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1、重楼组织培养及快速繁殖,开 题 报 告,报 告 者：杨苏文 年 级： 医学生物技术2005级 实习单位：贵阳医学院医学生物技术教研室 指导老师：刘红美博士,内容概括,野生重楼实物图,重楼的属性及研究现状,1、重楼的属性 重楼属百合科，是多年生的草本植物。全世界该属植物约有20种10变种和若干变型，分布于欧亚大陆的热带至温带地区。 我国主产于云南、贵州、四川、广西等地。 本属植物主要以根茎入药，它具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊、止血、抗肿瘤、抗生育、免疫调节等多方面的功效。,重楼形态叶通常七片,轮生于茎顶,顶端着生一花,故而得名七叶一枝花。分布于海拔700-3200米的地区，夏秋采挖。野生重楼
2、靠种子和根茎繁殖，种子繁殖需5-7年才能采挖。,2、市场经济分析,长期以来，人们对重楼的利用一直依靠天然野生资源，但是由于本属植物生长缓慢，每年生长量非常小，由于长期过度的掠夺式的采挖，每年的消耗远远超出野生重楼的生长量。,据云南白药集团2008年调查资料显示，分布于我国境内的野生重楼80 已被开采利用，剩下的20按目前国内外市场的需求量测算，大约仅可用35年。,常言道：物以稀为贵，黄金有价药无价。 故重楼价格节节攀升。,96 01 03 06 08,21,110,38,25,170,（元/公斤）,（年）,1996年2008年重楼市场价格走势,在国内，不少知名企业所生产的药品中，主药都包含有重
3、楼。,云南白药集团的白药中，君药就是重楼 四川光大制药厂“非典”时名声大震的抗病毒冲剂中也是重用重楼 江苏南通制药总厂出品的季德胜蛇药片，其中用的主药七叶一枝花及为重楼,据了解，仅国内几家大型中成药制药厂对重楼的年需求量就达1500吨左右，医院和中药店配方需求量达1000吨左右，而全国野生重楼年收购量不足1500吨。造成重楼的供求矛盾在逐渐加剧。,近几年，许多地方虽已开始重楼的人工栽培，但重楼种子萌发时间长，出苗率低，而采用根茎直接种植或根茎切段种植，也需要用大量的原料药。因此，会加剧用种与原料药的矛盾。,为了解决这些问题，人们在寻求新方案时，想到了运用植物组织培养的方法来生产重楼。这一技术的
4、开发成功，将会为人工栽培提供大量的种苗，进而解决了资源保护和市场供需的问题。,目前，关于重楼组织培养的研究报道屈指可数，并且还没有一套完整的重楼组织培养至移栽存活的体系。因此，为了解决资源保护和市场需求的问题，对于重楼组织培养及快速繁殖的研究将刻不容缓。,主要参考文献：,1 李群，葛方兰，王丽. 重楼属植物初代培养过程中无菌培养物的建立J. 四川师范大学学报：自然科学版，2003，26（6）：624-626. 2 李群，陈丽萍，葛方兰. 重楼属植物愈伤组织的诱导和培养J. 四川师范大学学报（自然科学版），2006 ，29（1）。 3 杨丽云，陈翠，吕丽芬，袁理春. 云南重楼的组织培养与植株再生
5、J. 植物生理学通讯.2008，44（5）。 4 刘旭，陈玉菡，吴中应，罗川. 重楼市场需求与价格分析.中国现代中药.2007，9（6） 5侯玉平，胡晓立等. 滇重楼切块繁殖不定芽发生的组织学研究.云南大学学报（自然科学版）.2004，26（6）.,1、内容简要,1.1本实验以重楼的顶芽、叶、茎、根茎、根为主要外植体，通过调控不同的激素配比来筛选出最佳培养基类型（愈伤组织诱导、不定芽的诱导、增值及生根培养基）。 1.2将瓶内生根的再生植株，通过驯化，移栽到自然条件下的栽培基质中，获得优质健壮的种苗。,2、研究方法,主要是依托植物组织培养技术，利用植物细胞的全能性，对野生重楼的无性繁殖，获得大量
6、的优良种苗。,3、研究步骤,3.1 无菌体系的建立; 3.2 诱导愈伤组织培养基的筛选; 3.3 增殖培养基的筛选; 3.4 生根培养基的筛选; 3.5 驯化移栽;,4、技术路线,外植体,灭菌,无菌外植体,愈伤组织,诱导,增殖,不定芽,诱导,生根,驯化,移栽,成熟种苗,5、可能出现的技术问题及解决方案,（1）外植体灭菌困难。 解决方法： 可先用200mg/L羧苄西林钠和头胞唑林钠进行抑菌，再拿到超净工作台中进行灭菌处理。,（2）愈伤组织难诱导，易出现褐化现象。 解决方法：通过多种激素不同搭配地方法进行筛选，从而选择出最佳的培养基。对于褐化现象，我们可以加入活性炭等方法，降低褐化现象。 （3）生
7、根后，移栽不易存活。 解决方法：通过组织培养的种苗要经过从异养到自养的过渡阶段，如在此阶段注意种苗的保湿以及防止其感染微生物而腐烂，就能够成活。,6 预期结果： 6.1获得重楼诱导愈伤组织、分化不定芽、诱导生根的最适培养基。 6.2记录诱导愈伤组织的诱导率，增值倍数，诱导生根的时间、数量、直径和长度。 6.3获得驯化、移栽的存活率。 6.4建立重楼无性快速繁殖体系。,预期结果： 6.1 获得重楼诱导愈伤组织、分化不定芽、诱导生根的最适培养基。 6.2 记录诱导愈伤组织的诱导率，增值倍数，诱导生根的时间、数量、直径和长度。 6.3 获得驯化、移栽的存活率。 6.4 建立重楼无性快速繁殖体系。,进度安排 2009年3月份2009年4月份：查阅相关文献， 2009年5月份：选择及采集外植体，建立无菌体系 2009年6月份2009年7月份：诱导愈伤组织培养基的筛选 2009年8月份2010年2月份：增殖和生根培养基的筛选 2010年3月份：驯化、移栽 2010年4月结题、准备毕业论文。,运用组织培养和快速繁殖技术对重楼进行研究，不仅为今后重楼的繁殖和工业化生产提供参考依据，还可以解决其资源保护和开发利用之间的矛盾。 在市场经济方面，将带动农村经济发展，提高农村经济效益，满足了市场需求，并且还可以为提高国家经济税收创造条件。,Thank You !,
重楼组织培养及快速繁殖开题报告.ppt
