPF 动物 : SPF 动 物又称三级动物,除不带有普通动物、清洁动物应排 除的病原外,还应排除有潜在感染或条件性致病的病原,以及对科学实验干 扰大的病原。 这类动物是目前国际公认的标准级别的实验动物,适合于作所 有科研实验。 无菌动物 : 无菌动物属四级动物。无菌动物是指采用当前的手段无法检 出一切其他生命体。这类动物必须饲养于隔离环境内,饲料、饮水、笼具必 须严格灭菌,确保无菌。饲料中的营养成分必须齐全,满足无菌动物的需要, 特别是维生素类营养物质。无菌动物一定来源于剖腹产或无菌卵的孵化。无 本资料来源于男寝 836-袁斯远大神笔记 ,张琦 -修订 ,高阔 -审批 菌动物适合于作一些 特殊的研究试验 ,如病原研究、微生物之间关 系研究、 宿主与微生物之间关系研究、营养与代谢、抗肿瘤研究等 。- 配套讲稿:
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- 836 实验 动物学 复习题
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