1.1《DNA重组技术的基本工具》课件

会计学11.1DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具ppt课课件件第1页/共50页第2页/共50页1.DNA1.DNA的基本组成单位的基本组成单位: : 鸟嘌呤脱鸟嘌呤脱氧核苷酸氧核苷酸腺嘌呤脱腺嘌呤脱氧核苷酸氧核苷酸胞嘧啶脱胞嘧啶脱氧核苷酸氧核苷酸 胸腺嘧啶胸腺嘧啶脱氧核苷酸脱氧核苷酸脱氧核糖含氮碱基磷酸AGCT知识重温：知识重温：DNADNA分子的结构分子的结构第3页/共50页氢氢键键平面结构平面结构立体结构立体结构ATGCTACG磷磷酸酸二二酯酯键键3.DNA3.DNA分子的结构分子的结构第4页/共50页第5页/共50页第6页/共50页第7页/共50页第8页/共50页第9页/共50页第10页/共50页12限制酶的识别序列有何特点限制酶的识别序列有何特点？第11页/共50页中轴线中轴线第12页/共50页 1 1、EcoREcoR（大肠杆菌的一种限制酶）能（大肠杆菌的一种限制酶）能识别识别GAATTCGAATTC序列，并切割序列，并切割G G和和A A之间的磷酸二酯键之间的磷酸二酯键。 2 2、SmaSma能识别能识别CCCGGGCCCGGG序列，并切割序列，并切割C C和和G G之间的之间的磷酸二酯键磷酸二酯键。常用的两种限制酶常用的两种限制酶第13页/共50页黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端第14页/共50页 什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开中心轴线两侧切开时，时，被限制酶切开的被限制酶切开的DNADNA的末端带有几个的末端带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸，他们之间正好，他们之间正好互补配对互补配对，这样的末端叫，这样的末端叫黏性末端黏性末端。第15页/共50页平末端平末端平末端平末端第16页/共50页 当限制酶从识别序列的当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时中心轴线处切开时，切开的，切开的DNADNA的末端是平整的，这样的末端叫的末端是平整的，这样的末端叫平平末端末端。第17页/共50页第18页/共50页可把可把黏性末端黏性末端之间的之间的缝隙缝隙“缝合缝合”起来起来。Ecoli DNA连接酶或连接酶或T4DNA连接酶连接酶第19页/共50页 T4 DNA连接酶连接酶还可把还可把平末端平末端之间的之间的缝隙缝隙“缝合缝合”起来，但效率较低起来，但效率较低第20页/共50页氢氢键键TGCGATAC磷磷酸酸二二酯酯键键TACGTGCA DNA DNA聚合酶的作用：把聚合酶的作用：把单个单个脱氧核苷酸脱氧核苷酸连接到连接到DNADNA片段末端片段末端。磷磷酸酸二二酯酯键键 DNA DNA连接酶的作用：将两连接酶的作用：将两个个双链双链DNADNA片段片段连接起来。连接起来。第21页/共50页第22页/共50页三、“分子运输车” 基因进入受体细胞的载体第23页/共50页能复制并带着能复制并带着插入的目的基插入的目的基因一起复制因一起复制有切割位点有切割位点标记基因将来标记基因将来可用含青霉素可用含青霉素的培养基鉴别的培养基鉴别。2、基因工程中常用的载体、基因工程中常用的载体质粒质粒质粒是一种质粒是一种裸露的、结裸露的、结构简单独立构简单独立于细菌拟核于细菌拟核之外、具有之外、具有自我复制能自我复制能力的双链环力的双链环状状DNADNA分子分子。第24页/共50页质粒噬菌体的衍生物、某些动植物病毒等2、基因工程中常用的载体、基因工程中常用的载体第25页/共50页第26页/共50页第27页/共50页第28页/共50页第29页/共50页第30页/共50页第31页/共50页第32页/共50页第33页/共50页第34页/共50页第35页/共50页第36页/共50页第37页/共50页第38页/共50页第39页/共50页第40页/共50页第41页/共50页一、基因工程的概念：一、基因工程的概念：二、二、DNA重组技术的基本工具：重组技术的基本工具：1.限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶“分子手术刀分子手术刀” 2. DNA连接酶连接酶“分子缝合针分子缝合针”“课堂小结第42页/共50页第43页/共50页第44页/共50页第45页/共50页第46页/共50页第47页/共50页第48页/共50页第49页/共50页感谢您的观看。感谢您的观看。第50页/共50页