AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法

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19）中华人民共和国国家知识产权局（12 ）发明专利申请（10）申请公布号CN107937441A（43）申请公布日2018.04.20（21）申请号 CN201711123952.2（22）申请日 2017.11.14（71）申请人 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所地址215163 江苏省苏州市高新区科技城科灵路88号（72）发明人 刘晓玫;张春;姜岩;袁运;魏静;王东鑫;王飞飞;魏峥;曹金晶（74）专利代理机构 北京远大卓悦知识产权代理事务所（普通合伙）代理人 韩飞（51）Int.CI权利要求说明书 说明书 幅图AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法（57）摘要本发明提供了一种AAVS1位点定点整合外 源基因的人iPS细胞的构建方法，其包括：构建 含有外源基因的第一重组质粒，并将其包装得到 第一 rAAV；构建含有AAV Rep78的第二重组质 粒，并将其包装得到第二rAAV；第一 rAAV和第 二 rAAV共同转导人成体细胞，将外源基因定点整 合于人成体细胞19号染色体的AAVS1位点。采用 本发明技术手段得到的基因工程化人成体细胞株 能够稳定表达外源基因，将得到的基因工程化人