《高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1（42页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、析出析出溶解溶解DNA0.14 mol/L的的NaCl溶液溶液2 mol/L的的NaCl溶液溶液溶解规律溶解规律项目项目DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；溶液中溶解度不同；选择适当的盐溶液就能使选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解，而充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的总结总结溶解溶解部分发生盐部分发生盐析沉淀析沉淀蛋白质蛋白质0.14 mol/L的的NaCl溶液溶液2 mol/L的的NaCl溶液溶液溶解规律溶解规律项目项目NaCl溶液为溶液为2 mol/L时，时，DNA溶溶解，而部分蛋白
2、质发生盐析生成沉解，而部分蛋白质发生盐析生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于不溶于NaCl溶液的杂质；溶液的杂质；当当NaCl溶液稀释至溶液稀释至0.14 mol/L时，时，DNA析出，过滤可除去溶于析出，过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质溶液的部分蛋白质和其他杂质溶于溶于NaCl溶液中并溶液中并稀释稀释DNA在不同在不同浓度的浓度的NaCl溶液中的溶溶液中的溶解度不同解度不同目的目的方法方法基本原理基本原理鉴定鉴定DNA加入二苯胺，加入二苯胺，并沸水浴加并沸水浴加热热DNA可被二苯胺可被二苯胺染成蓝色染成蓝色DNA析出，除去溶于析出，除去溶于
3、酒精的蛋白质酒精的蛋白质加入冷却酒加入冷却酒精精(95%)DNA不溶于酒精不溶于酒精溶液溶液嫩肉粉中含木瓜蛋白嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，分解蛋白质酶，分解蛋白质加入嫩肉粉加入嫩肉粉DNA不被蛋白酶不被蛋白酶所水解所水解目的目的方法方法基本原理基本原理溶解溶解DNA，过滤，过滤除去不溶的杂质除去不溶的杂质向上述滤液中加入向上述滤液中加入NaCl，使使NaCl溶液物质的量浓度溶液物质的量浓度为为2 mol/L，并用玻璃棒沿，并用玻璃棒沿一个方向搅拌，然后过滤一个方向搅拌，然后过滤溶解溶解DNA使细胞因过度吸使细胞因过度吸水而破裂，释放水而破裂，释放核物质核物质在鸡血细胞液中加入一定在鸡血细胞液中加入一
4、定量的蒸馏水，并充分搅拌，量的蒸馏水，并充分搅拌，过滤后收集滤液过滤后收集滤液提取细胞提取细胞核物质核物质防止血液凝固，防止血液凝固，使血细胞与血浆使血细胞与血浆分离分离每每100 mL血液中加入血液中加入3 g柠柠檬酸钠，然后静置或离心，檬酸钠，然后静置或离心，除去上清液除去上清液制备鸡血制备鸡血细胞液细胞液目的目的实验操作实验操作步骤步骤除去溶于酒精的除去溶于酒精的杂质，获得较纯杂质，获得较纯净的净的DNA向上述滤液中加入等体积的体积分向上述滤液中加入等体积的体积分数为数为95%的冷却酒精溶液，待出现的冷却酒精溶液，待出现丝状物时用玻璃棒沿一个方向搅拌，丝状物时用玻璃棒沿一个方向搅拌，将丝
5、状物卷起将丝状物卷起提取提取较纯较纯净的净的DNA溶解溶解DNA，过滤，过滤除去杂质除去杂质将纱布上的黏稠物放入将纱布上的黏稠物放入2 mol/L的的NaCl溶液中，搅拌至完全溶解，溶液中，搅拌至完全溶解，然后过滤然后过滤DNA的再的再溶解溶解使使NaCl溶液的浓溶液的浓度降至度降至0.14 mol/L，析出析出DNA，过滤，过滤除去溶于该浓度除去溶于该浓度的的NaCl溶液的杂溶液的杂质质向上述滤液中缓缓加入蒸馏水并向上述滤液中缓缓加入蒸馏水并轻轻搅拌，至白色丝状黏稠物不轻轻搅拌，至白色丝状黏稠物不再增加时停止加水，然后用多层再增加时停止加水，然后用多层纱布过滤纱布过滤析出析出DNA目的目的实
6、验操作实验操作步骤步骤DNA在沸水浴条件下，遇二苯胺会变成在沸水浴条件下，遇二苯胺会变成蓝色蓝色实验结论实验结论不变色不变色变蓝变蓝实验现象实验现象沸水浴沸水浴5 min4加加4 mL二苯胺混匀二苯胺混匀3加加DNA丝状物溶解丝状物溶解2加入加入2 mol/L的的NaCl溶液溶液5 mL1BA试管试管序号序号去除不溶于去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质溶液的杂质去除溶于去除溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质溶液的杂质去除不溶于去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质溶液的杂质去除细胞膜、去除细胞膜、核膜等杂质核膜等杂质过滤目的过滤目的NaCl溶液溶液蒸馏水蒸馏水NaCl溶液溶液蒸馏水蒸馏水过滤前加过滤前加入的物质入的物质不溶于不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质溶液的杂质DNA不溶于不溶于2 mol/L NaCl溶液溶液的杂质的杂质细胞膜、细胞膜、核膜等残片核膜等残片纱布上纱布上DNA溶于溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质溶液的杂质DNA含含DNA的核物质的核物质滤液中滤液中第四次过滤第四次过滤第三次过滤第三次过滤第二次过滤第二次过滤第一次过滤第一次过滤
高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1
