实验动物学-环境控制

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1、2实验动物与环境实验动物与环境 一、实验动物的环境一、实验动物的环境 实验动物的环境控制是实验动物标准化的主要内容之一。实验动物一般都较长时间甚至终身被限制在一个极其有限的环境范围内生活,这种环境就成了实验动物赖以生存的条件。3 为了使实验动物能够正常生长、发育、繁为了使实验动物能够正常生长、发育、繁殖和进行良好的实验处理,正确认识环境殖和进行良好的实验处理,正确认识环境因素对实验动物的影响就显得十分重要。因素对实验动物的影响就显得十分重要。4主要内容 1、环境控制的重要性 2、环境影响因素的分类 3、实验动物设施的分类 4、实验动物的饲养条件 5、实验动物的营养控制5 动物性状的表现决定于多

2、种因素,主要是动物性状的表现决定于多种因素,主要是遗传遗传因素因素和和环境因素环境因素的综合结果。的综合结果。遗传基因是决定生物性状的物质基础,但在个遗传基因是决定生物性状的物质基础,但在个体发育中,基因作用的表现离不开环境的影响。体发育中,基因作用的表现离不开环境的影响。一个性状的正常表现不仅需要完善的一组基因,一个性状的正常表现不仅需要完善的一组基因,而且需要正常的环境。而且需要正常的环境。6 动物性状的表现决定于多种因素,主要是遗传因素和环境因素的综合结果。基因型基因型 发育环境发育环境 表现型表现型 周围环境周围环境 演出型演出型7 动物实验是对演出型的一种影响处置。为动物实验是对演出

3、型的一种影响处置。为了求得动物对处理结果的可信性和可重复了求得动物对处理结果的可信性和可重复性,就要求演出型的稳定,积极控制影性,就要求演出型的稳定,积极控制影响动物机体的遗传基因和环境条件动物机体的遗传基因和环境条件。8环境因素的重要性 实验动物的环境因素比较复杂,包括两个方面,即自然因素(包括物理、化学、生物学因素)和人为因素。9环境因素的重要性 不论是自然因素,还是人为因素都不是孤立的,而是互相联系而产生影响的。环境因素有“有利”和“有害”作用两个方面。因此实验动物环境因素控制的原则是,充分利用和创造那些有利的因素,消除和防止那些有害因素得以保证实验动物的健康和达到实验利用的目的。10

4、没有环境控制就没有实验动物没有环境控制就没有实验动物 !返回11二、环境因素的分类二、环境因素的分类 实验动物的环境是指围绕实验动物客观事实验动物的环境是指围绕实验动物客观事物的总和,主要包括外环境和内环境两大物的总和,主要包括外环境和内环境两大部分。部分。外环境外环境主要是实验动物饲育和实验场所外主要是实验动物饲育和实验场所外的周围环境的周围环境。内环境内环境主要是指实验动物饲育和实验场所主要是指实验动物饲育和实验场所内的环境。内的环境。12实验动物气候因素气候因素温度湿度气流风速换气次数压强梯度人为因素人为因素设 设 程 制 实验施 备 序 度 方法理化因素理化因素氧气二氧化碳粉尘光照噪音

5、臭气消毒剂生物因素同种生物异种生物实验动物环境因素与指标控制营养因素营养因素饲 饮 料 水 居住因素居住因素笼具笼具 给食器给食器垫料垫料 供水器供水器13 环境对动物的影响并非仅受上述诸因素中环境对动物的影响并非仅受上述诸因素中各个单一因素的作用,而是受到多种因素各个单一因素的作用,而是受到多种因素的的复合作用复合作用。在论述实验动物的环境时,有必要经常按在论述实验动物的环境时,有必要经常按复合环境复合环境(environmental complex)状态加状态加以考虑。以考虑。返回返回14第二节第二节 气候因素气候因素 一、温、湿度:一、温、湿度:动物实验时最适宜的环境温度为:动物实验时最

6、适宜的环境温度为:21-25,GB目前目前18-29。15温度对实验动物的影响 环境温度可影响动物的生殖机能。环境温度可影响动物机体的抵抗力。环境温度可影响动物的脏器重量。环境温度可影响动物的新陈代谢。环境温度可影响动物的实验反应性。16 暴露在高温或低温环境下的动物,对其神经系统、内分泌系统以及各种酶活性的亢进或抑制等均有影响。17 二、湿度:动物试验中适宜的相对湿度范围是40%-70%。空气的相对湿度对动物的体温调节有密切关系,在高温情况下,影响尤其明显。高温高湿导致机体蒸发散热受阻,引起动物代谢紊乱和抵抗力下降,动物的发病率和死亡率也明显增加。温度过高,微生物易于繁殖和传播,垫料、饲料也

7、容易发生霉变。18 相对湿度过低可导致粉尘飞扬,引起动物和人的呼吸道疾病。相对湿度在40%以下实验大鼠可发生环尾病(ringtai)。动物室内变态反应原的含量随湿度的下降而上升。19三、气流与风速 动物试验室内风速一般控制在动物试验室内风速一般控制在0.10.2m/s,换气次数在换气次数在1020次次/h。合理组织气流和风速可调节室内温度和合理组织气流和风速可调节室内温度和湿度,又可降低室内粉尘和有害气体污湿度,又可降低室内粉尘和有害气体污染,甚至可以控制传染病的流行。染,甚至可以控制传染病的流行。20 动物室内气流速度过小动物室内气流速度过小,空气流通不良空气流通不良,动动物缺氧物缺氧,室内

8、有害气体浓度升高室内有害气体浓度升高,散热困难散热困难,易造成呼吸道传染病的传播易造成呼吸道传染病的传播,甚至死亡。甚至死亡。动物室内气流速度过大,使动物体表散动物室内气流速度过大,使动物体表散热量增加危及动物健康,影响动物实验热量增加危及动物健康,影响动物实验结果。结果。21 动物设施内各区域的静压状况(正压、动物设施内各区域的静压状况(正压、负压)决定了动物室内空气流动的方向。负压)决定了动物室内空气流动的方向。一般动物室内要求保证正压状态,确保一般动物室内要求保证正压状态,确保病原微生物不至侵入动物室内。在感染病原微生物不至侵入动物室内。在感染或放射性动物实验室,室内必须处于负或放射性动

9、物实验室,室内必须处于负压状态。压状态。GB规定实验动物设施内压力梯度为规定实验动物设施内压力梯度为2050Pa。22气流方向气流方向动物饲养室动物饲养室清洁走道清洁走道次清洁走道次清洁走道清清洗洗消消毒毒准准备备间间23第三节第三节 物理化学因素物理化学因素24 一、光照一、光照 作为实验动物环境的光照有三个次级因作为实验动物环境的光照有三个次级因素对实验动物有影响:素对实验动物有影响:1、照度、照度 2、光线波长、光线波长 3、明暗交替时间、明暗交替时间25 目前目前GB动物实验设施环境指标规定动物试动物实验设施环境指标规定动物试验室工作照度为验室工作照度为150300lx;小动物照度小动

10、物照度为为1520lx;大动物照度为;大动物照度为100200lx;昼夜明暗交替时间(昼夜明暗交替时间(h)为为12/12或或10/14。26 噪声 噪声是影响实验动物健康的重要环噪声是影响实验动物健康的重要环境因素。噪声可引起实验动物烦躁境因素。噪声可引起实验动物烦躁不安、紧张、呼吸和心跳加快、血不安、紧张、呼吸和心跳加快、血压升高、肾上腺皮质激素增高等一压升高、肾上腺皮质激素增高等一系列的生理变化。系列的生理变化。GB规定实验动物饲养观察室的音响规定实验动物饲养观察室的音响应在应在60dB以下以下。27 空气洁净状况 1粉尘粉尘 空气中浮游的微粒总称空气溶胶空气中浮游的微粒总称空气溶胶(a

11、eroso1),分别按其状态,物理化学生,分别按其状态,物理化学生成过程以及大小而分为粉尘成过程以及大小而分为粉尘(dust)、烟、烟尘尘(fume)、薄雾、薄雾(mist)、浓雾、浓雾(fog)、烟、烟(smoke)。28 实验动物饲养室空气中颗粒物的来源主实验动物饲养室空气中颗粒物的来源主要有两个途径:要有两个途径:1、室外空气未经过滤处理直接带入:、室外空气未经过滤处理直接带入:2、动物体表被毛、皮屑、饲料和垫料等、动物体表被毛、皮屑、饲料和垫料等材料的碎屑被气流携带或动物活动扬起材料的碎屑被气流携带或动物活动扬起在空气中悬浮,形成颗粒物污染。在空气中悬浮,形成颗粒物污染。29 颗粒物对

12、实验动物和工作人员的健康有颗粒物对实验动物和工作人员的健康有很大影响,颗粒物作为过敏原可引起实很大影响,颗粒物作为过敏原可引起实验动物和人的呼吸系统疾病和过敏性皮验动物和人的呼吸系统疾病和过敏性皮炎等;还可成为微生物的载体,把各种炎等;还可成为微生物的载体,把各种微生物粒子包括饲料、垫料中带入的粉微生物粒子包括饲料、垫料中带入的粉螨、霉菌孢子、各种细菌及其芽孢和病螨、霉菌孢子、各种细菌及其芽孢和病毒带入饲养室,而引起多种传染病。毒带入饲养室,而引起多种传染病。30 2臭气臭气 所谓恶臭物质所谓恶臭物质(malodor,cacosmia,stink material)是指对人产生不快的气是指对人

13、产生不快的气味或可能破坏生活环境的可怕物质。动味或可能破坏生活环境的可怕物质。动物室内的主要有害气体有氨气、甲基硫物室内的主要有害气体有氨气、甲基硫醇、硫化氢、硫化甲基、三甲胺、本乙醇、硫化氢、硫化甲基、三甲胺、本乙烯、乙醛和二硫化甲基等八种。烯、乙醛和二硫化甲基等八种。31 空气中空气中氨的含量是衡量空气质量的指标氨的含量是衡量空气质量的指标,在动物实验室要求不超过在动物实验室要求不超过14mg/m3(相相当于当于20ppm)。空气中氨含量增多刺激动。空气中氨含量增多刺激动物粘膜引起动物流泪、咳嗽等,严重者物粘膜引起动物流泪、咳嗽等,严重者可引起粘膜发炎、肺水肿和肺炎,甚至可引起粘膜发炎、肺

14、水肿和肺炎,甚至死亡。死亡。长期处于高浓度氨的环境中,实验动物长期处于高浓度氨的环境中,实验动物上呼吸道可出现慢性炎症,使其失去使上呼吸道可出现慢性炎症,使其失去使用价值。用价值。32 生物因素生物因素 1、动物社会因素和动物饲养密度 2、微生物 3、其它动物 4、实验人员33 动物笼内饲养动物密度的不同会引起动物动物笼内饲养动物密度的不同会引起动物反应的不同。因实验目的不同会有差异。反应的不同。因实验目的不同会有差异。所以在饲养过程中要注意防止动物间的激所以在饲养过程中要注意防止动物间的激烈争斗和咬伤。烈争斗和咬伤。返回34实验动物环境设施条件的分类 实验动物设施根据对饲养动物的微生物实验动

15、物设施根据对饲养动物的微生物控制程度和空气净化程度分为控制程度和空气净化程度分为隔离环境、隔离环境、屏障环境和开放环境屏障环境和开放环境三类。三类。35第五节 实验动物设施(laboratory animal facility,LAF)是进行实验动物饲是进行实验动物饲养、保种维持、生养、保种维持、生产、实验研究、试产、实验研究、试验等设施的总称。验等设施的总称。包括包括实验动物繁实验动物繁育、生产设施和育、生产设施和动物实验设施。动物实验设施。36 实验动物设施是实验动物工作的基本条件。实验动物设施是实验动物工作的基本条件。没有良好的实验动物设施,就不可能保证没有良好的实验动物设施,就不可能保

16、证实验动物的质量和动物实验结果的准确和实验动物的质量和动物实验结果的准确和可靠。可靠。3738无菌动物及无菌动物及悉生动物?悉生动物?清洁级、清洁级、SPF动动物?物?普通动物?39 一、一、隔离环境(隔离系统)隔离环境(隔离系统)隔离环境隔离环境(islation system)是以隔离器是以隔离器及其他附属装置所组成的饲养系统。该及其他附属装置所组成的饲养系统。该设施采用无菌隔离装置以保存无菌或外设施采用无菌隔离装置以保存无菌或外来无污染动物。来无污染动物。40 隔离器内应为完全无菌(饲养无菌动物时)隔离器内应为完全无菌(饲养无菌动物时)和已知菌(饲养悉生动物时)的环境,人和已知菌(饲养悉

17、生动物时)的环境,人与动物不能直接接触,工作人员通过隔离与动物不能直接接触,工作人员通过隔离器上的橡胶手套进行操作,进入隔离器的器上的橡胶手套进行操作,进入隔离器的空气必须经过高效过滤,正压要求达到空气必须经过高效过滤,正压要求达到2O)。进入的物品必须经消毒后经灭菌渡舱或传进入的物品必须经消毒后经灭菌渡舱或传递舱移入。递舱移入。41 二、屏障环境(屏障系统)屏障环境屏障环境(barrier system)是标准动物是标准动物饲养室和动物试验室用的最多的一种环饲养室和动物试验室用的最多的一种环境设施系统。是用来饲养清洁级、境设施系统。是用来饲养清洁级、SPF级动物和做清洁级和级动物和做清洁级和

18、SPF级动物各种试级动物各种试验的主要设施。验的主要设施。42屏障系统屏障系统43 一切进入屏障的人和物品均需经过严格一切进入屏障的人和物品均需经过严格的微生物控制。空气经初、中、高效过的微生物控制。空气经初、中、高效过滤器进入室内,利用空调送风系统形成滤器进入室内,利用空调送风系统形成清洁走廊、动物饲养间,非清洁走廊、清洁走廊、动物饲养间,非清洁走廊、室外的静压差梯度,各梯度差范围在室外的静压差梯度,各梯度差范围在2O).44实验用品和器具进出实验用品和器具进出SPFSPF动物房线路动物房线路图图45屏障系统屏障系统46474849登记!登记!50拖鞋专用!拖鞋专用!随手关门!随手关门!51

19、无菌操作!无菌操作!52杜绝噪音!杜绝噪音!爱护公物!爱护公物!53复旦大学发育生物学研究所动物室复旦大学发育生物学研究所动物室走廊一般宽2米左右,接合处应为弧形;最好加护栏或缓冲装置,防损坏墙体;各种水、电、管、线尽量安排在夹层中,不暴露在明处。54人员和动物净化的特殊性和重要性人员和动物净化的特殊性和重要性 与其它物品相比,与其它物品相比,人员和动物的净化既具有特殊性,人员和动物的净化既具有特殊性,更具有重要性。更具有重要性。其特殊性在于,其特殊性在于,人员和动物都是生命体,人员和动物都是生命体,不能接受其它物品的消毒方式,只能进行不能接受其它物品的消毒方式,只能进行“外包装外包装”的的净

20、化净化,即人员只能经更衣、淋浴、手消毒而净化,动物,即人员只能经更衣、淋浴、手消毒而净化,动物只能经洁净运输和外包装消毒而净化。而其重要性在于,只能经洁净运输和外包装消毒而净化。而其重要性在于,人和动物携带微生物的机会比其它物品更多、更难以清人和动物携带微生物的机会比其它物品更多、更难以清除,且对内环境和动物的危害更具有直接性。除,且对内环境和动物的危害更具有直接性。因此,因此,对对人员和动物进出时的净化把关是屏障设施运行管理中的人员和动物进出时的净化把关是屏障设施运行管理中的重点和难点问题。重点和难点问题。55人员进出时的净化管理要点人员进出时的净化管理要点(1)与传递窗类似,与传递窗类似,

21、人员净化通道的消毒效果也不易确实。因此,无关人人员净化通道的消毒效果也不易确实。因此,无关人员和患有皮炎、感冒、肠炎等传染性疾病和过敏者,不得进入设施内环境。员和患有皮炎、感冒、肠炎等传染性疾病和过敏者,不得进入设施内环境。进入者应养成良好的无菌卫生观念,经常洗澡、修剪指甲,勤洗换衣服,进入者应养成良好的无菌卫生观念,经常洗澡、修剪指甲,勤洗换衣服,不抓耳挠腮;男士不蓄留长发和胡须,女士不化装。进入时,不抓耳挠腮;男士不蓄留长发和胡须,女士不化装。进入时,不随身携带不随身携带钥匙、手表、手机、饰物等与作业无关的物品;钥匙、手表、手机、饰物等与作业无关的物品;进入后,进入后,要随手关好每一要随手

22、关好每一道房门,不得解脱工作服,更不得吸烟、饮食和嬉戏打闹。人员进出设施道房门,不得解脱工作服,更不得吸烟、饮食和嬉戏打闹。人员进出设施的的程序是:程序是:进入屏障设施的办公休息、洗刷消毒等外环境时,就应换着已进入屏障设施的办公休息、洗刷消毒等外环境时,就应换着已消毒的消毒的外区拖鞋外区拖鞋;进入;进入一更衣间一更衣间后,将随身携带的所有物品放入储柜内后,将随身携带的所有物品放入储柜内(需传入屏障内的物品应经传递窗传递),并脱去全部衣物(无淋浴装置(需传入屏障内的物品应经传递窗传递),并脱去全部衣物(无淋浴装置者,只脱去外衣),然后进入淋浴间进行淋浴(无淋浴装置者,应进行手者,只脱去外衣),然

23、后进入淋浴间进行淋浴(无淋浴装置者,应进行手消毒并脱去外区拖鞋)。赤脚进入消毒并脱去外区拖鞋)。赤脚进入二更衣间二更衣间后,后,按照按照“穿上衣穿上衣戴口罩戴口罩穿裤子(上衣下摆要掖于裤子之内)穿裤子(上衣下摆要掖于裤子之内)穿拖鞋穿拖鞋戴手套戴手套”的顺序,穿着已的顺序,穿着已消毒的工作服装消毒的工作服装。经过。经过风淋或缓冲风淋或缓冲后,进入屏障设施内开展相关工作。后,进入屏障设施内开展相关工作。56人员进出时的净化管理要点人员进出时的净化管理要点(2)进入屏障设施之后的流动路线:进入屏障设施之后的流动路线:对于双走廊设施,应按照对于双走廊设施,应按照最最洁净区洁净区(清洁走廊、洁净库房等

24、)(清洁走廊、洁净库房等)洁净区洁净区(饲养间或实验间)(饲养间或实验间)次洁净区次洁净区(污物走廊、出口缓冲间)(污物走廊、出口缓冲间)非洁净区非洁净区(外环境)的(外环境)的顺序进行流动;对于单走廊设施,应按照洁净区(清洁走廊)顺序进行流动;对于单走廊设施,应按照洁净区(清洁走廊)最洁净区(洁净库房、饲养间或实验间)最洁净区(洁净库房、饲养间或实验间)洁净区(清洁走廊)洁净区(清洁走廊)次洁净区(出口缓冲间)次洁净区(出口缓冲间)非洁净区(外环境)的顺序进行流非洁净区(外环境)的顺序进行流动。回到一更衣间后,将工作服脱下并换着便衣。最后,于屏障动。回到一更衣间后,将工作服脱下并换着便衣。最

25、后,于屏障设施出入口换着便鞋,离开屏障设施。设施出入口换着便鞋,离开屏障设施。脱便鞋看程序登记手消毒脱一更鞋取二更鞋取猴服穿上衣戴口罩穿下衣鞋戴手套风 淋57动物进出时的净化管理要点动物进出时的净化管理要点 进入屏障设施的进入屏障设施的动物必须是清洁级以上等级的动动物必须是清洁级以上等级的动物,其来源必须是具有生产许可证的正规实验动物生物,其来源必须是具有生产许可证的正规实验动物生产单位。每批动物必须附有相应的动物质量合格证,产单位。每批动物必须附有相应的动物质量合格证,运输和包装必须符合有关国标的规定。运输和包装必须符合有关国标的规定。采购来的动物应采购来的动物应经过传递窗传入经过传递窗传入

26、屏障设施内。传屏障设施内。传递消毒时,既要递消毒时,既要保证运输容器表面消毒的彻底性,又保证运输容器表面消毒的彻底性,又要保证动物的健康和安全。要保证动物的健康和安全。接收动物时接收动物时,屏障区工作人屏障区工作人员员应先打开运输容器仔细检查动物的健康状况应先打开运输容器仔细检查动物的健康状况。未见未见异常时,方可将动物转入检疫间异常时,方可将动物转入检疫间(运输容器不得进入(运输容器不得进入屏障设施内,以有效避免其对屏障设施的污染)屏障设施内,以有效避免其对屏障设施的污染)进行进行37天的隔离观察。观察期结束而未见异常情况者,天的隔离观察。观察期结束而未见异常情况者,方可将动物转入饲养间进行

27、饲养和实验方可将动物转入饲养间进行饲养和实验。58独立供气动物笼系统(independent ventilation cage,IVC)20世纪90年代研制出的一种屏障系统动物饲养设施的空气经过过滤,是一种低成本高效率的SPF屏障系统.适合于使用啮齿类动物进行动物实验研究;应用IVC系统最好是在洁净动物实验室内,其更换笼内垫料应在特殊封闭罩内进行.5960IVC的特点 采用微型隔离技术,通过向动物饲养笼具内采用微型隔离技术,通过向动物饲养笼具内部输送经过低、中、部输送经过低、中、高效过滤的空气以高效过滤的空气以 获得洁净度为获得洁净度为1万万 1百级的生活环境。百级的生活环境。61 三、普通环

28、境 普通环境(open system)是饲养普通动物的设施。这类设施也要能适合实验动物居住的基本要求。它并非不需要进行严格的环境控制和积极的微生物控制,只是不似屏障系统那样严格,变动范围较大,且不能控制传染因子。普通环境设施只适用于饲养教学等用途的普通级实饲养教学等用途的普通级实验动物。验动物。一些大动物的科学研究目前仍可在普通大动物的科学研究目前仍可在普通设施中进行设施中进行。6263犬饲养室犬饲养室6465动物试验设施环境指标:以屏障系统小动物为例 温度:2025 日温差:34 相对湿度:4070%换气次数:1020 次/h 气流速度:0.10.2 m/s 压强梯度:2050 Pa 空气洁

29、净度:10000级 落下细菌数:3个/皿 氨浓度:14 mg/m3 噪声:60dB 照度:(工作)150300 lx (小动物)1520 lx,(大动物)100200 lx 昼夜明暗交替时间:12/12或10/14 小时66四、实验动物的饲养条件 1笼 具(cage)笼具是实验动物长期生活的环境,其质量优劣直接影响实验动物的健康。我国的实验动物笼具正朝标准化和通用化方面发展。6768不锈钢猴、狗笼不锈钢猴、狗笼69不锈钢双层双组实验狗笼不锈钢双层双组实验狗笼7071大鼠代谢笼大鼠代谢笼72昆虫的笼具昆虫的笼具73斑马鱼的饲养设备斑马鱼的饲养设备74非洲爪蟾的饲养设备非洲爪蟾的饲养设备75实验动

30、物笼具的一般要求:(1)舒适卫生;)舒适卫生;(2)坚固耐用)坚固耐用;(3)操作使用方便;)操作使用方便;(4)牢固、稳定、不宜过大)牢固、稳定、不宜过大。76 2饮水设备和饮用水要求 一般采用饮水瓶(玻璃瓶或无毒塑料瓶)、饮水盒或自动饮水装置。具有结构简单、价格低廉、不易交叉感染、便于清洗消毒等优点。7778 大动物饮水用盆、罐应作固定,以免被弄翻。自动饮水装置可以节省劳力,尤其饲养大量动物时更有价值。79 实验动物饮水要求,一般按实验动物的等实验动物饮水要求,一般按实验动物的等级而不同。普通级动物可按照生活饮用水级而不同。普通级动物可按照生活饮用水卫生标准的要求,屏障系统及隔离器内饲卫生

31、标准的要求,屏障系统及隔离器内饲养的动物的要求使用高压灭菌水或酸化水。养的动物的要求使用高压灭菌水或酸化水。80 3排泄物和垫料 实验动物使用的垫料要满足几个条件:垫料对动物无刺激作用,无毒性、无异味、无油脂;垫料吸水性能良好,尘埃少,并应有吸附臭气的作用;使用方便,容易获得,价格低廉。81 常用的垫料有木屑常用的垫料有木屑(粗及细粗及细)、木刨花、木刨花、打碎的玉米棒及杆、吸水纸及棉花等。打碎的玉米棒及杆、吸水纸及棉花等。可根据不同要求选择使用。垫料需经杀可根据不同要求选择使用。垫料需经杀虫、灭菌后才能使用。虫、灭菌后才能使用。应及时清除动物的排泄物和垫料。更换应及时清除动物的排泄物和垫料。

32、更换垫料频度每周至少垫料频度每周至少1-2次。次。8283五、五、特殊动物实验设施特殊动物实验设施 1感染性动物实验设施 感染动物设施是指使用病原体对动物进行实验感染的设施。此种设施除备有通常动物设施要求外,还必须具备防止由动物传染人动物传染人,动物相互间的交叉感染动物相互间的交叉感染、动物向设施外感染动物向设施外感染的结构和功能。84 此类设施设计的目的是防止生物性危险和有害因素向动物实验设施和外界的污染。目前通常采用物理学隔离,目前通常采用物理学隔离,主要是在气密性结构内采用负压通风,主要是在气密性结构内采用负压通风,以达到防止气溶胶扩散污染的目的。85 目前国内外根据隔离的要求分为A1-

33、A4 四个级别:A1级:进行普通微生物实验的动物实验室,对工作人员进出要求不严。A2级:禁止非工作人员进入实验区。可能发生气溶胶扩散的实验在级生物安全柜中进行。A3级:禁止非工作人员进入设施内。由双重密封门或气闸室(缓冲隔离室)将核心区与外部实验区隔离。外部空气通过高效过滤器送入室内,向外排出的空气亦需经高效过滤器过滤。A4级:采用独立的建筑物内用隔离区和外部隔断的构造。根据相应的隔离等级使室内保持负压。在密封型(即级)生物安全柜内进行实验,非本区工作人员禁止入内。86 2放射性核素动物实验设施 放射性同位素动物实验设施,简称RI动物实验设施。设施要求防止放射性同位素对人的影响,防止射线对一般

34、动物和环境的放射能污染及同位素的泄漏。其要求应按国家有关规定执行。87 3特殊化学物质动物实验设施 用化学物质作安全性试验等的特殊动物实验对实验者及有关人员的健康有一定影响,如:致癌性物质等,其设施与设备必须防止对人的危害和对实验场所及周围环境的污染。88 在修建以上三种特殊的实验动物设施时,为了人民的身体健康必须严格按照国家有关要求,专门的设计、施工单位进行施工;在进入特殊实验动物设施进行动物实验时应该首先认真阅读有关操作规程,严格按要求去做,千万不能马虎。89实验动物设施的管理 1、完善的组织和严密的制度与规范 2、严格的人员、物品、动物质量控制 3、设施内部环境的管理 4、设备的管理:通

35、风空调系统是核心设备;高压锅是必备设备;其他设备。90实验动物饲料与营养标准 实验动物实验动物 配合饲料卫生标准配合饲料卫生标准 实验动物实验动物 配合饲料通用质量标准配合饲料通用质量标准 实验动物实验动物 营养标准营养标准91实验动物实验动物 配合饲料卫生标准配合饲料卫生标准 实验动物配合饲料应该无毒、无害,不得掺入抗生素、驱虫剂、防腐剂、色素、促生长剂以及激素等添加剂。化学污染物:砷、铅、镉、汞、农药残留物、黄典霉毒素B1。微生物:大肠杆菌、致病菌(沙门氏菌)。清洁级实验动物配合饲料应进行高压消毒灭或辐照灭菌,以符合其特殊要求。92实验动物配合饲料通用质量标准实验动物配合饲料通用质量标准

36、配合饲料应混合均匀,新鲜、无杂质、无异味、无霉变、无发酵、无虫蛀及鼠咬。需要消毒灭菌的配合饲料,应根据不同消毒灭菌方法可能造成某些种营养成分的损失,适当地提高相应营养成分的含量,保证配合饲料在消毒后和饲喂前符合标准的规定。不得掺入抗生素、驱虫剂、防腐剂、色素、促生长剂以及激素等药物及添加剂。为了保证实验动物的正常生长,饲料原料不得使用菜籽饼粕、棉籽饼粕、亚麻仁饼粕等含有有害毒素的饲料原料。饲料原料应符合GB 13078的规定。不得使用发霉、变质或被农药及其他有毒有害物质污染的饲料原料。93饲料营养1、从合格实验动物饲料生产单位购买。2、注意保管。3、适量喂用。链接9495附1:国标对动物实验设

37、施环境指标的规定项 目指 标小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠犬、猴、猫、兔、小型猪鸡普通环境屏障环境屏障环境隔离环境普通环境屏障环境屏障环境隔离环境隔离环境温度,温度,19262025162618221626日温差,日温差,43433相对湿度,相对湿度,%4070换气次数,次换气次数,次/h81010202050810102020502050气流速度,m/s0.10.2压强梯度,压强梯度,Pa20501001502050100150100150空气洁净度,级空气洁净度,级10 00010010 000100100落下菌数,个落下菌数,个/皿皿 303无检出303无检出无检出氨浓度,氨浓度,mg/m3 1

38、4 噪声,dB 60照 度,lx工作照度150300动物照度1520100200510明暗交替时间,h12/12或或10/14下一页9697实验动物实验动物狭小的空狭小的空间间笼具不合适98 表表 4 4-5 5 常常见见成成年年实实验验动动物物所所需需饲饲养养面面积积和和空空间间 动动物物种种类类 饲饲养养方方法法 每每只只饲饲养养面面积积(m m2 2)每每只只饲饲养养体体积积(m m3 3)小小鼠鼠 集集体体笼笼养养 0 0.0 00 06 67 7-0 0.0 01 13 35 5 0 0.0 00 00 08 8-0 0.0 00 01 16 6大大鼠鼠 集集体体笼笼养养 0 0.0

39、 01 17 75 5-0 0.0 04 44 4 0 0.0 00 03 35 5-0 0.0 00 09 9豚豚鼠鼠 集集体体笼笼养养 0 0.0 04 44 4-0 0.0 08 88 8 0 0.0 00 08 88 8-0 0.0 01 17 7 兔兔 笼笼养养 0 0.1 14 4-0 0.2 27 7 0 0.0 06 6-0 0.1 10 08 8 猫猫 笼笼养养 0 0.1 18 8-0 0.2 27 7 0 0.3 34 42 2-0 0.4 49 9 狗狗 笼笼养养 0 0.7 72 2 0 0.5 57 75 5 栏栏养养 0 0.2 27 7-1 1.0 08 8 运

40、运动动场场 0 0.7 72 2-1 1.0 08 8 猕猕猴猴 笼笼养养 0 0.0 09 9-0 0.7 72 2 0 0.1 10 08 8-0 0.9 93 36 699下一页 表表 4 4-3 3 一一些些国国家家对对实实验验动动物物设设施施内内相相对对湿湿度度的的规规定定 动动 物物 实实验验动动物物设设施施内内规规定定的的相相对对湿湿度度(%)美美国国 I IL LA AR R*O OE EC CD D*日日 本本 中中 国国 小小 鼠鼠 4 40 07 70 0 3 30 07 70 0 4 45 55 55 5 4 40 07 70 0 大大 鼠鼠 4 40 07 70 0

41、3 30 07 70 0 4 45 55 55 5 4 40 07 70 0 仓仓 鼠鼠 4 40 07 70 0 3 30 07 70 0 4 40 07 70 0 豚豚 鼠鼠 4 40 07 70 0 3 30 07 70 0 4 45 55 55 5 4 40 07 70 0 兔兔 4 40 07 70 0 3 30 07 70 0 猫猫 3 30 07 70 0 4 45 55 55 5 犬犬 3 30 07 70 0 4 45 55 55 5 猴猴 4 40 06 60 0 5 55 56 65 5 *:I IL LA AR R 代代表表“实实验验动动物物资资源源研研究究所所”。*:

42、O OE EC CD D 代代表表“经经济济合合作作与与发发展展组组织织”。100大鼠環狀尾症大鼠環狀尾症(Ring tail)常發生於出生後常發生於出生後7-15天之幼鼠天之幼鼠101 4 4-1 1 不不同同环环境境温温度度时时戊戊巴巴比比妥妥钠钠给给药药导导致致大大鼠鼠死死亡亡比比较较 环环境境温温度度()给给药药动动物物数数(只只)死死亡亡动动物物数数(只只)死死亡亡率率(%)1 12 2 2 20 0 2 20 0 1 10 00 0 1 14 4 2 20 0 2 20 0 1 10 00 0 1 16 6 2 20 0 2 20 0 1 10 00 0 1 18 8 2 20 0

43、 1 10 0 5 50 0 2 20 0 2 20 0 1 10 0 5 50 0 2 22 2 2 20 0 1 10 0 5 50 0 2 24 4 2 20 0 1 10 0 5 50 0 2 26 6 2 20 0 7 7 3 35 5 2 28 8 2 20 0 6 6 3 30 0 3 30 0 2 20 0 1 11 1 5 55 5 3 32 2 2 20 0 1 16 6 8 80 0102 表表4 4-2 2 温温度度对对三三种种药药物物 L LD D5 50 0的的影影响响L LD D5 50 0(m mg g/k kg g)药药 物物1 15 5.5 5 2 27 7

44、 苯苯异异丙丙胺胺(A Am mp ph he et ta am mi in ne e)1 19 97 7.0 0 9 90 0.0 0 盐盐酸酸脱脱氧氧麻麻黄黄碱碱(M Me et th he ed dr ri in ne e)1 11 11 1.0 0 3 33 3.2 2 麻麻黄黄碱碱(E Ep ph he ed dr ri in ne e)4 47 77 7.1 1 5 56 65 5.0 0103返回返回营养因素营养因素104微生物与寄生虫环境因素影响微生物感染寄生虫感染下一页下一页105密度过大下一页下一页106猫和老鼠猫和老鼠兔子与豚鼠兔子与豚鼠种间关系种间关系下一页下一页107人为因素对动物的影响人为因素对动物的影响下一页下一页108通过训练可以做到动物配合实验操作下一页下一页109 人的工作态度与动物的关系人的工作态度与动物的关系返回返回

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