鹌鹑蛋清溶菌酶的分离纯化及其性质研究

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1、临床兽医学专业毕业论文 精品论文 鹌鹑蛋清溶菌酶的分离纯化及其性质研究关键词:鹌鹑蛋清 溶菌酶 分离纯化 体外抗茵活性摘要:为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌

2、酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋

3、清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。正文内容 为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯

4、化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶

5、菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球

6、菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分

7、子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对

8、部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终

9、溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,B

10、a2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利

11、用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明

12、该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森

13、菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采

14、用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗

15、菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌

16、鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH&

17、amp;lt;6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为12

18、5,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶

19、菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑

20、蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中

21、阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活

22、性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质

23、不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为

24、16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰

25、氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,纯度提高了25.9倍,去除了大部分杂蛋白,最终溶菌酶经

26、纯化比活达到14821.5U/mg,纯度提高了29.0倍,活力回收率为38。 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在1020其活性较低,30活性最高,4060活性下降,这表明该酶最适温度为30左右。在pH67近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<6.0)和偏碱性(pH>7.5)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、

27、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。 对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500g/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。特别提醒:正文内容由PDF文件转码生成,如您电脑未

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