基因的体外重组和转化课件
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2、的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件IBamHI基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件(1)在引物上添加酶切位点基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件35T载体载体35载体载体T3535AAPCR产物产物基因的体外重组和转化课件Taq 酶PCR扩增+335PCR产物产物AA5T载体载体TT5533连接连接转化转化蓝白筛选蓝白筛选 目的片段目的片段基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体
3、外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件 CaCl2 基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件转化项目CaCl2受体菌DNA液体LB皿a阳性对照10ulPBR322DNA100ul 1b阴性对照10ul2ul连接液100ul 2c阴性对照10ul100ul 3d连接液转化组60ul6ul连接液600ul 4具体操作:具体操作:冰浴30;42 2 ;冰浴2 ;加37预热LB培养45;表中a、b、c各取100ul/皿涂布,连接液转化组d梯度涂布 I 50ul2皿;II.500ul浓缩后2皿)37倒置培养过夜 ;检查细菌生长情况。基因的体外重组和转化课件 质粒的质量和浓度质粒的质量和浓度 试剂的质量试剂的质量 杂菌和杂杂菌和杂DNA的污染的污染 基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件基因的体外重组和转化课件
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