培养基的制备与细菌的接种的实验报告

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1、培养基的制备与细菌的接种的实验报告篇一:细菌的分离纯化和接种实验环工综合实验细菌的分离纯化和接种实验实验报告环境科学与工程学院实验中心篇二:微生物实验报告细菌微生物实验报告题目年级专业实验者学号小组成员指导老师一、实验目的 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 2021 级临床医学八年制1. 了解细菌生长的基本营养条件,熟悉培养基的类型,学习并掌握培养基的原 则与方法。2. 掌握无菌操作技术,掌握病原菌的分离与培养方法。3. 了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。4. 学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。5. 掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法,熟悉不同类型细菌的基本形态。6. 掌握糖

2、发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。7. 从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。二、实验器材1. 培养基的制备:干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量 筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石 棉网2. 空气与人体体表细菌学检查:琼脂培养基、酒精、碘酒3. 细菌的分离培养:脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、 接种环、酒精灯、打火机4. 细菌的纯培养:接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5. 细菌的形态学检测:斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、 吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性

3、笔、革兰染色试剂、 液体培养基6. 细菌的生化试验:葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、 中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片(青霉素、庆大霉素、头孢曲 松)、玻片、兔血浆、生理盐水7. 细菌的血清学试验:玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒 精灯三、实验方法与步骤1. 培养基的制备称量琼脂粉f蒸馏水f加热溶化f分装f集中放在试管筐里f罩上硫酸纸、 牛皮纸f用橡皮筋扎好f放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内f送到高压蒸汽灭 菌室(洗刷室)f灭菌2. 空气与人体体表细菌学检查2.1 空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板,选择实验楼女厕所f将平板盖打开,盖朝下放置在 平板旁

4、边f平板暴露于空气中15分钟f平板倒扣盖上f作标记f37C温箱培养 24小时f观察结果。2.2 人体体表细菌学检查 甲丙常规洗手,乙丁标准洗手。甲和乙、丙和丁分别共用 1 个平板按下图在普通平板上接种手指上的细菌。第1 格为洗手前,第2 格为洗手后,第3 格为消 毒后,第 4 格空白对照。3. 细菌的分离培养3.1 实验方法平板划线法:借助于划线,将混杂的多种细菌,在平板表面分散成单个细菌, 并固定在某一点上。培养以后细菌各自分裂繁殖,形成肉眼可见的细菌集团(单 菌落)。3.2 实验步骤接种环烧灼灭菌f分别取脓汁标本与粪便标本点在普通平板和依红美蓝平板 上,各做两份,f烧掉接种环上多余的标本f

5、冷却后,应用分区划线分离法,将 脓汁标本接种于营养琼脂平板(2 份),粪便标本接种于伊红美蓝平板(2 份) f接种环烧灼灭菌f将平板倒置37C培养18 24hf观察结果4. 细菌的纯培养甲f普通平板f金黄色菌落(auratus, golden yellow)fl支斜面乙f普通平板f白色菌落(albus, white)l支斜面丙f EMB平板f紫黑色菌落(atropurpureus)fl支斜面丁 f EMB平板f粉红色菌落(pink) fl支斜面斜面正面上2/3作标记:组号 + 金黄、白色、紫黑、粉红。5. 细菌的形态学检测5.1 革兰试剂染色5.2 显微镜油镜使用步骤10X物镜f看清标本f滴加

6、香柏油f 100X油镜f浸泡油中f模糊物象f细 调节调焦,观察物像f记录结果f关闭电源f擦镜纸拭去香柏油f擦镜纸沾少 许乙醇和乙醚(7:3)混合液擦拭f擦镜纸擦拭油镜。5.3 肉汤接种法接种环烧灼灭菌f分别在斜面培养物中挑取菌苔少许f立即移入肉汤培养基 管中f在接近液面的管壁上轻轻研磨f沾取少量肉汤调和f混匀f试管口通过 火焰2-3次灭菌f塞好棉塞f35C培养46小时6. 细菌的生化试验6.1 细菌的糖发酵实验接种针烧灼灭菌f用灭菌接种针分别刮取实验所得到的紫黑色和粉红色菌苔 f分别接种在葡萄糖发酵微量管中和乳糖发酵微量管内f接种环烧灼灭菌f将 微量管平放在平板内f37C培养过夜后f观察结果。

7、6.2 药敏实验接种环烧灼灭菌f分别取之前实验中得到的四种菌液在普通平板密集涂布(如图6) f接种环烧灼灭菌f标记:青、头、庆f镊子火焰消毒f贴青霉素、 头孢曲松、庆大霉素纸片f按压f镊子消毒f倒置37C培养6.3 凝固酶实验取干净玻片一张f在左右两边分别滴加兔血浆1-2滴,生理盐水1滴f接种 环烧灼灭菌f冷却f分别用接种环取之前实验所得到的白色和黄色菌苔(2 3 个菌落的菌量)与血浆研磨混合f边混匀边观察结果f接种环烧灼灭菌f稍等片 刻,观察结果6.4 动力实验接种针烧灼灭菌f分别用接种针在紫黑色和粉红色的斜面取菌f从半固体培 养基中心垂直刺入,可刺达近底管处,但不要到达管底f循原来的路线退

8、出接种 针f试管口迅速通过篇三:培养基配制及灭菌实验报告单培养基配制及灭菌实验报告单班级名字 小组成员 时间指导老师一、实验目的 了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握高压蒸汽灭菌操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的 营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。马铃薯培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质, 所以可供

9、微生物 生长繁殖之用。高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变 性从而达到杀死微生物的效果。平板划线接种法(分离培养法):是将细菌分离培养的常用技术,其目的是 将混有多种细菌的培养物,或标本中不同的细菌(病原菌与非病原菌)使其分散 生长,形成单个菌落或分离出单一菌株,便于识别鉴定。平板划线接种方法较多, 其中以分段划线法与曲线划线法较为常用。三、试剂与器材1. 器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高 压蒸汽灭菌锅、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、镊子等。2.试剂马铃薯、葡萄糖、琼脂、水等四、实验内容1.称量f溶化f调pH过滤f分装f加塞f包扎f灭菌f无菌检查2高压蒸汽灭菌:加水一装物品一加盖一加热一排冷空气一加压一恒压一降压回零f排气f取物f无菌检查五、关键步骤及注意事1. 要严格按配方配制。2. 调 pH 不要过头。3.高压灭菌要注意物品不要过多,加热后排除冷空气,到时降压回零取物。六讨论1. 如何检验灭菌后培养基是否合格?2. 高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后,为什么要待降到0 时才能打开排气阀,开盖取物?

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