第五部分动物细胞工程

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1、For personal use only in study and research; not forcommercial use动物细胞工程一、动物细胞培养1. 动物细胞培养的概念：从动物机体中取出相关的组织，将它 ，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞和。2. 动物细胞培养的过程3. 动物细胞培养的条件 无、无的环境a .对禾廿进行无菌处理；b. 添力口一定量的 ;c. 定期 营养有 等，另外还需要加入 等一些天然成分。 和哺乳动物多以 C为宜，多数细胞生存的最适 pH为。 环境细胞培养所需气体主要有 和, 是细胞代谢所必需的， CQ的主要作用是维持培养液的 。进行细胞培养时，通常采用

2、或培养瓶，将其置于含加的混合气体的培养箱中进行培养。4. 动物细胞培养技术的应用 大规模生产有重要价值的 ;女口：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。 为技术提供受体细胞； 检测; 用于生理、病理、药理等方面的 。如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1 动物核移植技术概念: 将动物一个细胞的 并发育成一个新的2.，移入一个已经_，这个新的胚胎最终发育成动物的细胞中，使其（克隆动物）。动物细胞核移植的原理：动物细胞核的动物细胞核移植的种类：细胞核移植（分性。3.化程度低，恢复其全能性相对 容易）细胞核移植（分化程度高，恢复其全能性相对 困难）

3、4. 体细胞核移植的过程：5. 体细胞核移植技术的应用前景：在畜牧生产中，可 以取供体动物体细胞f细胞培养&休细胞? 保护; 在医药卫生领域，转基因克隆动物可作为 ，生产许多珍贵的医用蛋白；转基因克隆动物的细胞、组织器官可以作为 ;人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化形成相应的组织、器官，可用于组织器官的 。 研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解 及过程；用克隆动物作，能使人们更好的追踪研究疾病的发展过程及治疗疾病。【巩固练习】1. 下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（）A .动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B. 动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C. 细胞的癌变发生于原代培养

4、向传代培养的过渡过程中D. 培养至50代后的传代细胞称为细胞株2. 一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（） 无毒的环境 无菌的环境 合成培养基需加血浆温度与动物体温相近需要。2,不需要CO2CO2能调培养液pHA .B .C.D .3动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于A .培养基不冋；B. 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；C. 动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D. 动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株。4一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三 只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 .（）

5、A .有选择地繁殖某一性别的家畜B .繁殖家畜中的优秀个体C.用于保存物种D.改变物种的基因型5. 从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状（）A .难以预测B .像甲C.像乙D .像丙6. 在进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是（ ）A .衰老退化的动物组织细胞B .成熟动物个体的体细胞C.动物的受精卵细胞D .动物胚胎或幼龄动物个体的细胞7. 下列关于动物细胞培养的叙述中，错误 .的是（ ）A .用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B. 将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散

6、成单个细胞C. 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D. 动物细胞培养只能传 50代左右，所培养的细胞都衰老死亡8. 在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（ ）A .使动物组织分散为单个细胞进行培养B .去掉细胞壁成为原生质体C.去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合D .促进蛋白质水解为多肽9. 离体的植物组织或细胞在适当培养条件下发育成完整的植株，离体动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体，原因是（）A .动物细胞内没有成套的遗传物质B. 动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能变弱C. 动物细胞的细胞核太小D. 动物细胞的全能性低于植物细胞10. 用于动物

7、细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（）A. 容易产生各种变异B.具有更强的全能性C.取材十分方便D.分裂增殖的能力强11 为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取来的动物组织应先用下列哪种物质处理（）A. 胃蛋白酶 B 胰蛋白酶 C 盐酸 D 胰脂肪酶12 用动、植物的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（）A. 都需用CO培养箱B.都须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D 都可体现细胞的全能性13 .在动物细胞培养中有部分细胞可以在培养条件下无限制地传代下去，称之为（）A .原代培养B .传代培养C.细

8、胞株 D .细胞系14 .下列关于细胞工程的叙述，不.正确的是（）A .电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B .去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D. 动植物细胞培养都需要经过脱分化处理15 .分析以下事实：（1 ）胡萝卜韧皮部细胞通过细胞培养能发育成完整植株。（2）绵羊乳腺细胞核移入去核卵母细胞中，能发育成有生殖能力的绵羊。基于以上事实，下列说法正确的是（） 高度分化的动植物细胞都具有全能性分化的动物细胞核具有全能性 分化细胞中不表达的基因仍然存在于细胞核，并没有消失 分化细胞中不表达的基因具有启动表达的

9、潜能A .B .C. D .16 .下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此完成后面的问题。（1） 容器A中放置的是动物器官或组织，它一般取自 。（2） 容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ，然后用酶处理，这是为了 。（3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有 等。在此瓶中培养一段时间后，有 许多细胞会衰老死亡，这时培养到第 代。（4）为了把B瓶中的细胞分装到 C瓶中，用处理，制成，再分装。答案：动物细胞工程常用技术：动物细胞培养（基础）、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体一、动物细胞培养1. 分散成单个细胞生长 增殖2 胰蛋白酶原代 传代3 .菌毒 a培养液 所有培养用具

10、b抗生素 c更换培养液 糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素血清、血浆 温度 PH 36.5+0.5 C 7.2-7.4 气体 0 2 C02 0 2 PH 培养皿 松盖 95% 空气 5%CO24. 生物制品基因工程有毒物质 研究二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1 .细胞核 去掉细胞核卵母 胚胎 个体2 .全能 3 .胚胎 体5. 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育濒危物种 生物反应器异种移植的供体移植胚胎发育 衰老疾病模型【巩固练习】1-5BDADB 6-10DDABD 11-15BCDDA16 (1)幼龄动物或动物胚胎(2)剪碎胰蛋白酶将动物组织分散成单个细胞(3) 糖、氨基酸

11、、促生长因子、无机盐、微量元素、血清、血浆50(4) 胰蛋白酶细胞悬液三、动物细胞融合1. 概念：也称，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2. 诱导动物细胞融合的方法：常见的诱导因素有、等。3. 意义：培养骨ss瘤细胞融會骨霸应ffl胸 突破了 ，使成为可能； 称为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段； 制造。四、单克隆抗体1 .单克隆抗体的概念由单个B淋巴细胞进行增殖形成细胞群，由学学 -专一抗体艳脸阳性克险杂交细胞这样的细胞群产生的化学性质单一、特异性 强的抗体称单克隆抗体。专一抗体檢能阳性2. 单克隆抗体的制备(如图)杂交瘤细胞的特点： 。甘开不同杂叠他临

12、，克隍专 t 一抗体.检验阳性细胞3. 单克隆抗体的应用。5射列小乱体内单克隆抗体最主要的优点在于它的、并可能。 作为;具有的优点。 用于和。生物导弹：把 的单克隆抗体跟 、或结合。【巩固练习】1.动物细胞工程技术的基础是（）A .动物细胞融合B .单克隆抗体C.胚胎移植D .动物细胞培养2科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗 体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A .经过免疫的 B淋巴细胞B .不经过免疫的 T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D .不经过免疫的 B淋巴细胞3用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误 .的是（）A 将抗原注入小鼠体内

13、，获得能产生抗体的B淋巴细胞B. 用纤维素酶处理 B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C. 用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体4. 只能使动物细胞融合的常用诱导方法是A. PEGB .灭活的病毒C .电刺激 D .离心5. 单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的A. B淋巴细胞 B . T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D .杂交瘤细胞6 .动物细胞融合和植物原生质体融合决定于B 细胞膜的选择透过性D.细胞质酶的活性A.细胞膜的流动性7.“生物导弹”是指A .单克隆抗体C.产生特定抗体的C.细胞质的流动性B

14、.杂交瘤细胞B淋巴细胞D .在单抗上连接抗癌药物骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后, 存活、增殖的细胞是（B淋巴细胞自身融合细胞C.的是要用特定培养基筛选出杂）小鼠骨髓瘤细胞自身融D .( )&单克隆抗体制备过程中， 交瘤细胞。在这种培养基上不能.B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞 合细胞杂交瘤细胞A .B .9.关于单克隆抗体，下列叙述不正确A .可以制成诊断盒.用于疾病的诊断C.可以利用基因工程技术生产B .可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗D .可以在生物体内生产，不能体外生产10 .单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT ）中无

15、法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在 HAT培养基上可 正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是（ ）A 骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B 脾细胞之间形成的融合细胞C.骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D 脾细胞11 研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B. 以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C. 抗癌物质在克隆细胞中大量合成D. 单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合12 .单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于（）A 单克隆抗体能够制成“生物导弹”B. 单克隆抗体能够在体外制备C. 单克隆抗体比血

16、清抗体的特异性强、免疫活性高D. 单克隆抗体制备过程简单13 .下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是（）A. B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B. 融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C. 体外培养时，一个效应 B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D. 单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显14 .下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：（1） 图中A过程是从小鼠的脾脏中取得 细胞，该细胞能够产生 从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射 。（2） B过程是过程，该过程的进行需要灭活的 或的诱导。（3）

17、 杂交瘤细胞的特点是 。（3）单克隆抗体与常规抗体相比，其特点是 。参考答案：三、1.细胞杂交 2。聚乙二醇（PEG 灭活的病毒 电激3 .有性杂交方法的局限远缘杂交单克隆抗体四、2.既能无限增殖，又能产生特异性抗体3 .特异性强、灵敏度高大量制备 诊断试剂 纯度高、特异性强 治疗疾病 运载药物 抗癌细胞放射性同位素化学药物细胞毒素【巩固练习】1-5 DABBD 6-10 ADADC 11-13 DBA14 （1）效应B特异性抗体 抗原（2）细胞融合 仙台病毒 聚乙二醇（3）既能无限增殖，又能产生特异抗体（ 4）特异性强、灵敏度高，并能大量制备以下无正文仅供个人用于学习、研究；不得用于商业用途

18、to员bkogA.nrogeHKO TOpMenob3ymoiflCH6yHeHuac egoB u HHuefigoHMucno 员 B3OBaTbCEb KOMMepqeckuxqe 员 ex.For personal use only in study and research; not for commercial use.Nur f u r den pers?nlichen f u r Studien, Forschung, zu kommerziellen Zwecken verwendet werden.Pour l e tude et la recherche uniquementa des fins personnelles; pasa des fins commerciales.For personal use only in study and research; not for commercial use