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1、UV/VIS5100 紫外-可见分光光度计的使用UV5100是由上海元析仪器有限公司生产的紫外-可见分光光度计，因波长范围是：200 lOOOn m的连续光谱，所以能在紫外、可见、近红外光谱区区域对样品物质作定性和定量分 析。一、UV/VIS-5100型分光光度计的性能指标波长范围： 200nm-l000nm 光谱带宽： 4nm 波长精度：2nm 波长重复性：0.5nm 光度准确度：0.5%T 光度重复性： 0.3%T 稳定性：0.003A/h杂散光：W0.2%T数据输出： USB打印输出： 并行口显示系统：128X64位液晶显示器光源：钨灯、氘灯透射比范围： 0.0200%（T） 吸光度范围
2、： -0.33（A） 浓度显示范围： 0-9999（C） 外形尺寸：430X300X160mm二、仪器的外部结构功能键描述：按钮功能用于测量模式（T, A, C, F）、.MOD附切换SET用于系统参数设定GOTOA/ 用于波长设置校空白键,用于调 0.000Abs 和100.0%TEAP用于打印测试结果及数据删除（二）上键，选择向上移动下键，选择向下移动TA拎确认键，用于数据和菜单的确认START三、仪器的基本操作1、开启和自检（1）仪器开启 用电源线连接上电源，打开仪器开关（位于仪器的后右侧），仪器开机后进入系统自检 过程。（2）系统自检 在自检状态，仪器会自动对滤光片、灯源切换、检测器、
3、氘灯、钨灯、波长校正、系统 参数和暗电流进行检测。注：如果某一项自检出错，仪器会自动鸣叫报警，同时显示错误项，用户可按任意键跳 过，继续自检下一项。（3）系统预热 仪器开机后，因电器件需要预热一定的时间后方可达到稳定状态；另外氘灯周围环境也 需要一定时间方能达到热平衡，所以仪器需要预热约20 分钟后，方可正常使用。自检结果后，仪器进入预热状态，预热时间为20 分钟，预热结束后仪器会自动检测暗 电流一次。预热时可以按任意键跳过。（4）进入系统主菜单仪器自检结束后进入主界面。按“MODE”键可以在T、A、C、F间自由转换，分别实 验透过率测试，吸光度测试工，标准曲线和系统法等功能。2、透过率测试在
4、此功能下，可进行固定波长下的透过率测试，也可以将测量结果打印输出。（1）设定工作波长在系统主界面下，系统的默认功能项为透过率测试，此时直接按“GOTO入”键可以 进入波长设定界面，用上下键来改变波长值，每按一次该键则屏幕上的波长值会相应增加或 减少O.lnm,按“ENTER”键确认。提示：可以长按此二键，贝燉字会快速变化，直至所需的波长值为止，近“ENTER” 键确认。波长设定完成后自动返回上级界面。（2）按“ZERO”键对当前工作波长下的空白样品进行调100O%T。注意：在调100.0%T之前记得将空白样品拉（推）入光路中，否则调100.0%T的结果 不是空白液的100.0%T,使得测量结果
5、不正确。（ 3）进行测量当调100.0%T完成后，把待测样品拉（推）入光路中，按“ENTER”键进入测量界面 （若已经在测量界面下，则无须此项操作，直接进行后面的操作即可）按“ENTER”键即 可在当前工作波长下对样品进行透过率的测量。每按下一次“ENTER”键，系统会自动将当时所显示的数值记录到数据据存储区，但当查看时，液晶显示屏的每一屏只可显示5行数据，其余数据可通过按上下键进行翻页显示。（4）数据打印与清除 数据存储区最多可存储200组数据。如果要打印或消除已测量数据，可在测量结果显示 界面下，按“PRINT/CLEAR”键，进入打印或删除除界面，用上下键选择对应的操作即可。 按“ESC
6、”键即出该界面。3、吸光度测试(1) 按“MODE”键切换至A模式(即吸光度测量模式)(2) 设定工作波长，设定方法同“透光率测试”。(3) 按“ZERO”键对当前工作波长下的空白样品进行调0.000A。(4) 进行测量。当调0.000A完成后，把待测样品拉(推)入光路中，按“ENTER”键 进入测量界面，并按“ENTER”键将测量的数据存入数据存储区。4、标准曲线法 标准曲线法是用已知浓度的标准样品，建立标准曲线，然后用所建立的标准曲线来测量 未知样品浓度的一种定量测试方法。(1) 进入标准曲线法主界面(C模式)按“MODE”键至光标切换到“C”上即可进入标准曲线模式。在此功能下，可以利用
7、标准样品建立标准曲线，并可用所建标准曲线对未知样品浓度进行测试。(2) 标准曲线法功能框架图。(3) 新建曲线在标准曲线法主界面下，用上下键选定“新建曲线”按“ENTER”键进入建立标准曲 线步骤，根据仪器界面的提示逐步操作。进入标准样品个数设定界面。选定“新建曲线”后，按“ENTER”键，进入标准样 品个数设定界面。根据需要，按下下键选择标准样品个数，并按“ENTER”键确认。 注意：标样数的设定范围为：112,在此界面下进行波长设定。 标准样品浓度设定当样品个数输入完成后自动进入浓度设置界面。A）此时请将参比样拉入光路，然后按“ZERO”键校空白。B）根据提示将1号标样拉入光路，并输入1号
8、标准样品的浓度，输入方法如下：光标最初停留在第一位上闪烁，此时按上下键，则该位数字会在09和小数点间变化, 选择所需的数字并按“ ENTER ”键确认，贝9光标会自动移到第二位上，用同样的方法输入 第二位及以后的各位数字。当输入完最后一位数字按“ ENTER ”键，贝係统会自动记录其 吸光度并转入2号标样输入界面。C）此时将2号标样拉入光路，并参照1号标样的输入方法输入2号标样的浓度。D）重复上述步骤。直至最后一个标样的浓度输入完成。 绘制标准曲线当最后一个标样的浓度输入完成并按“ ENTER ”键确认后，系统会自动显示所建立的 标准曲线与曲线方程和相差系数R。A）浓度的设定范围为：09999
9、.9，否则视为无效，需要重新输入，标准样品一般按照 浓度由低向高依次放入光路中，即1号样品往往是配制的标准样品中浓度最低的。B）仪器在曲线建立过程中，若系统认为采入的数据有误（有可能是操作错误，也有可 能是是溶液配制有问题），则会蜂鸣3声后返回主界面，且标准曲线无法正常绘出。 进入浓度测试界面在标准曲线显示界面下，按“ENTER”键即可进入浓度测试界面。 未知样浓度测定将参比溶液拉（推）入光路，调）.000A/100.0%T,再将未知浓度的样品拉（推）入光路 中，按“ENTER”键，显示器上便可显示相应样品的浓度。重复上述步骤，可以完成多个 样品的浓度测试。 数据的打印或删除系统最多可以存储2
10、00组测试数据，若按“ENTER”键即可进入打印选择界面。如果仪 器连接了打印机，可以选择“打印数据”，然后按“ENTER”进行数据打印；如果系统未连 接打印机且用户仅想消除数据，可直接选择“删除数据”后按ENTER”键确认。按取消 键退出。注意：打印数据后，系统内的存储数据将被清除。（4）打开曲线 所有建立的曲线都会被自动存储在系统里并按顺序自动编号。下次使用时可以直接调出曲线进行测试，无需重复建立。当想调出曲线时，在标准曲线法主界面下，用上下键选定“打 开曲线”，按“ENTER”键即可进入已建曲线选择界面。系统共可存储50条标准曲线，进入曲线选择界面后，用上下键将光标移动到所需要的曲 线上
11、，按“ENTER”键确认，贝係统会显示出曲线，再按“ENTER”键即可用选定的曲线 对未知浓度样品进行测试。（5）删除曲线 此功能用来删除已保存的曲线，若要删除某条曲线，在标准曲线法主界面下，用上下键选定“删除曲线”，按“ENTER”键进入删除曲线选择界面。用上下键选定所要删除的曲线方程， 按“ENTER”进入删除再确认界面，选择“是”并按“ENTER”键后曲线方程即被删除， 同时返回上级菜单。按“ESC”返回上级菜单。5、系统法（F模式）系统法是工作曲线法的简单应用，如果用户已知曲线方程，可以直接将方程的系数C和 B输入仪器，并利用该方程进行未知浓度样品的测试。（1）进入系统法在定量测量主界
12、面下，按“MODE”键即可进入系数数测量主界面。（2）设定系数K用上下键将光标移动到“曲线参数K”上，按“ENTER”键确认，系统即进入K设定界 面。K值的设定方法同前面建立标准曲线中浓度的输入方法相同，在此不再详述。需要指出 的是在输入K值前，首先要对K值的正负进行选择。（3）设定系数B用上下键将光标移动到“曲线参数B”上，按Enter”键确认，系统进入参数b设定界面。 方法同k值设定。（ 4）测试b值设定并确认后，系统自动返回到上级界面。用上下键将光标移动到“测试”上，并 按“ENTER”键确认，则系统进入到预测试界面，继续按“ENTER”键进入到数据记录界 面，此时将参比溶液放入光路，按“ ZERO”键调100%T,然后把待测样品接入光路，近 “START”键进行测试，系统将测试结果自动存储。系统共可存储200组数据。注意：如果波长未设定，需要在预试界面或测试界面进行波长设定。四、如何校正 0%T？UV-5100型分光光度计属于全自动型仪器，在测试过程中不需要每次测量都校正0%T，仪 器中校正0%T对应的操作为“暗电流校正”如果仪器的使用环境发生改变（如：温度、工 作电压、环境光线发生变化），则需要进行暗电流校正操作，在“系统应用”中选择“暗电 流校正”，确认即可。（杨明园，武汉大学生命科学学院）
上海元析UV5100紫外-可见分光光度计的使用
