OneComp eBeads荧光补偿微球

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1、Flow Cytometry: OneComp eBeads Compensation BeadsOneComp eBeads荧光补偿微球为什么要调节补偿？流式细胞仪的荧光补偿隔一段时间之后需要调整到适合的位置。如果荧光补偿没 有调节好，会导致细胞分群不明显或者流式检测得到的结果图非常不漂亮，而且 会影响到检测结果的不真实。荧光补偿的调节对初学者来说非常不容易掌握， 同时，补偿调节是流式细胞术中比较难掌握的操作。尤其是一些不常见的标志检 测时，需要经验非常丰富的流式操作者根据多年的经验判断调节补偿，才可以 得到比较好的数据和图片。荧光染料发射光谱的重叠530/3G585/4650ZLPWave

2、length (nm)FITC和PE间的重叠就是一个光谱重叠的示例。在单染FITC过程中必须减去或 者补偿PE通道出来的荧光。如何调节补偿？调节光电倍增管的电压检测每种荧光素的自发荧光设置每种荧光素的单染对照（阳性表达）。什么是单染对照?阴性细胞补偿微球细胞似乎是一个不错的选择，但微球却非常好的替代细胞，因为细胞来源可能有 限或感兴趣的抗原表示在低水平。调节补偿要注意：通常要准备一管没有染色的细胞以调节PMT电压。不能用阴性（不染色的）微球来设置电压。OneComp eBeads补偿微球原理：补偿微球onecomp ebeads带荧光的补偿微球onecomp ebeads荧光检测抗体Fluor

3、escent Detector AbOneComp eBeads微球大约是淋巴细胞的大小，可连接各种荧光标记的抗体作为 调节补偿使用。每滴微球中都含有两群：一群是可以结合抗体的阳性群，一群是 不会与抗体反应的阴性群。产品目录号：cat# 01-1111规格：100 tests使用方便，一滴即可。与所有小鼠、大鼠和仓鼠来源的抗体反应，无论它们的轻链是kappa还是 lambda。适用于各种激发光：*适用于488 nm蓝光，532 nm绿光，561 nm黄光，633-635 nm红光，应用于 405nm紫光的荧光素中只需对eFluor 450进行过优化。OneComp eBeads 的优点：确保正

4、确的补偿，以保证正确的阳性率和阴性率。微球可增强信号，优化补偿。样本细胞中抗原可能会表达比较弱，而致补偿不准确。多色流式细胞实验中，双峰分布可以用于单色补偿对照。如果您记准备补偿样品时，补偿微球准备起来非常快捷。细胞来源有限时，微球是最好的补偿取代品。微球最适合于6 -12色分析的补偿调节。操作步骤：1. 准备好流式管，每种荧光抗体一个；2. 将微球翻转或者涡旋混匀；3. 在每管中加入一滴微球；4. 在管中分别加入相应的1 test抗体（不同抗体1 test的用量不同，具体 参见说明书）；5. 敲击或者涡旋混匀；6. 2-8C暗处孵育15-30分钟；7. 每管加2ml流式染色缓冲液，400-600 x g离心3-5分钟；8. 弃上清，每管加入0.2-0.4 mL流式染色缓冲液；9. 混匀后上机分析。