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1、骨 髓 检 验(Bone Marrow Examination),临检教研室,一、临床应用,1.用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情监控、疗效观察 如：白血病、再障、巨幼贫血、血小板减少性紫癜的诊断；缺铁性贫血的辅助诊断,2.用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断 如：原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿等。,适应征： 原因不明的发热、恶病质； 原因不明的肝、脾、淋巴结肿大； 原因不明的外周血细胞数量、形态、种类异常 疑血液寄生虫感染,禁忌征： 血友病患者、妊娠中晚期患者,骨髓检查,骨髓细胞学检查,骨髓活检,细胞形态学检查 细胞表面抗原检查 细胞遗传学分析,骨穿部位：髂前、髂后上棘；胸骨等 抽取
2、髓液量：0.2ml 送检要求：髓片3张，并送血片2张； 详细填写骨髓检查申请单,二、标本采集与送检,骨髓穿刺术录像,三、血细胞分化发育体系及规律 1. 发育体系,原免疫细胞,颗粒：无有，非特异性特异性,核仁： 有无,2. 发育规律,四、骨髓细胞形态学检查程序,1. 观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况 取材满意的标准：骨髓小粒、脂肪滴、骨髓特有细胞 2. 判断骨髓增生程度 共分五级；按照成熟红细胞与有核细胞的比 3. 观察计数巨核细胞 4. 观察片尾及边缘有无特殊细胞,（一）低倍镜检查,1.粒红比值（G:E）： 骨髓中，粒系与红系所占百分比的比值,分类计数200 500个有核细胞（巨核细胞除外）
3、，并观察其形态、注意有无其它特殊细胞及寄生虫。,（二）油镜检查,（三）计算、分析、诊断、书写报告,2.正常成人骨髓像特点,五、常用血细胞化学染色,1.过氧化物酶(peroxidase，POX)染色,用途：鉴别急性淋巴系与非淋巴系白血病 结果：粒系(+)；单核系()； 淋巴系(),2.中性粒细胞碱性磷酸酶染色(neutrophil alkaline phosphatase，NAP),鉴别：类白血病反应NAP ，慢粒NAP 化脓感染NAP， 病毒感染NAP,3. 非特异性脂酶染色 -醋酸萘酚酯酶（- NAE） ( non specific esterase，NSE ),用途：鉴别急粒与急单 结果：
4、粒系（-）或 弱（+）不被NaF抑制 单核系(+) ，可被NaF抑制,4. 铁染色（ iron staining）,用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断 缺铁性贫血：内、外铁均减少 铁粒幼细胞贫血：内、外铁均增多 MA、HA、AA、地中海贫血：外铁轻度增多,六、细胞免疫分型,（一）临床应用:,2.用于白血病微小残留病的检测,（二）急性白血病细胞免疫表型（表格）,2.慢性粒细胞白血病（CGL，CML） 95%以上可出现Ph染色体 核形：46，XY，t ( 9 ; 22 )，(q34，q11) （abl / bcr 融合基因）,七、细胞染色体基因分析,1.急性早幼粒细胞白血病（M3） 核形：46, X
5、X, t (15 ; 17) , (q22 , q12) RAR PML易位（阳性率90%以上） （维甲酸受体基因早幼粒细胞白血病基因）,骨髓细胞学检验：,一、贫血的骨髓象特征,病因：铁缺乏，Hb生成不足、细胞质发育滞后 推测幼红细胞形态：核老浆幼 (核染色质聚集度高，深染；胞浆少而蓝，边缘不整) 幼红细胞成熟时间延长 在骨髓滞留时间长 比例增高 增生性贫血 推测骨髓增生程度：活跃 或 明显活跃,(一) 缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）,病例一： 某女性菜农，近期阵发性咳嗽、心慌，偶尔腹泻、排黑便。检体见贫血貌，心率稍快，腹部有轻微压痛，余阴性。,RBC 3.
6、41012/L，Hb 82g/L，WBC 8.2109/L，Nsg 52%，E 18%，L 30%。RBC大小不均，呈小细胞低色素。粪便连续三次隐血阳性，查到钩虫卵。,临床资料分析 症状、检体： 初步检查：,血常规、便常规+隐血,贫血、消化系统、呼吸系统病变,病例一： 某菜农近期阵发性咳嗽、心慌，偶尔腹泻、排黑便。检体见口唇苍白，心率稍快，腹部有轻微压痛，余阴性。,能否解释 阵发性咳嗽 腹泻、排黑便 心慌、口唇苍白、心率快,关于缺铁性贫血的确诊方法？,三种,骨髓增生活跃，GE 1.7:1。有核红细胞增生明显，占32%，幼红细胞“核老浆幼”，胞质少、蓝染而不整齐。成熟红细胞表现为小细胞低色素，可
7、见靶形红细胞。粒系占55.5%，其中嗜酸粒细胞占7%，形态及染色大致正常。,病例一髓象：,小 结,1. 名词：G : E 2. 正常成人髓象 3. 细胞化学染色： POX、NAP、铁染色,骨 髓 增 生 程 度,增生程度 成熟RBC/有核细胞 常见病因 极度活跃 1 ： 1 白血病 明显活跃 10 ： 1 增生性贫血 增生活跃 20 ： 1 正常骨髓、贫血 增生减低 50 ： 1 慢性再障 极度减低 300 ： 1 急性再障,返回,返回,1. 增生活跃，G/E为241 2. 粒系约50%60%，其中原粒1%，早幼粒5%，中性中、晚幼粒各约15%，杆状核较分叶核多一倍以上；嗜酸粒细胞5%；嗜碱粒细胞1%。 3. 红系约占20%，其中原红1%，早幼红细胞5%，中、晚幼红各约10%左右。成熟RBC形态正常。 4. 淋巴系约占20%，原、幼淋罕见。 5. 在1.53cm2的骨髓膜上，巨核细胞为735个，颗粒巨和产板巨50%；血小板多见，成堆分布。,
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