弧菌属的致病性.ppt

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1、 弧 菌 科 弧 菌 属异 单 胞 菌 属发 光 杆 菌 属等 共 8个 属 O1群 霍 乱 弧 菌非 O1群 霍 乱 弧 菌副 溶 血 弧 菌拟 态 弧 菌等 66个 种 弧 菌 属 （ Vibrio） 的 共 同 生 物 学 特 性 :除 麦 氏 弧 菌 外 ， 氧 化 酶 阳 性 、 还 原 硝 酸 盐发 酵 葡 萄 糖 产 酸 罕 见 产 气对 O/129敏 感 （ 近 年 出 现 抗 性 株 ）钠 离 子 能 刺 激 其 生 长 ， 部 分 菌 株 嗜 盐兼 性 厌 氧 ， 营 养 要 求 不 高革 兰 阴 性 、 弧 形 （ 短 杆 ） 菌 、 动 力 （ ） 弧 菌 属 的 致

2、病 性 ：（ 含 盐 和 海 水 环 境 中 自 身 微 生 物 群 的 一 部 分 ） 肠 道 内 感 染 （ 霍 乱 、 胃 肠 炎 ） 肠 道 外 感 染 （ 伤 口 感 染 、 败 血 症 等 ） 致 病 性 弧 菌 所 引 起 的 疾 病种 所 致 疾 病 临 床 意 义 标 本 来 源O1群 霍 乱 弧 菌 霍 乱 主 要 致 病 菌 粪 便O139群 霍 乱 弧 菌 霍 乱 主 要 致 病 菌 粪 便非 O1群 霍 乱 弧 菌 胃 肠 炎 主 要 致 病 菌 粪 便 、 血副 溶 血 弧 菌 胃 肠 炎 主 要 致 病 菌 粪 便 、 伤 口创 伤 弧 菌 败 血 症 、 伤 口

3、 感 染 主 要 致 病 菌 粪 便 、 伤 口少 女 弧 菌 伤 口 感 染 散 发 感 染 伤 口溶 藻 弧 菌 伤 口 感 染 散 发 感 染 耳 、 伤霍 利 斯 弧 菌 胃 肠 炎 散 发 感 染 粪 便拟 态 弧 菌 胃 肠 炎 散 发 感 染 粪 便河 弧 菌 胃 肠 炎 罕 见 感 染 粪 便麦 氏 弧 菌 胃 肠 炎 罕 见 感 染 粪 便氟 尼 斯 弧 菌 胃 肠 炎 罕 见 感 染 辛 辛 那 提 弧 菌 菌 血 症 、 脑 炎 罕 见 感 染鲨 鱼 弧 菌 伤 口 感 染 罕 见 感 染 霍 乱 弧 菌 是 烈 性 肠 道 传 染 病 霍 乱 的病 原 菌 ， 为 我

4、国 法 定 传 染 病 （ 甲 类 ） ，俗 称 2号 病 。 （ 1号 病 为 鼠 疫 ） 。 血 清 学 分 群 （ 型 ） 在 流 行 病 学 上 有 价 值 抗 原 H 抗 原 ： 共 同 抗 原 ， 特 异 性 低O 抗 原 （ A、 B、 C)： 是 分 群 和 分 型 的 基 础 。 1.依 据 O抗 原 不 同 分 155个 血 清 群 （ O1群 、 O139群 、 非 O1群 霍 乱 弧 菌 ） 2.O1群 有 三 个 血 清 型 AB构 成 小 川 型 （ Ogawa) AC构 成 稻 叶 型 （ Inaba） ABC构 成 彦 岛 型 (Hikojima） 3.每 个

5、血 清 型 根 据 表 型 不 同 分 成 古 典 和 El-Tor两 个 生 物 型 。 生 物 分 型 ： O1群 霍 乱 弧 菌噬 菌 体 分 型 ： 古 典 生 物 型El-Tor生 物 型第 IV组 噬 菌 体 古 典 生 物 型 第 V组 噬 菌 体 El-Tor生 物 型 1817-1923 共 6次 印 度 恒 河 三 角 洲 古 典 生 物 型1961 第 7次 印 度 尼 西 亚 Eltor生 物 型1992.10 孟 加 拉 湾 的 印 度 、 孟 加 拉 O139 O139群 霍 乱 弧 菌 在 亚 洲 的 流 行 (1992.10-1994.11) (致 病 因 素

6、)进 入 小 肠 ， 鞭 毛 、 菌 毛 、 分 泌 黏 液 ， O139群 有 荚 膜穿 过 小 肠 黏 膜 表 面 黏 液 层黏 附 于 小 肠 黏 膜 上 皮 细 胞 刷状 缘 的 微 绒 毛 上 大 量 繁 殖1.侵 袭 力 霍 乱 弧 菌 肠 毒 素 （ CE, cholera enterotoxin）A1:活 性 亚 单 位 21812A2:连 接 亚 单 位 5000B： 结 合 亚 单 位MW： 80000-90000(致 病 因 素 ) 2.霍 乱 肠 毒 素 霍 乱 弧 菌 在 小 肠 黏 膜 部 位 的 致 病 机 制 霍 乱 弧 菌 的 致 病 过 程 霍 乱 弧 菌

7、的 致 病 （ 严 重 时 液 体 丢 失 量 达 500 1000ml/h）剧 烈 上 吐 下 泻 ，严 重 脱 水 、 酸中 毒 、 痉 挛 、尿 闭 、 休 克 、死 亡 。 1.前 驱 期 无 明 显 前 驱 症 状 ， 或 轻 度 腹鸣 、 腹 胀 和 不 适 。 2.吐 泻 期 持 续 2 3天 ， 因 剧 烈 吐 泻 造成 大 量 水 分 和 电 解 质 丧 失 。 3.脱 水 虚 脱 期 脱 水 貌 ， 洗 衣 工 手 ； 循 环 衰 竭 、 代 谢 中 毒 、 急 性 肾 衰 ； 水 电 解 质 平 衡 紊 乱 导 致 肌 肉 痉 挛 。4.恢 复 期 各 种 症 状 趋 于

8、 缓 解 ， 但 可 出 现 发 热 霍 乱 弧 菌 的 革 兰 染 色 结 果(纯 培 养 革 兰 染 色 )描 述 ：革 兰 阴 性 ，弯 曲 弧 形或 逗 点 状 ，粪 便 标 本中 可 首 尾相 接 鱼 群样 平 行 排列 鱼群样排列 霍 乱 弧 菌 形 态 （ 电 镜 ） 霍 乱 弧 菌 的 扫 描 电 镜 图 （ 金 属 镀 膜 ） (纯 培 养 扫 描 电 镜 )描 述 ：弯 曲 弧形 或 逗点 状 霍 乱 患 者 小 肠 黏 膜 上 皮局 部 平 切 电 镜 图霍 乱 弧 菌 扫 描 电 镜 图（ 金 属 镀 膜 ）(电 镜 ) 霍 乱 弧 菌 的 糖 原 颗 粒 （ *） 超

9、 薄 切 片 ， 105 000 (电 镜 ) 霍 乱 弧 菌 的 运 动 模 式 图(米 泔 水 样 便 )描 述 ：穿 梭 或流 星 样动 力 霍 乱 弧 菌 的 鞭 毛(电 镜 ) 霍 乱 弧 菌 的 鞭 毛 染 色(特 殊 染 色 10,000) (培 养 特 性 培 养 条 件 )需 氧 或 兼 性 厌 氧 ， 营 养 要 求 不 高最 适 生 长 温 度 37最 适 pH8.2 9.0 Max:10.2 (耐 碱 怕 酸 )Eltor生 物 型 在 血 平 板 上 可 形 成 -溶 血 （ 有 变 异 ） 初 次 分 离 用 pH8.5碱 性 蛋 白 胨 水 ， 经 4 6小 时液

10、 体 表 面 大 量 繁 殖 ， 形 成 菌 膜 。 (培 养 特 性 选 择 鉴 别 性 平 板 )TCBS（ 硫 代 硫 酸 盐 -枸 橼 酸 盐 -胆 盐 -蔗 糖 琼 脂 平 板 ）霍 乱 弧 菌 在 TCBS琼 脂 平 板 上 形 成发 酵 蔗 糖 的 较 大 的 黄 色 菌 落 (培 养 特 性 选 择 鉴 别 性 平 板 )含 亚 碲 酸 钾 的 培 养 基 ： 4号 琼 脂 庆 大 霉 素 琼 脂 霍 乱 弧 菌 在 含 亚 碲 酸 钾 的 琼 脂 平 板 上 将 碲 离 子 还原 成 原 子 态 的 碲 ， 形 成 有 灰 褐 色 中 心 的 菌 落 (重 要 的 生 化 反

11、 应 )霍 乱 弧 菌副 溶 血 弧 菌拟 态 弧 菌麦 氏 弧 菌 氧 化 酶 硝 酸 盐 还 原 (重 要 的 生 化 反 应 )除 霍 乱 和 拟 态 弧 菌 外 ， 其 余 弧 菌 在 不 含 盐 的 培养 基 上 不 生 长霍 乱 弧 菌拟 态 弧 菌副 溶 血 弧 菌 耐 盐 试 验 (%NaCl)0% 6% 7% 10% n 氧 化 酶 、 吲 哚 、 枸 橼 酸 盐 利 用 、 明 胶 实 验 （ ）n 赖 氨 酸 、 鸟 氨 酸 脱 羧 酶 （ ） 、 精 氨 酸 双 水 解（ ） 、 动 力 （ ）n 发 酵 葡 萄 糖 、 麦 芽 糖 、 蔗 糖 、 甘 露 醇 ， 乳

12、糖 （ v）生 物 学 特 性 （ 重 要 的 生 化 反 应 ） (生 物 型 的 区 分 ： 根 据 生 化 反 应 分 型 ) (血 清 型 ： 根 据 抗 原 分 型 )是 否 与 O1 抗 血 清 凝 集 O1 群 非 O1 群 稻 叶 型(Inaba) 小 川 型(Ogawa) 彦 岛 型(Hikojima)根 据 O 抗 原 组 成 不 同 AC AB ABC (抵 抗 力 )河 水 中 ： 20天 蔬 菜 水 果 上 ： 1周 冰 内 ： 4天耐 碱 怕 酸 ： 胃 酸 中 存 活 4分 钟 pH10.2仍 能 生 长对 庆 大 霉 素 耐 药 ： 用 于 制 作 选 择 性

13、培 养 基多 粘 菌 素 B(50u/ml)： Eltro biotype耐 药 ， Classic biotype敏 感 ， 可 作 为 分 型 依 据对 热 、 干 燥 、 日 光 和 常 用 消 毒 剂 敏 感 ， 100 1 2min即 可 杀 死 患 者 的 米 泔 水 样 便 、 呕 吐 物 、 尸 检 肠 内 容 物或 携 带 有 病 原 菌 的 海 产 品 和 污 染 的 水 源 等 （ 1） 直 接 镜 检 ： 取 标 本 涂 片 2张 ， 乙 醇 或 甲 醇固 定 ， 革 兰 染 色 ， 油 镜 观 察 。 （ 2） 动 力 和 制 动 试 验 ： 水 样 便 ， 悬 滴

14、（ 压 滴 ） 、 高倍 镜 、 暗 视 野 观 察 动 力 ： 穿 梭 似 流 星 状 。 同 法 制 备另 一 标 本 ， 加 入 1滴 不 含 防 腐 剂 的 霍 乱 多 价 诊 断 血清 （ 效 价 1:64） ； 可 见 运 动 活 泼 的 细 菌 运 动 停 止并 发 生 凝 集 ， 为 制 动 试 验 阳 性 。（ 3） 玻 片 凝 集 ： O1和 O139抗 体（ 4） 分 离 培 养 ： 常 用 碱 性 蛋 白 胨 水 、 选 择 性 平 板（ TCBS等 ） ， 菌 落 特 征 和 蔗 糖 发 酵 菌 落 ， 进 一 步鉴 定 。 l） 初 步 鉴 定 ： 与 01群 和

15、O139群 抗 血 清 (多 价 和 单 价 ） 凝 集 试 验 ， 菌 落 和 菌 体 形 态 、 氧 化 酶 试 验 等 作 出 初 步 报 告 。2） 最 后 鉴 定 ： 根 据 纯 培 养 后 全 面 生 化 反 应 、 血 清 学 分 群 及 分 型 、 生 物 型 。 (1)霍 乱 红 试 验(2)O/129敏 感 试 验(3)黏 丝 试 验（ 4） 耐 盐 试 验 a.羊 红 细 胞 溶 血 试 验 b.鸡 红 细 胞 凝 集 试 验 c. VP试 验 d.多 粘 菌 素 B敏 感 试 验 e. 第 IV和 V组 霍 乱 弧 菌 噬 菌 体 裂 解 试 验 n 3.鉴 别 试 验

16、 n 霍 乱 弧 菌 与 拟 态 弧 菌 鉴 别 ： 蔗 糖 发 酵 （ ） （ ）n 霍 乱 弧 菌 和 气 单 胞 菌 和 邻 单 胞 菌 鉴 别 ： 黏 丝 试 验 （ ） （ ） 副 溶 血 弧 菌（ Vibrio parahaemolyticus) 临 床 意 义n 人 食 入 污 染 的 海 产 品 发 病 （ 食 物 中 毒 、 急性 腹 泻 ） 、 伤 口 感 染 、 菌 血 症 。n 致 病 因 子 ： TDH、 TRH和 菌 毛 生 物 学 特 性 （ 形 态 特 征 ） 革 兰 阴性 直 或微 弯 杆菌 ， 极端 单 鞭毛 ， 无荚 膜 副 溶 血 弧 菌 革 兰 染 色

17、 生 物 学 特 性 （ 培 养 特 征 ）n 需 氧 或 兼 性 厌 氧n 营 养 要 求 不 高 ， 嗜 盐 （ 无 盐 不 生 长 ,最 适 盐 浓 度3.5%）n 最 适 pH7.7 8.0， 最 适 温 度 30 37n TCBS上 形 成 绿 色 菌 落副 溶 血 弧 菌 在 TCBS上 菌 落 生 物 学 特 性 （ 培 养 特 征 ）n 从 腹 泻 患 者 中 分 离 到 的 副 溶 血 弧 菌 95%以 上 在 我 妻 培 养 基 （ 人 血 培 养 基 ） 上 可产 生 -溶 血 现 象 ， 称 为 神 奈 川 现 象（ K anagawa phenomenon, K P）

18、n 在 SS平 板 上 形 成 扁 平 ， 无 色 半 透 明 ， 蜡滴 状 的 菌 落 ， 不 易 刮 下 ， 有 辛 辣 味 。 生 物 学 特 性 （ 生 化 特 征 ）n 氧 化 酶 +n 蔗 糖 发 酵 -n 葡 萄 糖 发 酵 + NaCl生 长 试 验n 0%NaCl -n 3%NaCl + n 7%NaCl +n 10%NaCl -n 脲 酶 + / -(临 床 分 离 菌 株 常 阳 性 ） 标 本3.5%NaCl碱 性 蛋 白 胨 水 培 养 基TCBS分 离 培 养可 疑 菌 落 （ 绿 色 ）纯 培 养 菌种鉴定毒素测定 微 生 物 学 检 验 程 序 鉴 定 特 征n

19、 革 兰 阴 性 弧 菌 或 杆 菌 ， 动 力 （ ）n 氧 化 酶 （ ） ， 临 床 分 离 株 脲 酶 常 （ ）n TCBS上 绿 色 菌 落 、 氯 化 钠 生 长 试 验n 神 奈 川 现 象 (+)n 各 种 生 化 试 验n TDH和 TRH的 检 测 ： 毒 素 和 基 因 检 测 气 单 胞 菌 属 和 邻 单 胞 菌 属Aeromonas and Plesiomonas 分 类根 据 分 子 遗 传 学 研 究 ：n 气 单 胞 菌 属 独 立 成 气 单 胞 菌 科n 邻 单 胞 菌 属 （ 仅 一 个 种 ： 类 志 贺 邻 单 胞菌 ） 并 入 肠 杆 菌 科 临

20、 床 意 义 （ 气 单 胞 菌 ： 肠 道 致 病 菌 ） 临 床 意 义 （ 邻 单 胞 菌 属 ）n 所 致 疾 病 ： 肠 道 内 感 染 ： 胃 肠 炎 （ 水 样 泻 或 痢 疾 样 腹 泻 ） 肠 道 外 感 染 ： 菌 血 症 等 （ 免 疫 力 低 下 人 群 发 生 ） n 病 史 ： 进 食 生 水 或 海 产 品 气 单 胞 菌 属 的 描 述n 革 兰 阴 性 直 或 球 杆 菌 ， 大 多 为 极 端 单 鞭 毛 ；n 生 长 温 度 范 围 广 （ 0 45 ） ；n 氧 化 酶 （ ） 、 触 酶 （ ） 、 硝 酸 盐 还 原 （ ） 、发 酵 葡 萄 糖 产

21、 酸 、 有 的 产 气 、 产 生 多 种 胞 外 酶 ；n 对 O129耐 药 ；n 主 要 存 在 于 水 生 系 统 （ 更 易 生 活 于 盐 水 和 淡 水 交 界处 ， 海 洋 环 境 中 偶 见 ） 。 邻 单 胞 菌 属 的 描 述n 革 兰 阴 性 杆 菌 ， 极 端 2 5根 鞭 毛 （ 侧 鞭 毛 ） ；n 生 长 温 度 范 围 广 （ 8 45 ） ；n 氧 化 酶 （ ） 、 触 酶 （ ） 、 硝 酸 盐 还 原 （ ） 、发 酵 葡 萄 糖 产 酸 不 产 气 ；n 可 耐 受 的 NaCl浓 度 为 0 5 ；n 大 多 数 菌 株 对 O129敏 感 ；

22、n 主 要 存 在 于 水 生 系 统 （ 淡 水 和 蒸 汽 水 中 比 海 水 环境 更 易 存 在 ） 。 对 人 致 病 的 弧 菌 、 气 单 胞 菌 和 邻 单 胞 菌 的 特 征 特 征 霍 乱 和 拟 态 弧 菌 其 他 弧 菌 气 单 胞 菌 邻 单 胞 菌生 长 0 NaCl + - + + 6%NaCl + + - -对 O/129敏 感 性 10ug + +/- - +/- 150ug + + - +氨 苄 青 霉 素 +/- + - -（ 10ug)敏 感 性葡 萄 糖 产 气 - - +/- -黏 丝 试 验 + + - - KEY POINTSn The genu

23、s Vibrio is calssified in the family Vibrionaceae, and it is the type genus for the family. n Vibrio cholera is the pathogen of cholera and it is the most important species in the genus Vibrio. It is now divided into three major subgroups: V. cholera O1, V. cholera O139,and V. cholera non-O1. Vibrio

24、 parahaemolyticus causes gastroenteritis in human following ingestion of contaminated seafood. KEY POINTSn Presumptive identification of Vibrio species based on colonial and microscopic morphology ,definite identification relies on former biochemical tests and serological reaction. n Aeromonas is the only family within Aeromonaceae and is pathogenic for humans. Aeromonas spps need to be identified from other oxidase-possitive fermenters, such as Vibrio and Plesiomonas spps.