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1、课时43：动物细胞工程.考纲要求：动物细胞培养与体细胞克隆 A级。细胞融合与单克隆抗体 A级。学习重点： 动物细胞培养的过程、条件；单克隆抗体的制备过程及其应用。学习难点： 动物细胞工程与植物细胞工程技术的比较。教学步骤：一、 课前自主学习1其它动物细胞工程技术的基础是 。2动物细胞培养的原理是 。用于培养的材料大多取自 或 。将离体的动物组织块分散成单个细胞需用 酶处理，原代培养后的细胞仍需用该酶处理分瓶实行 培养。一般分裂 代后的细胞，其核型可能发生变化，获得 性。3动物细胞培养时为了防止杂菌感染，需加入 ，为了防止有害代谢产物的影响，需要 ；加入的O2的作用是 ，CO2的作用是 。为了提
2、供一些未知成分，可加入 。4用核移植的方法得到的动物称为 。它的原理是 。核移植的受体细胞是处于 期的卵母细胞，供体细胞是 代以内的细胞，原因是 。胚胎细胞核移植较体细胞核移植容易的原因是 。5动物细胞融合的原理是 。动物细胞融合不同于植物原生质体融合的方法是 。动物细胞融合的主要用途是 。6单克隆抗体制备过程中的第一次筛选的目的是 ；第二次筛选的目的是 。杂交瘤细胞的特点是 。单克隆抗体的特点是 。二、课内互动学习（一）合作探究1.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，准确的是 （ ）诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞A. B. C. D.2
3、甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。相关叙述准确的是（ ） A过程注射相对应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲B过程诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性C过程、的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同D过程无论在体内还是体外实行，细胞丁都可大量增殖3.回答下列相关动物细胞培养的问题：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。（2）随着细胞传代次数的增多
4、，绝绝大部分细胞分裂停止，进而出现 的现象；但极少数细胞能够连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。（3）现用某种大分子染料，对细胞实行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 。（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜实行观察。（5）在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 实行攻击。4右图是制备分泌抗X抗体的过程，根据图解
5、回答问题：（1）给小鼠注射抗原的目的是_。（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_的特性。（3）由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了_ _和_的动物细胞工程技术手段，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用_。（4）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有_。（5）在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用_处理离体组织细胞使之分散开。（6）图中有两次筛选过程，其中步骤的目的是筛选出_，步骤的目的是筛选出_。（7）请根据以下信息，设计一方法（不
6、考虑机械方法），从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。方法： 。原理： 。（二）拓展延伸（三）小结与反思课外巩固练习43 班级 姓名 普及基础题1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述不正确的是 ()A都需用CO2培养箱 B都须用液体培养基C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性2对于下面制备单克隆抗体过程示意图，不正确的叙述是 ()A表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠
7、的脾脏中提取的B中的筛选是通过抗原抗体反应进行的C促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导D可以无限增殖3.一只羊的卵细胞的核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次卵裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术有多种用途，但是不能（ ） A有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体 C用于保存物种 D改变动物的基因型4.下列不属于动物细胞工程应用的是 （ ） A大规模生产干扰素，用于预防病毒引起的感染 B为大面积烧伤病人提供移植的皮肤细胞 C大规模生产食品添加剂、香料等 D利用胚胎移植技术，加快良种家畜的繁殖5.生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能筛选出
8、杂交瘤细胞，因为该试剂（ ） A能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制 B能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 D能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成6.关于动物细胞融合的叙述，不正确的是 （ ） A动物细胞融合时需人工诱导 B动物细胞融合时应先用纤维素酶处理 C动物细胞融合时存在细胞核的融合 D该技术的主要用途是制备单克隆抗体巩固提高题7下图是制备抗体的两个途径的模式图，下列叙述正确的是（多选） （） A图中获得的抗体1和抗体2结构完全相同B抗体1和抗体2的制备过程均涉及细胞筛选C过程所需的气体CO2的作用维持培养液的pHD和过程的原理分别是细胞增殖和碱基互
9、补配对原则8下列过程中，发生膜的融合的是（多选） （ ） A植物体细胞杂交 B受精过程 C氧进入细胞中的线粒体 D效应B细胞产生抗体9自然界中有一种含有叶绿体的原生动物眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。结合实验方案回答：实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤如下：（1）中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是 。（2）过程所用的酶是 和 （3）过程除了用电激之外，还可以用 、 等做诱导因素。（4）过程动物细胞体外培养需要满足的条件是 、 、 、
10、。（5）在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和实验人员的无菌操作，原因是 。 （6）在过程中，通常要添加血清，原因是 。（7）如果让动植物杂交细胞批量培养生产，可以用 技术。参考答案：一、 课前自主学习1、 动物细胞培养2、 细胞增殖 早期胚胎 幼龄动物组织器官 胰蛋白酶 传代培养 10-50 不死3、 适量抗生素 定期更换培养液 用于细胞的有氧呼吸 维持培养液的PH的稳定 动物血清、血浆4、 克隆 动物的细胞核具有全能性 减中 10 10代以内的细胞核型没有发生改变 胚胎细胞分化程度低，全能性易表达5、 细胞膜的流动性 用灭活的病毒诱导 制备单克隆抗体6、 选出杂交瘤细胞 选出能产生特定
11、抗体的杂交瘤细胞 既能大量增殖又能产生特定抗体 特异性强、灵敏度高、易大量制备。二、合作探究1、C 2、A3、（1）相接触 接触抑制 一层 胰蛋白酶（2）衰老、死亡 癌 下降 减少 （3）活细胞膜有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（4）中（5）低温 酶 代谢（6）抗原4、(1)获得能产生相应抗体的B淋巴细胞(2)既能无限增殖，又能产生特定抗体(3)动物细胞融合 动物细胞培养 灭活病毒 (4)动物血清(5)胰蛋白酶 (6)杂交瘤细胞 能产生特定抗体的杂交瘤细胞(7)方法：培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖课外巩固练习：1、D 2、A 3、D 4、C 5、C 6、B 7、BC 8、ABD9、叶绿体 纤维素酶和果胶酶 病毒 聚乙二醇（振荡、离心、生物、化学因素等） 无菌、无毒的环境 营养 温度和pH 气体环境 培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡 由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，通常加入血清、血浆等一些天然成分 动物细胞培养
高三二轮复习生物教学案课时43动物细胞工程
