噬菌体综合防治细则

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1、噬菌体的综合防治细则一、环境：1、马路：每天清扫一次，每月洒漂白粉一次。2、楼顶：每月清扫一次；每月洒漂白粉一次。3、楼面：每天打扫卫生，无料液，无积水。用来苏水喷洒楼面消毒；接种前30分钟，用0.5新洁尔灭溶液喷洒设备及周围；每周对种子楼、夹层、楼面、总过滤器区取样进行碟检检测噬菌体。4、走廊、各操作室、休息室：每天打扫卫生，每周喷洒来苏水一次。5、地面：发酵周边地面每天清扫一次。每半月对大罐中、下部地面、罐底洒甲醛一次；每月用热碱水对发酵楼地面彻底清洗消毒一次。6、夹层：每周清扫一次，洒甲醛消毒。7、阴沟：每周清扫一次，无淤积；每月在阴沟周围洒漂白粉消毒一次。8、取样：每次取样时用器皿将取

2、样外流出的发酵液接好，集中后用万分之三的甲醛闷消30分钟后倒入下水道，并用水冲净桶及下水道周边。每周用蘸有新洁尔灭的纱布擦净取样嘴的污垢。9、活菌液：每班做样后，加万分之一的甲醛煮沸，倒净，再冲洗干净。10、器皿消毒：每周定期用漂白粉水清洗消毒。11、菌渣：及时处理。12、卫生：保持楼面干净无残留发酵液，无积水；保持设备、门窗上无灰尘；车间周围的沟无淤积。二、空气系统：1、列管冷凝器、旋风分离器：每月一次检漏；三级冷却每级温差不超过45C；每小时排油水一次。2、总过滤器、膜过滤器、金属过滤器：严格按过滤器操作规程使用操作，空气温度控制在40-50C,使用20天左右开始检查（尘埃粒子计数器），检

3、查合格后才能使用，必须安排专人处理消毒。（总过滤器处理：加碱或洗涤剂煮丝网、油污清洗，吹干后再填装）3、滤纸过滤器：每批消毒，使用3-5批更换介质，染菌罐每批更换介质再进罐。4、空气管道：每日对管道巡检，排灰一次；每月进行一次检漏。5、一、八车间过滤器：每月定期清洗更换过滤袋。6、分过滤器：正常每月消毒一次，与总过滤器同步进行；消毒前，应对过滤器进行认真检查，装好后应用肥皂水试压试漏，消毒时，先将蒸汽管道的冷凝水排尽后，将蒸汽缓慢地通入过滤器，当压力达到0.1MPa时再保压1小时。染球菌一批或连续两批染杂菌必须消毒处理。三、设备：1、打料罐、配料罐、打料管道：每批冲洗干净，每周消毒处理一次；配

4、料按工艺操作。2、放料管道：每批冲洗干净；每天放罐后洗罐水压入提炼，用蒸汽冲消5分钟；每月用煮罐碱水冲洗消毒一次并压入提炼。3、酸化罐、滤洗液罐：每批冲洗干净；每周喷新洁尔灭一次；每月用碱水（1.52，煮开，浸泡23小时）清洗一次。4、中、小罐：进罐前试压检漏，检查近罐第一阀。小罐每批移完后清洗干净，加水煮罐；中罐每批空消；中、小罐每月煮碱水（1.52，煮开，浸泡23小时）一次。5、糖罐：每月用碱水（1.52，煮开，浸泡23小时）清洗一次。6、油罐：每月煮碱水（1.52，煮开，浸泡23小时）清洗一次。7、大罐：进罐前试压检漏，检查近罐第一阀。正常时可根据实际情况进行空消；染菌罐批必须进行空消。

5、放罐后要冲洗干净，并下罐清除死角残渣。每月煮碱（2，120度，23小时）一次，煮完碱水后蛇管试压试漏。8、料罐：每日补料后冲洗干净；每半月煮碱一次。9、移种补料管道系统：每周试压检漏处理一次；每月浸碱后碱水通过分配站压入管道消毒一次。移种前必须检查管道上各小排汽及阀垫，补料系统的隔膜阀垫子要定期检查更换。10、系统消毒：糖系统每周消毒一次；油系统每周消毒一次；丙醇系统每周消毒一次。四、罐前准备：1、近罐第一阀：每批必查阀芯、阀杆、阀垫。2、蛇管、罐体、轴封：每批试压检漏。3、大、中、小罐：每批清除死角残渣。4、糖、计量罐的隔膜阀每半月拆检一次。每周抽查一次。5、油分配站的隔膜阀每半月拆检一次。

6、每周抽查一次。6、空气进罐隔膜阀片：中、小罐、糖、油、丙醇罐每季拆检一次；大罐每半年拆检一次。对连续染菌罐应同分过滤器一起拆检、消毒。7、移种分配站隔膜阀每周抽查一次，每月更换一批，每周试漏一次。五、消毒：预热、实消、保压按消毒工艺执行。六、移种及处理：1、移种、补料管、罐：每批按工艺规定操作。2、移种管道：移种、补料完后用蒸汽冲消5分钟以上；消移种管道时每15分钟巡检一次；保证小排汽畅通。3、小排汽及周围：每次用后冲洗干净，保证无菌液、积水。七、异常处理：1、中、小罐染菌：煮至120C，保压10分钟，放下水道，洗净，煮清水至120C后浸泡12小时，进罐前查漏。2、大罐染菌：加万分之五的甲醛煮

7、放，洗净后，加甲醛进行闷消30分钟，洗净，进罐前查漏。3、中、小罐化稀：煮至120C，保压10分钟，放下水道，洗净，煮碱水(1.5%)2小时，煮开清水浸泡12小时。4、大罐化稀：加万分之五的甲醛煮至120C，保压10分钟，放下水道，洗净后煮碱水(2%)120度保温12小时，清水洗。八、菌种及相关无菌管理：1、做好菌种的技术档案工作，建立好台帐。2、对菌种的系谱和特性进行认真的整理、分类，在生产过程中，不同菌号的菌种交叉使用。3、对菌种有计划的进行筛选，在筛选的过程中，注重种子的抗噬菌体性能的筛选。4、对筛选出来的斜面和每一批新斜面要到菌种中心做噬菌体检测实验。5、化稀罐，及时留样，送菌种中心做

8、噬菌体检测。6、操作室、无菌室日常消毒处理：1) 环境处理：每天工作开始前,将所属卫生区域打扫一遍,地面用扫帚扫干净后,用拖把拖净,所有桌面、台面用清水擦拭干净；每天进无菌室前开启紫外灯30分钟对无菌室及缓冲间进行灭菌处理,当天用具(包括空白培养基)可同时放入缓冲间进行表面灭菌.2) 进入无菌室后,应先用0.1%的新洁尔灭溶液洗手,擦拭操作台,然后用75%的酒精再对手及操作台擦拭一遍,并对所有放置超净工作台的物品也用75%的酒精进行揩擦.(4)每日对无菌室空气洁净度进行监测，在工作台(工作时)和无菌室空气管道风口处放置无菌双碟,37C培养48小时后,菌落计数.5) 工作完毕，用0.1的新洁尔灭

9、溶液对操作台、墙面、地面、凳子进行擦拭，并用0.25的新洁尔灭向无菌室及缓冲间空中喷洒。并紫外灭菌30分钟。(6)所有废弃的活菌培养物均应放入蒸煮锅内煮沸35分钟，染其它杂菌、噬菌体培养物另加适量甲醛煮沸十分钟，方能丢入垃圾中。7)对恒温培养间的脏物(如修理后、摇瓶破损等)应及时进行处理,尤其是摇床、培养架上的污渍，应用0.1的新洁尔灭溶液进行揩擦。7、作室、无菌室每周消毒处理：1) 用0.1%的新洁尔溶液擦洗操作室、培养间所有用具、门窗、柜子、培养箱、冰箱、水池、地面、台面、墙壁、培养间、摇床等，再用清水擦一遍，之后用来苏水喷洒地面。2) 每周用0.1的新洁尔灭溶液对无菌室的天花板、墙壁、地

10、面、操作台，缓冲间的天花板、墙壁、地面进行一次彻底的消毒处理，一周或间隔一周用苯酚薰蒸一次。3) 每周对无菌室、操作室环境检查一次无菌情况：无菌室清洁后，取细菌培养基平皿，均匀放置无菌室内各工作位置上以及各缓冲间，开盖暴露30分钟在3537C培养48小时后，计算菌落数，无菌室沉降菌均值应W3个/皿，操作室W10个/皿。并经常对操作室、恒温培养间、走廊进行噬菌体检测，发现异常应及时进行特殊处理。4) 每周检查一次超净工作台无菌程度：打开紫外灯照射30分钟后，打开超净台送风系统运行30分钟，37C培养48小时后计算菌落数，其沉降菌均值应W1个/皿。(5)沉降菌检测不合格的无菌室不得使用，须立即清扫

11、；必要时可使用甲醛按每立方米24ml/m3进行熏蒸12小时，打开清洁工作台送排风系统，排除干净后，再次检测直至合格。6) 不同无菌室有各自专用的清洁用具，不得混用。7) 使用过的清洁工具清洁完毕后，要浸渍消毒(如：0.10.5%新洁尔灭溶液)，放入规定地点。9、月处理：1) 每半月或每月对无菌室、恒温培养间无菌空气管道送风口纱布进行一次更换；纱布倒上5%新洁尔灭甘油液；每月对所有玻璃器皿用1.52.0%碱水煮消一次，每月对种子用空气过滤器进行消毒处理一次。九、其它1、霉菌、生化：每月一次对所有器具消毒，摇瓶煮碱。与煮罐同步进行。2、板框：每批冲洗干净菌渣及残液；每两周刷槽板一次；每月刷板一次；染菌严重的罐，滤布进行消毒处理；酸化罐洗罐碱水打入板框；地面清洗卫生要求同发酵楼面。3、有针对性地对部分原材料如豆粉、玉米浆等取样进行噬菌体检测。4、对检测发现有噬菌体的地方重点撒漂白粉薰甲醛。5、提炼接收发酵液时，酸化时正常罐加万分之三的甲醛，染菌较严重的发酵液，应加入万分之五的甲醛。每月煮碱一次。5、以上的处理情况均应建立专门台帐，要有专人负责安排、检查、记录。