PCR引物的设计学习教案

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1、会计学1PCR引物的设计引物的设计(shj)第一页，共18页。3355Sense primerAntisense primer第1页/共17页第二页，共18页。好坏与PCR结果密切相关。第2页/共17页第三页，共18页。第3页/共17页第四页，共18页。第4页/共17页第五页，共18页。nGC含量太高也易于引发非特异扩增。第5页/共17页第六页，共18页。到，这也是现有的引物设计软件最常用的计算(j sun)方式。n第6页/共17页第七页，共18页。延伸。第7页/共17页第八页，共18页。后一个碱基最好不与密码子第三个碱基配对。第8页/共17页第九页，共18页。基，人为地在产物中引入该位点的点

2、突变以作研究。n5端标记放射性元素或非放射性物质（如生物素、地高辛等）。第9页/共17页第十页，共18页。第10页/共17页第十一页，共18页。第11页/共17页第十二页，共18页。第12页/共17页第十三页，共18页。第13页/共17页第十四页，共18页。第14页/共17页第十五页，共18页。第15页/共17页第十六页，共18页。(b tn)作为引物第16页/共17页第十七页，共18页。NoImage内容(nirng)总结会计学。第4页/共17页。第5页/共17页。一般要求：55-65。对于低于20个碱基的引物，Tm值可根据Tm=4(G+C)+2(A+T)来粗略估算( sun)。尽可能避免两个引物分子之间3端有有较多碱基互补。特异性：避免非特异性扩增。引物Tm值与PCR产物Tm值相差一般不超过30。选择3端与非目的基因不同源的序列作为引物。选择两个引物3端与同一非目的基因不同源的序列作为引物。第16页/共17页第十八页，共18页。