饲料中碳水化合物平衡指数的测定

ICS 点击此处添加 ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB 61陕 西 省 地 方 标 准DB 61/ XXXXX2018饲料中碳水化合物平衡指数的测定Determination of carbohydrate balance index for feeds（征求意见稿）2018 - XX - XX发布 2018 - XX - XX实施陕 西 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DBXX/ XXXXXXXXXI前 言本标准按照GB/T 1.1-2009规则起草。本标准由陕西省农业厅提出并归口。本标准起草单位：西北农林科技大学，杨凌现代农业产业标准化推广服务中心。本标准主要起草人：曹阳春、姚军虎、蔡传江、徐秀容、龚月生。本标准由西北农林科技大学负责解释。本标准首次发布。联系信息如下：单位：西北农林科技大学电话：029-87092102地址：陕西省杨凌农业高新技术产业示范区西农路22号邮编：712100DBXX/ XXXXXXXXX1饲料中碳水化合物平衡指数的测定1 范围本标准规定了饲料中碳水化合物平衡指数测定的术语和定义、原理、试剂和材料、仪器和设备、测定步骤和结果计算。本标准适用于粗饲料和反刍动物全混合日粮中碳水化合物平衡指数的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6435 饲料中水分的测定GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1 饲料 采样GB/T 20195 动物饲料 试样的制备GB/T 20806 饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定GB/T 20194-2018 动物饲料中淀粉含量的测定 旋光法GB/T 601 化学试剂 滴定分析（容量分析）用标准溶液的配置GB/T6003.1-2012 试验筛 技术要求和检验 3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1 中性洗涤纤维（NDF）用中性洗涤剂去除饲料中的脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等成分后，残留的不溶解物质的总称。3.2 物理有效因子（pef）衡量不同饲料来源或不同铡切长度粗饲料或全混合日粮的物理有效性的指标。3.3 物理有效中性洗涤纤维（peNDF）日粮中粗饲料纤维含量、颗粒大小等物理性质可以影响反刍动物咀嚼活动和瘤胃固液两相内容物分层的那部分中性洗涤纤维，通过稳定瘤胃内环境来保证生产性能和乳脂率。DBXX/ XXXXXXXXX23.4 瘤胃降解淀粉（RDS）日粮在反刍动物瘤胃中可被微生物利用和降解的淀粉。3.5 宾州颗粒度分级筛（PSPS） 美国宾夕法尼亚州立大学发明的一种用来测定粗饲料或全混合日粮粒度大小的专用筛。4 原理饲料中NDF含量按GB/T 20806方法测定，pef用宾州颗粒度分级筛测定，二者的乘积即为peNDF(peNDF = NDF × pef)。CBI的计算方法是利用日粮物理有效中性洗涤纤维与日粮瘤胃降解淀粉浓度的比值（CBI = peNDF ÷ RDS）。5 试剂和材料本标准中所用水应符合GB/T 6682-2008中的三级水，化学试剂为分析纯。5.1 十二烷基硫酸钠（C 12H25NaSO4）。5.2 乙二胺四乙酸二钠（C 10H14N2O8Na22H2O，EDTA 二钠盐）。5.3 四硼酸钠（Na 2B4O710H2O）。5.4 无水磷酸氢二钠（Na 2HPO4）。5.5 乙二醇乙醚（C 4H10O2）。5.6 正辛醇（C 8H18O，消泡剂）。5.7 丙酮（CH 3COCH3）。5.8 乙醇（C 2H5OH）溶液。5.9 甲基红。5.10 盐酸（HCl）溶液。5.11 Carrez 澄清溶液：a） 亚铁氰化钾（）溶液， cK4Fe(CN)6=0.25 mol/L，在 1 L 容量瓶中，将 106 g 三水亚铁氰化钾K 4Fe(CN)6·3H2O溶于水，定容至刻度。b）乙酸锌，0.5 mol/L 乙酸溶液,cZn(CH3COO)2=1 mol/L，在 1L 容量瓶中将 219.5 g 乙酸锌 (ZnCH3COO)2·2H2O和 30 g 冰乙酸溶于水,并用水定容到刻度。5.12 蔗糖（C 12H22O11）溶液。5.13 分样筛，孔径为 0.5 mm。DBXX/ XXXXXXXXX35.14 中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠溶液）：称取 18.6 g 乙二胺四乙酸二钠（C 10H14N2O8Na22H2O）和 6.8 g 四硼酸钠（Na 2B4O710H2O），放入 100 mL 烧杯中，加适量蒸馏水溶解（可加热），再加入30 g 十二烷基硫酸钠（C 12H25NaSO4）和 10 mL 乙二醇乙醚（C 4H10O2）；称取 4.56 g 无水磷酸氢二钠（Na 2HPO4）置于另一烧杯中，加蒸馏水加热溶解，冷却后将上述两溶液转入 1000 mL 容量瓶并用水定容。此溶液 pH 值 6.97.1。6 仪器和设备6.1 植物样品粉碎机。6.2 试验筛：孔径 0.42 mm（40 目），孔径 0.5 mm（35 目）。6.3 尼龙袋：35-50 m。6.4 分析天平：分度值 0.0001 g。6.5 电子天平：分度值。6.6 电热恒温箱。6.7 高温电阻炉。6.8 消煮器：配冷凝球 600 mL 高型烧杯或配冷凝管的三角烧瓶。6.9 玻璃砂漏斗（G2）。6.10 干燥器：无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂。6.11 抽滤装置：抽滤瓶和真空泵。6.12 宾州颗粒度分级筛(PSPS)：4 层。6.13 pH 计，准确至 0.1 pH 单位。6.14 沸水浴锅。6.15 旋光仪，准确至 0.01°，适合使用 200 mm 长旋光管。6.16 滴定管。6.17 回流冷凝器。6.18 100 mL 烧杯。6.19 10 mL 量筒。6.20 1000 mL 容量瓶。6.21 橡皮筋。6.22 塑料管。6.23 尼龙绳。7 测定步骤7.1 样品采集按GB/T 14699.1执行。按GB/T20195制备试样。中性洗涤纤维含量的测定7.1.1 样品处理将采集的鲜样用四分法缩分至500 g左右，风干或者65烘干，用植物粉碎机将样品粉碎至过孔径为0.42 mm试验筛（40目），封入样品袋 ，用于测定中性洗涤纤维和瘤胃降解淀粉含量含量。7.1.2 含量测定DBXX/ XXXXXXXXX4按GB/T 20806执行。7.2 物理有效因子的测定 7.2.1 PSPS 准备 根据筛网孔径由大至小（19.0 mm、8.0 mm和4.0 mm）自上而下依次排列，底盘位于最底层，组装PSPS至工作状态。7.2.2 取样与测定准确称取500 g饲喂状态的粗饲料或日粮样品置于19.0 mm筛网上，筛子水平震荡每个方向5次，共40次，震荡频率1.1 赫兹，每次水平移动距离大于17 cm，水平移动时不应有垂直运动。分别称量19.0 mm、8.0 mm和4.0 mm分级筛筛上和底盘上的饲料质量，并测定各层饲料干物质含量。7.2.3 干物质测定水分测定按GB/T 6435执行，计算干物质含量。7.3 瘤胃降解淀粉测定样品粉碎至通过0.5mm孔筛 (GB/T6003.1),混匀装于密封容器。称取2.5 g装入网眼直径为35-50 m的尼龙袋中。自来水浸泡冲洗，烘干恒重，编号备用。将两个尼龙袋夹在一根长约12 cm的半软性塑料管上，橡皮筋紧紧缠住，于饲后1小时放入瘤胃腹囊处，管的另一端用尼龙绳挂在瘘管塞上。24小时后取出的尼龙袋连塑料管立即在自来水下冲洗，然后放入水中浸泡55分种，再在中等流速的自来水下漂洗1分钟，水洗后的尼龙袋置于65烘箱中烘干。然后测定饲料原料和瘤胃降解后残渣中的淀粉含量。样品用稀盐酸分解,将溶解的淀粉糊化并部分水解。测定澄清溶液的总旋光度,并对溶于40%乙醇的其他物质及稀盐酸处理后光学活性引起的旋光度予以校正。用已知的系数乘以校正后的旋光度计算出的淀粉含量。主要分析步骤为耗酸量的测定、总旋光度测定和乙醇溶解物的旋光度测定。8 结果计算8.1 计算8.1.1 peNDF 4.0的计算pef4.0等于停留在19.0 mm、8.0 mm和4.0 mm分级筛上的饲料颗粒干物质量之和除以分级筛样品总干物质量，计算公式见（1）。pef4.0 =（DM 19.0 mm DM 8.0 mm DM 4.0 mm）÷ DMt .(1)式中：DM19.0 mm为停留在19.0 mm分级筛上的饲料颗粒干物质，单位为克（g）。DM8.0 mm为停留在8.0 mm分级筛上的饲料颗粒干物质，单位为克（g）。DM4.0 mm为停留在4.0 mm分级筛上的饲料颗粒干物质，单位为克（g）。DMt为筛分样品总干物质，单位为克（g）。peNDF4.0等于粗饲料或日粮NDF含量与pef 4.0的乘积，计算公式见（2）。peNDF4.0 = NDF × pef4.0 (2)8.1.2 peNDF 8.0的计算DBXX/ XXXXXXXXX5pef8.0等于停留在19.0 mm和8.0 mm分级筛上的饲料颗粒干物质量之和除以分级筛样品总干物质量，计算公式见（3）。pef8.0 =（DM 19.0 mm DM 8.0 mm）÷ DMt (3)peNDF8.0等于粗饲料或日粮NDF含量与pef 8.0的乘积，计算公式见（4）。peNDF8.0 = NDF × pef8.0 (4)式中：NDF为粗饲料或日粮干物质中中性洗涤纤维的含量。8.1.3 淀粉含量的计算计算公式见（5）W = 20000 ÷ D20 × （2.5 1 ÷ m1 - 52 ÷ m2） .(5)式中:W 为试样中淀粉含量，单位为克每千克（g/kg）。1 为测定的总旋光度值，以度（°）表示。2 为测定的乙醇溶解物的旋光度值，以度（°）表示。m1为测定总旋光度时样品的质量,单位为克（g）。m2为测定乙醇溶解物旋光度时样品的质量,单位为克（g）。D20为在波长为589.3 nm（钠光谱D线）处测定纯淀粉比旋度的数值。8.1.4 RDS 的计算RDS等于饲料瘤胃降解淀粉含量除以饲料原料淀粉含量，计算公式见（6）。RDS = (FS - RS) × FS.(6)式中：FS为饲料原料中淀粉含量，单位为克（g）。RS为饲料瘤胃降解残渣中淀粉含量，单位为克（g）。8.1.5 CBI 4.0的计算CBI4.0等于peNDF 4.0除以RDS,计算公式见（7）。CBI4.0 = peNDF4.0 × RDS (7)8.1.6 CBI 8.0的计算CBI8.0等于peNDF 8.0除以RDS,计算公式见（8）。CBI8.0 = peNDF8.0 × RDS (8)8.2 重复性每试样取两个或两个以上平行样进行测定，取平均值为分析结果。_