肺原位注射模型
上传人:d****1
文档编号:140000233
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肺原位注射模型细胞准备取状态良好的肺癌细胞(如A549)胰酶消化收集,用PBS分散细胞悬液,离心 后,加入基质胶(高浓度型),配比为50山细胞悬液+50山基质胶,其中细胞悬 液中的细胞量为3*106个。裸鼠准备选取 5-8 周龄健康裸鼠操作步骤1. 裸鼠loom水合氯醛麻醉后右侧卧位固定,右侧胸部皮肤用酒精消毒。2. 确定小鼠肺部位置,位于小鼠左侧肋骨下缘以上约1cm处,有两条纵向较粗的 血管,肺部位于这两条血管之间。3. 用手术剪剪开右侧胸部皮肤,一般可以看见颜色浅于肌肉的随呼吸运动上下 起伏的肺叶,如视野不明朗,可以用镊子钝性分离肌肉组织暴露目标视野。4. 用胰岛素针将准备好的细胞混合液,垂直进针,打入右肺中叶,进针深度在 3-5mm,推针速度尽量慢,全部推进去后可以轻轻压住进针处。5. 缝合皮肤,消毒,待小鼠苏醒后放回动物房继续饲养注意事项基质胶要注意使用温度,保证在冰上进行,不要让它凝固。
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