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1、1、肃清DPPH自在基才能的测定称取肯定量的DPPH,用无水乙醇配制成0.04mg/mL的 DPPH溶液.分别取2mL分歧浓度(2, 4, 6, 8mg/mL)的 溶液，加入2mL DPPH溶液，混合均匀，室温放置30min 后，5000r/min离心10min.取上淆液于517nm处测吸光值.用 Vc作为阳性对照.样品对DPPH自在基的甫清率用以下公式 计算：DPPH 清除率二1虻A2 X100%A 0A02mL无水乙醇+ 2mL DPPH溶液的吸光值；A2mL样品溶液+ 2mL DPPH溶液的吸光值；A22mL样品溶液+ 2mL无水乙醇的吸光值.2、总还原才能的测定在10mL离心管中分别加
2、入0.2mol/L pH 6.6的磷酸缓冲 液2.5mL和分歧浓度(2, 4, 6, 8mg/mL)的溶液1mL, 加入2.5 mL 1%铁氰化钾，混合均匀后于50。FeCl3,混匀 后静置10min，在700nm处检测吸光值.Vc作为阳性对照.3、对Fe2+离孑螯会才能的测定分别取1mL分歧浓度(2, 4, 6, 8mg/mL)的溶液和 3.7mL蒸馏水，加入 2mmol/L 的 FeCl2溶液0.1mL和 5mmol/L的菲洛嗪溶液0.2mL, 25。水浴10min,于562nm 处测吸光值.EDTA为阳性对照.样品对Fe2+的餐合率计算公式如下：Fe2+ 螯合率=1 -（ 1 -气）X
3、100%A 0A01mL蒸馏水代替反应体系中样品溶液后的吸光值；A1样品溶液反应后的吸光值；A2FeCl2溶液后的吸光值.4、超氧自在基（O2-）肃清率的测定采取邻苯三酚自氧化法测定.取50mmol/L Tris-HCl缓冲 液（pH8.2）4.5mL,置25。水浴中保温20min，分别加入 1mL样品溶液和0.4mL 25mmol/L邻苯三酚溶液，混匀后于 25。水洛中反应5min，加入1mL 8mmol/L HCl停止反应， 于299nm处测定吸光度（Ax）,空白对照组以相反体积蒸 馏水代替样品.按下式计算O2-甫清率：O2-清除率=A0 1 X100%2A0A0空白对照液吸光度；Ax样品
4、溶液吸光度.5、羟自在基（OH ）肃清率的测定利用 H2O2 与 Fe2+2O2 1mL、9mmol/L FeSO4 1mL、9mmol/L水杨酸-乙醇溶液1mL,分歧浓度的样品溶液1mL.末了加H2O2启动反应，37。反应30min,以蒸馏水为参比，在510nm下测定各浓度的吸光度.考虑到样品本人的吸光值，以9mmol/L FeSO4 1mL、9mmol/L水杨酸-乙醇溶液1mL,分歧浓度的样品溶液1mL和1mL蒸馏水作为样品的 本底吸取值.按下式计算OH肃清率：OH清除率=一气一气0 1x100%A0空白对照液的吸光度；Ax加入样品溶液后的吸光度；Ax0不加显色剂H2O2样品溶液本底的吸光度.
抗氧化活性实验方法
