维生素E含量测定方法

高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定色谱条件色谱柱：采用C柱（长150 mm,内径4.6mm，粒径4-5 rm）18流动相：甲醇（色谱醇）+水（去离子水）比例：（98 + 2）流速：1.2 ml/min检测波长:285 nm柱温：25±2 °C进样量：20 rL溶液制备标准溶液的制备：本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容 量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约0.1g（准确至0.0002）,置50mL 棕色量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。绘制标准曲线把制成2.008 mg/mL的溶液作为贮备液。分别准确移取0.5、1.25、2.5、3.75、5mL至 10mL的棕色量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；得到浓度分别为0.1004、0.251、0.502、0.753、 1.004mg/ml的五种溶液，分别经0.45 r m滤膜滤过,滤液作为标准溶液。用100r L的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60rL溶液，注意不能带有气 泡，注入液相色谱仪，按色谱条件操作，从0.10041.004mg/ml依次进样，记色谱峰面积 以标准品溶液浓度（C）为纵坐标,峰面积（A）为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。样品溶液的制备：维生素E粉样品溶液的制备制备步骤为：研磨f称量f水浴溶解f定容f过滤1. 研磨 把试样E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。2. 称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸 上，称取维生素E粉约1g（约相当于维生素E 0.5g，准确至0.0002g）,置50mL棕 色量瓶中。3. 水浴溶解 加甲醇适量，置超声波水浴器中助溶20 min。4. 移取定容 冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL 到10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，充分摇匀;再从制备好的10mL容量瓶中的 溶液中移取2.5mL放置到10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，充分摇匀。5. 过滤把制备好的溶液经0.45 r m滤膜滤过,滤液作为样品溶液。维生素E油样品溶液的制备用注射器直接抽取E油样品滴加到放在分析天平上的容量瓶中，称维生蕤油样品约 20mg,（准确至0.0002）,置50mL棕色容量瓶中，加甲醇适量溶解，置超声波水浴中助溶10min, 冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，充分摇匀；经0.45r m滤膜滤过,滤液作为样品溶液。测定步骤用100L的进样针抽取60rL的维生素E粉、E油的样品溶液，注入液相色谱仪，按色 谱条件操作，得到色谱峰面积（A），每批次样品溶液做三个平行样，根据标准曲线上各点的 峰面积（A/，用外标法计算。计算和结果的描述计算公式维生素E的含量X2以质量分数（%）表示v m XP XAX2=_ X100%i st式中：X2样品中维生素E的含量（% ）mst标准品的质量（g）mi样品的质量（g）P：t维生素E标准品的含量（% ）A：一样品溶液中维生素E的峰面积A：t标准溶液中维生素E的峰面积