要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞

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1、要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不 能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞 与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞 的特性，它既具有 B 淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永 存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异 单克隆抗体生产单克隆抗体生物靑一专心懺生物致敏的Bi# EOT (能够分泌特异性的抗体， 不能在怵外怅期生存骨髓瘤细J胞(myeloma)(不能分泌特异性的抗体，厂 但能在体夕卜怅期主存龟阳

2、性杂交瘤细胞(hybridoma)I既能分泌特异性抗体，Cz I又能够在体外长期生存克睦化培养I(产生单克睦的阳性杂交瘤细胞)核苷酸主要合成途核苷酸补救合成途次黄嘌吟(H)胸腺嘧啶核苷核苷酸DNA随机融合后的细胞类型轴胞组合HGPRT生长状态淋巴细胞+骨髓瘤+长期生长淋巴细胞+淋巴细胞+短期生长Ti髓瘤+骨髓瘤-不能生长未融合淋巴细胞+短期牛长未融合骨髓瘤-不能生长免疫动物 培养骨髓瘤细胞收集致敏的B淋巴细胞收集骨髓瘤细胞细胞融合HAT选择培养基筛选杂交瘤细胞检测筛选阳性细胞 克隆化培养（反复3-5 次）获得稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株McAb 的制备（杂交瘤培养上清或诱生腹水）McAb 纯化及鉴定