微生物实验细菌培养接种学习教案

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1、会计学1微生物实验细菌微生物实验细菌(xjn)培养接种培养接种第一页，共22页。第1页/共22页第二页，共22页。去筋膜黄牛肉去筋膜黄牛肉(ni ru)绞碎绞碎500g加入加入1000ml蒸馏水蒸馏水直接直接(zhji)煮沸煮沸2小时小时调整酸碱度至调整酸碱度至pH 7.6过滤，补足失水过滤，补足失水重新校正重新校正pH一次一次分装，高压灭菌，分装，高压灭菌，15磅（磅（121.3）1520分钟分钟检菌如无细菌生长检菌如无细菌生长（液体透明）即可应用（液体透明）即可应用脱脂纱布过滤，按比例加入脱脂纱布过滤，按比例加入1蛋白胨、蛋白胨、0.5%NaCl，0.1%K2HPO4加热溶解补足水至加热溶

2、解补足水至1000ml4浸泡过夜煮沸半小时浸泡过夜煮沸半小时第2页/共22页第三页，共22页。手衣发钱材料材料(cilio)(cilio)：普通平板：普通平板 （1 1份份/ /组）组）盖上，标记盖上，标记(bioj) , (bioj) , 置置 37 37，18-24h18-24h后观察后观察。第3页/共22页第四页，共22页。材料材料(cilio)：血平板：血平板 （1份份/组）组） 距口1520cm用力(yng l)咳嗽三次置空气中（避日光照射）30分钟飞飞 沫沫空空 气气盖上，标记盖上，标记 , , 置置 3737，18-24h18-24h后观察。后观察。第4页/共22页第五页，共22

3、页。表皮表皮(biop)葡萄球菌在血琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落。葡萄球菌在血琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落。甲型溶血性链球菌形成甲型溶血性链球菌形成(xngchng)的的溶血现象也称为甲型溶血现象或草绿色溶血现象，属于不完全溶血。溶血现象也称为甲型溶血现象或草绿色溶血现象，属于不完全溶血。金黄色葡萄球菌形成的金黄色葡萄球菌形成的溶血现象也称为乙型溶血现象，属于完全溶血。溶血现象也称为乙型溶血现象，属于完全溶血。第5页/共22页第六页，共22页。菌种：混合菌液菌种：混合菌液材料：普通平板材料：普通平板用具用具(yngj)：接种环：接种环方法：分区划线方法：分区划线1区区2区区3区区4区区

4、原始(yunsh)区域第6页/共22页第七页，共22页。半固体培养基斜面培养基 细菌培养接种法细菌培养接种法-斜面接种、液体斜面接种、液体(yt)接种、半固体接种、半固体菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面材料(cilio)：斜面、液体、半固体培养基用具：接种环、接种针液体培养基第7页/共22页第八页，共22页。普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落(jnlu)生长现象。生长现象。注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐

5、及血平板上的溶血情况。第8页/共22页第九页，共22页。第9页/共22页第十页，共22页。琼脂(qingzh)斜面培养基上大肠埃希菌形成的菌苔生长现象菌苔（菌苔（mossy）指细菌指细菌(xjn)生长繁殖生长繁殖后，在培养基后，在培养基 表面形表面形成的一层培养物成的一层培养物第10页/共22页第十一页，共22页。1、 扩散(kusn)生长：具有动力的细菌,可见培养物扩散(kusn)和培养基变混浊。即有鞭毛的细菌：由穿刺线向外扩散(kusn)生长（羽毛状或云雾状）2、原位生长：没有动力的细菌，可见培养物没有扩散(kusn)，培养基仍然澄清。即无鞭毛的细菌： 沿穿刺线生长 2 1 1 2第11页

6、/共22页第十二页，共22页。枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验尿素酶试验硫化氢试验第12页/共22页第十三页，共22页。糖发酵糖发酵(f jio)试验试验不同细菌(xjn)分解糖类的能力和代谢产物不同。第13页/共22页第十四页，共22页。 甲基红（甲基红（methyl red）实验）实验(shyn)M - 甲基红（methyl red）实验(shyn)葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 甲基红 -葡萄糖丙酮酸 甲基红 +第14页/共22页第十五页，共22页。吲哚吲哚(yn du)（indol）试验）试验I-吲哚（吲哚（indol）试验）试验色氨酸色氨酸吲哚吲哚玫瑰吲哚玫瑰吲哚

7、 对二甲基氨基对二甲基氨基(nj)苯甲醛苯甲醛 第15页/共22页第十六页，共22页。枸橼酸盐利用枸橼酸盐利用(lyng)试验试验C -枸橼酸盐利用(lyng)（citrate utilization）试验利用(lyng)枸橼酸盐生长 +不能利用(lyng) -第16页/共22页第十七页，共22页。 硫化氢试验硫化氢试验(shyn)硫化氢试验（醋酸(c sun)铅培养基）某些细菌分解含硫氨基酸，生成H2S，H2S遇铁盐（如硫化亚铁、醋酸(c sun)铅等），则形成黑褐色硫化铁（铅）沉淀物，而呈黑色为（）。 第17页/共22页第十八页，共22页。 尿素尿素(nio s)酶试验酶试验 产生(chn

8、shng)氨使培养基变碱，指示剂显红色，为阳性。如：变形杆菌为阳性。第18页/共22页第十九页，共22页。IMViC试验试验(shyn)I - 吲哚（吲哚（indol）试验）试验(shyn)M - 甲基红（甲基红（methyl red）试验）试验(shyn)V - VP（Voges-Proskauer）试验）试验(shyn)C -枸橼酸盐利用（枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验试验(shyn)IMViC试验试验(shyn) I M Vi C试验试验(shyn) 大肠埃希菌大肠埃希菌 + + - - 产气杆菌产气杆菌 - - + + IMViC试验：试验：是吲哚、甲基红、

9、是吲哚、甲基红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定肠道杆菌的鉴定。第19页/共22页第二十页，共22页。2、IMViC试验第20页/共22页第二十一页，共22页。第三次实验课内容第三次实验课内容(nirng)1、热力对细菌和芽胞的杀菌作用、热力对细菌和芽胞的杀菌作用2、紫外线的杀菌作用、紫外线的杀菌作用3、常用化学、常用化学(huxu)消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验4、耐药性变异；、耐药性变异；5、细菌的鞭毛变异；、细菌的鞭毛变异；6、高压灭菌器的使用；、高压灭菌器的使用；7、细菌的鉴定程序；、细菌的鉴定程序；8、全自动微生物分析仪的基本原理及简单操作步骤、全自动微生物分析仪的基本原理及简单操作步骤第21页/共22页第二十二页，共22页。