《抗生素效价计算过程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《抗生素效价计算过程（5页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、USP Cylinder-plate assay美国药典 管碟法-（标准曲线法）1、美国药典规定的管碟法抗生素效价方法简述：首先制备5个标准溶液浓度（U/ml），分别为SI、S2、S3、S4和S5,其中S3 为中间浓度。除S3外的每个浓度准备3个碟子，每个碟子放置6个牛津杯，其中不 相连的三个分别加入Si （i为1、2、4或5）,另外三个不相连的加入S3。待检样 品（Unknown ）加样方式如Si，具体放置方法如下图1：图1：标准及样品管碟放置方式图例Set S4Sample U1Set S1Set S2Set S52、在以上方法的基础上以具体数据进行计算举例：下表2为按以上方法进行抗生素效
2、价检测的一组测量结果表2：抗生素效价检测测量结果表备注：Zonel、3、5表示每个平皿中不相连的三个S3的直径值；Zone2、4、6表示每个平皿中不相连的三个Si的直径值；U1表示待测样品1。2.1 进行初始计算：对于每种浓度的三个平板，分别求出得到的9个中间浓度标准品的平均值以及9个Si和U1直径的平均值。例如：15.867= (16.1,15.6,15.8,16.015.8)9 个数据的平均值14.167= (14.6,14.1,13.5,14.514.1)9 个数据的平均值2.2 变异性的适用性检查：然后求出每三个平板得到的9个数值的标准偏差(包括标准对照和样品的)进而计算出其相对标准偏
3、差值(RSD，该值应不超过10%)。例如：标准偏差 0.200 = s(16.1, . . ., 15.8)相对标准偏差 1.3% = (0.200/15.867) *1002.3 进行平板间的差异校正 计算公式如下。X = X - (X - P)CSRX = 标准品平均值的校正值CX = 原始的标准品的平均值SX = 对照值的平均值RP = 校正值例如：14.022 = 14.167 - （15.867 - 15.722） = 14.167 - 0.1452.4 建立标准曲线：标准曲线由2.3计算的标准品平均值的校正值Xc和标准品浓度值的对数值构 成。（使用适宜的计算软件或手动计算）（注意可
4、以使用自然对数或底数为10的对数建立标准曲线中以确定回归方程，这样可以得到同样的结果） 例如：下表3是针对下列计算中会用到的数据从表2中截出的部分。表3：标准曲线数据表Standard SetCorrectedzoneMeasurements(mm)Concentration (U/mL)14.0223.2R14.9894.0Reference (5J15.722516.5116.2517.2227-8125图4：线形回归结果抗生素效价标准曲线)m 径直圈菌抑正校62.51.5ln(C)标准曲线：Z = 3.5502* ln(C) + 9.9794 乙=校正抑菌圈大小C二浓度R2 = 0.99
5、682.5 待测样品效价： 估算一个待测样品的效价，计算对照抑菌圈和样品抑菌圈的平均值(三个平 板的)。用上面介绍的标准品平均值的校正值Xc以计算待测样品的浓度平均值。 注意-另一个可以接受的用校正值的方式为，根据标准品中间浓度S的对数值3 在估计效价的回归线中进行校正。在标准曲线中使用公式用校正平均值计算样 品的含量对数值L。UL = (Z - a)/bUa = 回归线的截距b = 回归线的斜率要得知待测样品的效价，取L的反对数值乘以适当的稀释因子，该值也可描述为U参考值浓度的百分比。例如：待测样品校正值(表 2中) = 15.522待测样品效价的ln值：L = (15.522 - 9.978) / 3.5502= 1.562U待测样品效价值：C = e1.562 = 4.765U待测样品效价与对照中间浓度的百分比为：(4.765/5.000) *100% = 95.3%如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！
抗生素效价计算过程
