PCR技术简史课件

PCR技术简史课件PCR技术简史 1985年，美国年，美国PE-Cetus公司公司的的Mullis等人发明等人发明PCR 基本原理是在试管中模拟细基本原理是在试管中模拟细胞内的胞内的DNA复制复制 1993年，年，Mullis等因此项技等因此项技术获诺贝尔化学奖术获诺贝尔化学奖PCR技术简史课件引物引物引物引物PCR技术简史课件7272PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR的反应体系的反应体系4种dNTP混合物各200umol/L引物 各10100pmol模板DNA 0. .12ugTaq DNA聚合酶 2. .5uMg2+ 1. .5mmol/LPCR技术简史课件()()40 50 60 70 80 90 100100 80 60 40 20PCR技术简史课件1234522557294时间（min）温度（）PCR的基本原理适温延伸3高温变性1低温退火2重复13步2530轮目的DNA片段扩增100万倍以上DNA双螺旋DNA单链与引物复性DNA变性形成2条单链子链延伸DNA加倍PCR技术简史课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点1234522557294时间（min）温度（）适温延伸3高温变性1低温退火2重复13步2530轮目的DNA片段扩增100万倍以上DNA双螺旋DNA单链与引物复性子链延伸DNA加倍DNA变性形成2条单链模板DNA95PCR技术简史课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点9550引物1引物2DNA引物PCR技术简史课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点50引物1引物2DNA引物72Taq酶Taq酶PCR技术简史课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点72第1轮结束95第2轮开始PCR技术简史课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点955072TaqTaqTaqTaqPCR技术简史课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点72第2轮结束PCR技术简史课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点模板DNA第1轮扩增第2轮扩增第3轮扩增第4轮扩增第5轮扩增第6轮扩增PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR的特点的特点灵敏度高灵敏度高简便、快速简便、快速对标本的纯度要求低，血液、体腔液、洗嗽液、对标本的纯度要求低，血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等组织的粗提毛发、细胞、活组织等组织的粗提DNA。PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件 PCR技术简史课件PCR的类型和应用PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件55PCR技术简史课件A正常人A病 人正常人 (-)病 人 (+)病原微生物基因PCR技术简史课件PCR技术简史课件APCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件PCR技术简史课件 现现 嫌嫌1 嫌嫌2 嫌嫌3PCR技术简史课件（8）SNP技术技术 SNP (Single Nucleotide Polymorphism)，单核苷酸，单核苷酸多态性，是指多态性，是指DNA序列中单个核苷酸序列中单个核苷酸 突变引起的多态突变引起的多态性。性。PCR技术简史课件（9）RAPD技术技术RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA）称为随机扩增多态性称为随机扩增多态性DNA，RAPD是通过利用随是通过利用随机合成的机合成的10碱基寡聚核苷酸作为引物碱基寡聚核苷酸作为引物,对基因组进对基因组进行行PCR扩增，这些扩增产物扩增，这些扩增产物DNA片段的多态性片段的多态性,反映了基因组相应区域的反映了基因组相应区域的DNA多态性。多态性。 PCR技术简史课件PCR技术简史课件（10）RACE 技术技术 RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)是一项在已是一项在已知知cDNA序列（序列表达标签）的基础上克隆序列（序列表达标签）的基础上克隆5端或端或3端端缺失序列的技术。缺失序列的技术。PCR技术简史课件