《生物技术概论》书本复习思考题参考答案

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1、一、生物技术总论1.现代生物技术是一项高新技术,它具有高新技术的“六高”特征是指哪“六高”?高效益;高智力;高投入;高竞争;高风险;高势能。2.什么是生物技术,它包括那些基本的内容?它对人类社会将产生怎样的影响?生物技术,有时也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础科学的科学原理,采用先进的科学技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。生物技术是人们利用微生物、动植物体对物质原料进行加工,以提供产品来为社会服务的技术。它主要包括发酵技术和现代生物技术。其包括:基因工程、细胞工程、发酵工程和酶工程,现代生物技术发展到高通量组学芯片技术、

2、基因与基因组人工设计与合成生物学等系统生物技术。生物技术设计人类各个的层面,大到人类基因组的研究,小到我们平时吃到的米饭,在医药、动植物设计广泛,在电子产品中也有运用到生物技术。3.为什么说生物技术是一门综合性的学科,它与其他学科有什么关系?因为生物技术设计到很多个方面,有医药、林农业、食品、环境、能源、化学品、设等等,不仅仅是局限于生物这一方面,例如研究使用到了高科技电子设备,两者必须结合才能进行研究,生物分子学也被运用到计算机的研发中去。4.简要说明生物技术的发展史以及现代生物技术与传统生物技术的关系。现代生物技术是通过生物化学与分子生物学的基础研究而加快发展起来的。两者的差别:传统生物技

3、术的研究水平是细胞或组织水平,现代生物技术的研究水平是在分子水平。两者的关系:现代生物技术的研究是以传统生物技术为基础。现代生物技术的研究能够促进传统生物技术研究。5. 生物技术的应用包括那些领域?其涉及到:农业、食品、人类健康、能源问题、环境问题、工业、金属、军事、电子二、基因工程1. 基因工程研究的理论依据是什么?不同基因具有相同的物质基础;基因是可以切割的;基因是可以转移的;多肽与基因之间存在对应关系;遗传密码是通用的;基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。2. 简述基因工程研究的基本技术路线。通过基因文库筛选、PCR扩增或人工化学合成等手段获得目的基因;构建所需基因载体;目的基因与载

4、体在体外重组后导入受体细胞,进行增值或表达等。3. 简述限制性内切酶和DNA连接酶的作用机制。限制性内切酶是特异性地打断磷酸二酯键;DNA连接酶是特异性地形成磷酸二酯键。4. 在什么情况下最好使用粒载酶或噬菌体载体或cosmid载体?噬菌体载体适用于建立cDNA基因文库;cosmid载体适用于克隆大片段的外源DNA片段,所以被广泛地用于构建基因文库。5. 阐述人工染色体作为载体的特点。天然染色体基本功能单位包括复制起始点、着丝粒和端粒。复制起始点,保证了染色体复制,着丝粒保证了染色体分离,端粒封闭了染色体末端,防止粘附到其他断裂端,保证了染色体的稳定存在。6. 简述染色体定位整合克隆载体的应用

5、价值。应用于生命科学的各个领域,包括构建生物基因组文库,研究基因表达和调控等重要的生命现象,推动医、农、林、牧、渔等产业的发展,甚至与环境保护有密切的联系。三、细胞工程1.如何从一片嫩叶经组织培养出众多的完整植株?首先,将嫩叶细胞成为一个原生质体,然后脱分化,再进行再分化,在良好的环境中进行培育,得到完整的植株。2.如何从植物细胞培养中获得较高的次生代谢物产量?1.选择良好的外植体;2.高产细胞系的选育;3.培养条件的优化;4.提高培养技术水平;5.前体物的适当添加;6.抑制剂的适量使用。3.单倍体植株形单体弱,为什么还有不少科学家热衷于诱发产生单倍体植株?对于植株来说,缩短育种年限,易得纯种

6、。对人类来说,在无性繁殖这方面有无限的可能。4.什么叫植物原生质体?如何进行植物原生质体的融合?脱去细胞壁的细胞叫原生质体,两亲本菌株的选择和遗传标记的制作(选择不同的营养缺陷型;原生质体的制备(高渗条件);原生质体再生(测定再生率);融合(PEG、离心沉淀、电脉冲等);融合子的检出(直接检出法和间接检出法);实用性菌株的筛选5.可以采取那些途径脱去植物体内的病毒?如何检测植株中是否还有病毒?1.用植物的根尖或茎尖,进行无性繁殖;2. 有性脱毒,利用植株的种子。6.人工种子包括哪几部分?如何制备人工种子?一般都是由人工种皮、人工胚乳和胚状体三部分构成。将其某些植物细胞在试管中培育成胚状体,再用

7、富含营养物质和其他必要成分的凝胶物将胚状体包裹起来,制成人工种子。7.怎样才能在体外大量培育哺乳动物细胞?1.无菌操作取出目地细胞所在组织,以培养液漂洗干净;2.以锋利无菌道具割舍多余部分,切成小组织块;3.将小组织块置解离液离散细胞;4.低速离心洗涤细胞后,将目的细胞吸移至培养液内培养。8.如何获得能在体外大量生长、分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆?实验前数周分次用特异抗原免疫实验动物,得到大量的B淋巴细胞的脾细胞后,将骨髓瘤细胞和脾细胞以聚乙二醇法进行融合。再帅选出合适的杂合细胞进行繁殖。9.如何用体细胞克隆出一只哺乳动物?克隆动物有什么积极意义? 先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了

8、细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物子宫中使动物怀孕,便可产下与提供细胞核者基因相同的动物。10.开展干细胞研究对人类有何积极意义? 在体外鉴别、分离、纯化、扩增和培养人体胚胎干细胞,并以这样的干细胞为“种子”,培育出一些人的组织器官。干细胞及其衍生组织器官的广泛临床应用,将产生一种全新的医疗技术,也就是再造人体正常的甚至年轻的组织器官,从而使人能够用上自己的或他人的干细胞或由干细胞所衍生出的新的组织器官,来替换自身病变的或衰老的组织器官。假如某位老年人能够使用上自己或他人婴幼儿时期或者青年时期保存起来的

9、干细胞及其衍生组织器官,那么,这位老年人的寿命就可以得到明显的延长。11.有什么方法可以去除革兰阳性细菌、革兰阳性细菌和真菌的细胞壁?革兰阳性细菌:植物细胞壁用纤维素酶和果胶酶;真菌:用溶菌酶四、发酵工程1.微生物发酵产物有哪几种类型?酒类、醋、酱油、酸奶、醪糟、面包、糖果、果汁、罐头2.发酵培养基有哪些成分组成?发酵培养基的组成应丰富、完全,碳、氮源要注意速效和迟效的互相搭配,少用速效营养,多加迟效营养;还要考虑适当的碳氮比,加缓冲剂稳定pH值;并且还要有菌体生长所需的生长因子和产物合成所需要的元素、前体和促进剂等。除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等

10、。3.比较分批发酵、连续发酵和补料分批发酵的优缺点?分批发酵:能迅速获得足够量的菌体细胞后,延长稳定期,从而提高产量;连续发酵:优点:1.维持低基质浓度:可以除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,使不至于加剧供氧的矛盾;2.避免培养基积累有毒代谢物;3.可以提高设备利用率和单位时间的产量,节省发酵罐的非生产时间;4.便于自动控制。缺点:1.长时间的连续培养难以保证纯种培养;2.菌种发生变异的可能性较大。补料分批发酵:优点:1.可以除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,使不至于加剧供氧的矛盾;2.克服养分的不足,避免发酵过早结束。4.下游处理过程分为哪几个步骤?相应的分离

11、方法有哪些?分为分离、纯化、加工、剂型制备;分离方法:吸附法、离子交换法、沉淀法、萃取法、超滤法。5.简述青霉素的生产工艺。在冷冻管取材料至斜面母瓶进行孢子25摄氏度培养7天,得到大米孢子后,再进行25摄氏度孢子培养7天,移至一级种子罐进行种子培养4045个小时,移至二级种子罐继续进行种子培养15小时,移至发酵罐进行24小时的发酵,放罐,冷至15摄氏度,最后提炼。五、酶工程1.酶有什么特性?什么是酶工程?专一性,高效性,常温性等;酶工程就是将酶或者微生物细胞,动植物细胞,细胞器等在一定的生物反应装置中,利用酶所具有的生物催化功能,借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学

12、技术。2.为什么要进行酶的修饰,酶的蛋白质工程是如何进行的?酶的修饰能让酶更好的发挥催发的作用;从预期的酶功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的核糖核苷酸序列(RNA)找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列(DNA)3.酶固定方法有哪些,各有何优缺点?通过将酶包埋于凝胶、微囊体内,或通过共价键、离子键或吸附连接至固相载体上,或通过交联剂使酶分子互相交联等方法使酶不溶或局限在一个有限的空间内。优点:酶固定化以后,既保持了酶的催化特性,又克服了游离酶的不足之处,使其具有一般化学催化剂能回收反复使用的优点,并在生产工艺上可以实现连续化和自动化。4.如何维持酶反应器恒定的生产力?1.选择

13、适合的大小;2.选择进行适合的酶反应;3.考虑好催化剂的机械强度和比重六、蛋白质工程1.简述蛋白质结构的基本组件。氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链,再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合而成的高分子化合物。2.简述氨基酸的基本理化性质。1.一般性质 缬氨酸;2.紫外吸收性质;3.酸碱性质3.简述反向生物学的途径。先分离特定蛋白推测其基因或直接分离其基因,经克隆测序、表达,再研究其功能。4.举例说明对现有蛋白质进行改造的主要方法及其应用。1.胰蛋白酶:具有更高的专一性;2.金属硫蛋白;3.人白细胞介素-2;4.组织纤维蛋白溶酶原激活因子;5.枯草杆菌蛋白酶5.什么是蛋白质组学?阐明生物体

14、各种生物基因组在细胞中表达的全部蛋白质的表达模式及功能模式的学科。七、生物技术与农业1.现代植物生物技术与传统农业技术相比有何突出优越性?试举例说明。例如,培养出抗逆性强的植株,使得农作物能够少受天灾的影响。2.基因工程抗虫棉已大面积应用与生产,同时也造成食棉昆虫的耐食性,如何看待这个问题?并提出解决问题的途径。耐食性这个是个必然的结果,昆虫也有优胜劣汰,剩下来的都不是省油的灯,一般难以解决,毕竟是生物间的问题,顺其自然,才是回到自然的最好方法。3.简述开展水稻基因组计划的意义。人类赖以生存的农作物,水稻是一主要植物,水稻共有12条染色体,它们记录着与水稻的高产优质、美味香色以及与生长期、抗病

15、抗虫、耐旱耐涝、抗倒伏等所有性状相关的遗传信息。因此,解析水稻基因组序列,是改进水稻品质、提高水稻产量的前提和基础。4.简述生物农药的意义,并列出几种常用的生物农药。生物农药更适合于扩大在未来有害生物综合治理策略中的应用比重。而且它选择性强,对人畜安全,对生态环境影响小,并可以诱发害虫流行病。5.动物转基因常用的外源基因导入方法有哪些?各有何优缺点?显微注射法:优点:准确、快捷。缺点:成本很高。体细胞核移植方法:优点:经济、有效。缺点:耗时。6.动物胚胎工程的主要技术包括哪些方面?胎移植相关技术、动物克隆技术、转基因动物技术、胚胎干细胞技术7.生物技术在动物饲料工业上有哪些应用?1.DNA重组

16、生长激素的研究与应用;2.发酵工程研究与应用;3.寡肽、寡糖添加剂研究与应用;4.天然植物提取物的研究与应用;5.有机微量元素添加剂研究与应用;6.营养重分配剂研究与应用。8.畜禽基因工程疫苗有哪些类型?1.基因工程亚单位苗;2.基因工程活载体苗;3.合成肽苗;4.基因缺失疫苗;5.基因疫苗。9.什么是动物生物反应器?其应用前景如何?动物生物反应器是利用转基因活体动物,高效表达某种外源蛋白的器官或组织,进行工业化生产功能蛋白质的技术。动物生物反应器的研究开发重点是动物乳腺反应器和动物血液反应器。即,把人体相关基因整合到动物胚胎里,使生出的转基因动物血液中,或长大后产生的奶汁中,含有人类所需要的

17、不同蛋白质。这是当前生物技术的尖端和前沿研究项目。10.核移植技术将来在动物生产的应用上有哪些主要方面?1.克隆具有巨大经济价值的转基因动物;2.快速扩大优良种畜;3.挽救濒危动物11.干细胞技术在动物生产上有何应用前景?1.生产转基因的动物;2.生产克隆动物;3.研究细胞分化;4.研究发育的基因调控八、生物技术与食品1.什么是单细胞蛋白?简述它的几种来源。单细胞蛋白,也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。2.举例说明食品发酵的

18、用途。用以生产:白酒、啤酒、葡萄酒、黄酒、食醋、酱油、味精、发酵豆制品、发酵乳制品、发酵果蔬制品、柠檬酸、黄原胶及单细胞蛋白。3.谈谈现代生物技术在食品包装上的应用。根据现代生物技术的原理,食品包装分类方法很多。如按技法分为:防潮包装、防水包装、防霉包装、保鲜包装、速冻包装、透气包装、微波杀菌包装、无菌包装、充气包装、真空包装、脱氧包装、泡罩包装、贴体包装、拉伸包装、蒸煮袋包装等。4.食品检测中生物技术有哪些应用?1.免疫学技术的应用;2.分子生物学技术的应用;3.生物传感器技术的应用。5.你对转基因食品有什么看法?有利亦有弊,但选择它的是我们自己,所以,应该看到好的一面,也看到不好的一面,做

19、出正确的选择。6.谈谈现代生物技术在食品工业上的应用和发展趋势。1.大力开发食品添加剂新品种;2.发展微生物的保健食品;3.螺旋藻食品;4.开发某些虫类高蛋白食品。九、生物技术与人类健康1.现代生物技术在医学领域中的应用主要包括哪些方面?主要运用在疫苗的制作。2.现代生物技术生产的疫苗与传统生产的疫苗相比,有哪些优点?1.更加的高效;2.目的性更好;3.副作用少3.目前已上市的基因工程疫苗主要用于哪些疾病类型的预防?1.霍乱弧菌疫苗;2.麻风杆菌疫苗;3.幽门螺杆菌疫苗;4.虐原虫疫苗;5.血吸虫疫苗。4.疫苗研究经历了哪三个阶段?第一代疫苗是用病原体减毒或弱化生产的疫苗。很多一直沿用至今,如

20、破伤风疫苗、百日咳杆菌疫苗、白喉杆菌疫苗、结核杆菌疫苗(卡介苗)等。第一代疫苗对人们预防传染病的传播做出了不可磨灭的贡献。但第一代疫苗在生产和使用中具有不安全性及对某些传染病使用效果不够理想。20世纪70年代后开始生产第二代基因工程疫苗,即利用基因工程技术来生产的疫苗。基因工程疫苗是将病原体的抗原基因克隆到细菌或真核细胞内,利用细胞或其他细胞来生产病原体的抗原。因为不是生产病原体本身,所以在生产和使用上是安全的。20世纪90年代后进行第三代核酸疫苗(DNA疫苗、基因疫苗)的研究和生产。其原理是将控制抗原蛋白的基因直接转移到宿主细胞内,通过宿主细胞的表达系统表达抗原蛋白,诱导宿主产生免疫应答,达

21、到预防和治疗疾病的目的。5.用于疾病诊断的现代生物技术主要有哪些技术类型?1. ELISA技术;2.DNA诊断技术。6.ELISA技术主要适用于哪些疾病的诊断?DNA诊断技术包括那些技术?ELISA技术适用于传染病类的诊断:乙肝六项,丙肝,艾滋,梅毒,结核等。主要用于艾滋病检测。DNA诊断技术:DNA探针杂交技术;PCR技术;PCR-RFLP技术;PCR-ASO技术;PCR-ELISA技术;PCR-SSCP技术;PCR-DGGE技术;LCR技术;RFLP-探针杂交技术;生物芯片技术。7.基因芯片有何优点?生物芯片技术可广泛应用于疾病诊断和治疗、药物筛选、农作物的优育优选、司法鉴定、食品卫生监督

22、、环境检测、国防、航天等许多领域。它将为人类认识生命的起源、遗传、发育与进化、为人类疾病的诊断、治疗和防治开辟全新的途径,为生物大分子的全新设计和药物开发中先导化合物的快速筛选和药物基因组学研究提供技术支撑平台。8.目前利用生物技术开发的药物有哪些类型?为什么说基因工程药物的研究与开发具有巨大的应用潜力和十分诱人的前景?开发的药物类型:抗生素;其他天然药物;基因工程药物;治疗性抗体。基因工程药物是先确定对某种疾病有预防和治疗作用的蛋白质,然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来,经过一系列基因操作,最后将该基因放入可以大量生产的受体细胞中去,这些受体细胞包括细菌、酵母菌、动物或动物细胞、植物或植

23、物细胞,在受体细胞不断繁殖过程中,大规模生产具有预防和治疗这些疾病的蛋白质,即基因疫苗或药物。所以非常有益处,很有发展前景。9.目前基因治疗技术主要用于哪些疾病类型的治疗?1.单基因病;瘤苗与肿瘤;自杀基因治疗。10.疾病基因治疗有哪四大策略?肿瘤的基因治疗有哪两种策略?四大策略:基因置换;基因修正;基因修饰;基因失活。肿瘤的基因治疗两种策略:通过免疫系统杀灭癌细胞;对癌基因或抑癌基因进行修饰纠正。11.为什么说干细胞的应用将具有广阔的前景?干细胞的用途非常广泛,涉及到医学的多个领域。目前,科学家已经能够在体外鉴别、分离、纯化、扩增和培养人体胚胎干细胞,并以这样的干细胞为“种子”,培育出一些人

24、的组织器官。干细胞及其衍生组织器官的广泛临床应用,将产生一种全新的医疗技术,也就是再造人体正常的甚至年轻的组织器官,从而使人能够用上自己的或他人的干细胞或由干细胞所衍生出的新的组织器官,来替换自身病变的或衰老的组织器官。假如某位老年人能够使用上自己或他人婴幼儿时期或者青年时期保存起来的干细胞及其衍生组织器官,那么,这位老年人的寿命就可以得到明显的延长。12.人类基因组计划的任务是什么?将解决什么问题?他对医学的发展有什么发展?HGP任务;阐述人类全部基因的位置、功能、结构、表达调控方式以及疾病有关的变异。13.我国的人类基本组计划主要开展了哪些方面的工作?承担了计划的1%,即人类3号染色体从D

25、3S3610到端粒的30Mb区域的测序任务,并与2000年4月完成。14.你认为人类基因组计划将对人类产生什么样的影响? 1.了解基因组的表达及其调控;2。了解蛋白质组学;3.了解基因组多样性的研究;4.了解人类的起源和进化,对于生物医学会产生重大的影响。十、生物技术与能源1.简述开发新能源的必要性。化石能源不断衰竭,推测3050年之内用完,到时将进入无能源时代,干净又高效的能源的寻找刻不容缓。2.如何利用微生物勘探石油和提高采油量?利用微生物降解技术对油层中难以开采的沥青重组分进行降解,起到降低原油黏度作用,提高油床采收率。3.简述乙醇燃料能替代石油的依据。乙醇就是酒精,酒精自身能燃烧,能作

26、为能源。4.简述人工生产甲醇能替代天然气的依据。甲醇还可以转化成二甲醚,可以大量替代天然气。5.谈谈你对未来能源的见解。首先,再靠化石燃料几乎不可能,但乙醇等这些也就是谈一谈,试一试,现在也只是参渗一部分进入到化石燃料中就行调和罢了,不如专力于太阳能的转化使用更好,毕竟太阳能现在还不能说的上是成功了,转化率很低,如果能达到20%,那么就已经很可观了。十一、生物技术与环境1.生物法处理污水或废水有哪几种常见的方法?污水治理的意义何在?1.稳定塘法;2.人工湿地处理系统法;3.污水处理土地系统法;4.活性污泥处理法;5.生物膜处理法。水的自然自理速度非常慢,污水处理能使流入河道的水不过分污浊,破坏

27、大自然,也使人类二次使用水源更加洁净。2.空气污染治理与水污染治理有什么关系?常见的方法有几种?1.生物净气塔;2.渗滤器。3.填埋技术有哪些优点?为什么说堆肥技术是一种可循环利用资源的方法?优点:处理量大;投入少;简便易行。堆肥技术:因为堆肥就是将畜禽粪便进行处理得到有机肥的方法,不仅使随意排放的大量畜禽粪便得到了有效利用,也减少了它对环境的污染,是一种变废为宝的好办法。4.什么是生物修复技术?举例说明其应用价值。生物修复技术:通过生物,特别是微生物的作用清除土壤和水体中的污染物,或是使污染物无害化的过程。它包括自然和人为控制条件下的污染物降级或无害化的过程。5.举例说明生物技术在环境检测方

28、面的利用。1.指示生物;2.核酸探针和PRC技术;3.生物传感器及其它;4.生物芯片。十二、对生物技术发明创新的保护1.简述对生物技术发明进行的几种主要形式及其优缺点。1.专利保护:具有独占性;地域性;时间性。缺点:专力在申请时及发表时必须将专力内容公布,一旦专力失效,则为任何人所用。2防御性出版。2.用于申请专利的生物技术发明必须满足的条件?1.发明必须具有新颖性;2.发明必须具有实用性;3.发明必须具有创造性;4.在申请专利的说明书中对发明做详尽的描述。3.谈谈对生物技术发明进行专利保护的利与弊。专利能使个人的劳动成果得到体现,并且保护,但是他保护的同时,又会将内容公诸于世,使其他人也能知

29、道自己的劳动成果,形成剽窃,造成恶性循环。技术的发展就会不进反退。十三、生物技术安全性及其应对措施1.人们对生物技术安全性的担心来自哪些方面?比如转基因植物是否会和野生杂草进行传粉,而诞生“超级野草”,加大野草根除难度。又比如转基因的食品,通过食物链的富集作用进入人体,会不会造成毒害,比如恶性肿瘤等等。以上在没有科学做定论前,是人类所关心的转基因风险问题,毕竟高科技越强,杀伤力就越大,越难控制。2.谈谈现阶段转基因生物技术的应用及安全性。现阶段的转基因一般都是有益处的,危害的问题有,但很少,基本上转基因的食品都可以使用。但现在已经出现了转基因食品威胁到自然的平衡问题,所以我们应该看到未来的安全

30、,要看出转基因的两面性,不要犯下大错。3.人类是否应该克隆自己?人类虽然可以克隆其他的动物,但不应该克隆自己,首先克隆自己会造成一系列的问题发生,涉及到人际关系、财产、等等,伦理,法律方面也会形成很多的麻烦,但人类应该可以克隆自己的器官(如同干细胞)那么在自己生病的时候,可以作为一种治疗的方法。4.干细胞研究的利与弊?从克隆技术上讲,利用人体胚胎干细胞治疗疑难疾病是可行的。但是,要获取人体胚胎干细胞并非是件易事,需从成熟几天的胚胎中提取。可是,也并不是所有细胞均适合于治疗目的,因为细胞接受体存在排斥现象。为防止接受体出现排斥现象,胚胎干细胞必须取自患者自身物质加以培养。而且干细胞其实就是克隆人技术,涉及方方面面。5.人类基因组计划对人类生存所造成的影响如何?首先,这个计划是人类清楚的看清了自己的基因是怎样的,他可以使每个人都知道自己的基因有哪些缺陷从而去弥补,但也让别人看清楚了你。也许会引发人类基因歧视问题,到时候,可能会到了一种既使人类身体健康,但心理承受巨大压力的情况。

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